LAPORAN PRAKTEK KERJA LAPANG PENENTUAN TINGKAT … Tingkat Kematanga… · LAPORAN PRAKTEK KERJA...
Transcript of LAPORAN PRAKTEK KERJA LAPANG PENENTUAN TINGKAT … Tingkat Kematanga… · LAPORAN PRAKTEK KERJA...
LAPORAN PRAKTEK KERJA LAPANG
PENENTUAN TINGKAT KEMATANGAN GONAD,
FEKUNDITAS DAN DIAMETER TELUR IKAN LAYANG
(Decapterus spp) DI LABORATORIUM HISTOLOGI
LOKA RISET PERIKANAN TUNA
DENPASAR BALI
OLEH :
ASTITI EKA PUTRI
316005