127501040 Laporan Praktikum Teknik Isolasi Dan Inokulasi Mikroba

7/26/2019 127501040 Laporan Praktikum Teknik Isolasi Dan Inokulasi Mikroba

1/7

LAPORAN PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI

Hari, Tanggal :Selasa, 4 Oktober !""

Materi Praktik#$ :Teknik Isolasi %an Inok#lasi Mikroba

T#an : Mengeta'#i (ara teknik isolasi %an inok#lasi Mikroba

A) *ASAR T+ORI

Isolasi mikroba adalah memisahkan mikroba dengan lingkungannya dan akan dibuat

biakan murni yang akan di tanam dalam medium gula

Unsur unsure yang ada dalam mikroba

Faktor nutrisi

Faktor Oksigen

Berdasarkan tujuan dan macam media terdiri atas :

. Media padat

. Media miring

. Media cair

". Media plate

#da beberapa teknik dasar di dalam analisa mikrobiologi yang harus diketahui$ meliputi :1. %eknik trans&er aseptis

. #gar 'lants (#gar miring)

!. %urbiditas media broth (kekeruhan kaldu)". %eknik *ilusi (pengenceran)

+. %eknik ,our-,late (lempeng tuang)

. %eknik 'pread ,late (lempeng sebar)/. %eknik 'treak ,late (lempeng gores)

T+KNIK TRANS+R AS+PTIS


2/7

%eknik trans&er aseptis adalah suatu metode atau teknik di dalam memindahkan atau

mentrans&er kultur bakteria dari satu tempat ke tempat lain secara aseptis agar tidak terjadi

kontaminasi oleh mikroba lain ke dalam kultur.%eknik trans&er aseptis ini sangat esensial dan kunci keberhasilan prosedur mikrobial yang

harus diketahui oleh seorang yang hendak melakukan analisis mikrobiologi.

*i dalam teknik trans&er aseptis ada beberapa teknik yang perlu di&ahami$ yaitu :1) Inoculating (inokulasi)dengan jarum ose.

) Pipetting(mentrans&er dengan pipet)

!)Alcohol Flamming (mentrans&erdengan &orsep yang dibakar dengan alkohol)

T+KNIK STR+AK PLAT+

%eknik streak plate (lempeng gores) adalah suatu teknik di dalam menumbuhkanmikroorganisme di dalam media agar dengan cara menstreak (menggores) permukaan agar

dengan jarum ose yang telah diinokulasikan dengan kultur bakteri. *engan teknik ini

mikroorganisme yang tumbuh akan tampak dalam goresan-goresan inokulum bekas dari

streak jarum ose.

B) ALAT *AN BAHAN

1. 0aan ,etri

. 2arum Ose %usuk

!. 2arum Ose %umpul". 3ampu Bunsen

+. ,ipet

. %abung reaksi

/. Media #gar4. Media 0air

5. Bakteri

16. #kuades

-) -ARA K+R.A

1. %eknik Isolasi

,0#

a. 'iapkan caan petri kosong$ pipet$ lampu Bunsen dan larutan potato.b. Bakar ujung pipet di lampu Bunsen sebentar lalu ambil akuades sekitar

1 ml. Masukkan dalam caan petri dan dengan posisi caan petri

yang dibuka sedikit untuk mengurangi kontak langsung dengan udara.

Usahakan tidak jauh dari api.c. 'ebelum dituang bakar mulut erlenmeyer adah larutan potato

tersebut secara memutar setelah itu tuang larutan potato kedalam

caan petri sedikit saja hingga menutupi dasar caan petri.d. 'egera tutup caan petri tersebut dan diamkan beberapa saat hingga

larutan menjadi agar. Mac 0onkey #gar


3/7

a. 'iapkan media agar $ spidol$ 2arum ose tumpul $ lampu Bunsen

dan bakteri.

b. %andai sebuah titik dibelakang caan petri dengan spidolc. Bakar jarum ose dari bagian pangkal dalam terus hingga ke

bagian lup (ujung) sampai berpijar merah.

d. Biarkan selama beberapa detik sampai pijar menghilang dan suhusedikit turun tetapi jangan sampai dingin$ kemudian segera ambil

tabung reaksi yang berisi kultur bakteri$ buka penutupnya dengan

ketiga jari tengah$ manis dan kelingking sedangkan jari telunjukdan ibu jari memegang jarum ose.

e. Bakar bibir tabung reaksi dengan cara memutar tabung sehingga

semua bagian bibir tabung terkena api.

&. 'egera masukkan jarum ose ke dalam tabung reaksi$ lalu segera

keluarkan. Usahakan ketika memasukkan jarum ose jangan sampaimenyentuh dinding tabung dan lakukan di dekat pembakar bunsen.

g. Bakar kembali bibir tabung reaksi dan segera tutup. Ingat$ jarumose jangan dibakar kembali karena akan membunuh bakteri yang

akan diinokulasikan.

h. 7oreskan ujung jarum ose di titik yang telah kita tandai tadi lalugoreskan dengan membuat garis yang semakin kebaah semakin

pendek dengan arah kekanan$ putar caan agar semua goresan

merata.

. %eknik Inokulasi

1. Bakar jarum ose dari bagian pangkal dalam terus hingga kebagian lup (ujung) sampai berpijar merah. ,erhatikan penggunaanjarum ose karena setiap media menggunakan jarum ose yang

berbeda.

'0$ 3#0 Broth dan B73B menggunakan ose tumpul

2amur$ %'I# dan 'IM menggunakan ose tusuk.

. Biarkan selama beberapa detik sampai pijar menghilang dan suhu

sedikit turun tetapi jangan sampai dingin$ kemudian segera ambil

tabung reaksi yang berisi kultur bakteri$ buka penutupnya denganketiga jari tengah$ manis dan kelingking sedangkan jari telunjuk

dan ibu jari memegang jarum ose.

!. Bakar bibir tabung reaksi dengan cara memutar tabung sehinggasemua bagian bibir tabung terkena api.

". 'egera masukkan jarum ose ke dalam tabung reaksi$ lalu segera

keluarkan. Usahakan ketika memasukkan jarum ose jangan sampai

menyentuh dinding tabung dan lakukan di dekat pembakar bunsen.+. Bakar kembali bibir tabung reaksi dan segera tutup. Ingat$ jarum

ose jangan dibakar kembali karena akan membunuh bakteri yang

akan diinokulasikan.


4/7

. #mbil tabung reaksi lainnya yang akan diinokulasi$ buka tutupnya

dengan cara yang sama dengan cara () dan bakar bibirnya dengan

cara yang sama dengan cara (!)./. 'egera masukkan jarum ose ke dalam tabung tadi sebagaimana

cara (")

4. Bakar bibir tabung reaksi dan tutup sebagaimana cara (+)5. Bakar kembali jarum ose sebagaimana cara (1).

*) HASIL

1. Isolasi

Me%ia Ban/ak koloni

M#0 0onkey #gar 88

,0# 88

2amur 888

9eterangan :

- %idak tumbuh koloni

8 'edikit koloni

88 Banyak koloni

888 'angat banyak koloni

. Inokulasi

Me%ia Penga$atan

'IM ,ada bekas tusukan terlihat pertumbuhan bakteri melebar ke

samping

'0 %idak terjadi perubahan arna yakni tetat hijau tua

%'I# ,ada dasar tabung terjadi perubahan arna dari coklat ke kuning


5/7

B73B %imbul gas

arna menjadi keruh

3#0 Broth

- 'ingle

- %riple

arna menjadi keruh%erbentuk sedikit endapan%erdapat gas

arna menjadi keruh

%erdapat gas

+) P+MBAHASAN

1. M#0 0onkey #garM0# adalah medium kultur yang dirancang untuk tumbuh bakteri gram negati;e dan

noda mereka untuk &ermentasi laktosa. Bakteri-bakteri yang menghasilkan laktosamem&ermentasi arna merah tua menjadi arna merah muda atau ;iolet. ,ada mediaagar yang telah digoresi bakteri muncul banyak koloni dengan arna mengarah agak ke

;iolet.

. ,0#

Media ,0# digunakan untuk menumbuhkan bakteri. %erlihat pada media ,0# tumbuh

koloni kecil-kecil dengan jumlah banyak$

!. 2amur

2amur tumbuh subur bahkan dibagian tengah sudah ada yang berarna hitam tanda

baha jamur tersebut sudah memproduksi spora.

". 'IM

,enanaman pada media 'IM$ %erlihat pada daerah sekitar tusukan terjadi pelebaran kesamping yang menandakan baha bakteri tersebut telah akti& bergerak. 'ehingga dapat

dikatakan baha bakteri yang ditanam telah tumbuh.

+. '0

,ada media '0$apabila bakteri dapat tumbuh pada media ini$maka akan terjadi perubahan

arna karena bakteri yang tumbuh dapat merombak sitrat$sehingga arnanya akan

berubah menjadi biru. 9arena tidak terjadi perubahan arna pada media ini$maka tidak

ada bakteri yang tumbuh pada media ini.

. %'I#,ada dasar tabung terlihat terjadi perubahan menjadi kekuning-kuningan yang

menandakan baha telah terbentuk asam. Bakteri menggunakan 0itrat sebagai sumber

karbon

/. B73B


6/7

%erlihat media menjadi keruh tanda bakteri telah tumbuh. *i dalam media juga terdapat

gas. 7as tersebut berasal dari bakteri yang tumbuh dapat merombak laktosa pada media

B73B.

4. 3#0 Broth

a. 'ingle : %erbentuk gas dan arna menjadi keruh tanda bakteri


7/7

127501040 Laporan Praktikum Teknik Isolasi Dan Inokulasi Mikroba

Documents

Transcript of 127501040 Laporan Praktikum Teknik Isolasi Dan Inokulasi Mikroba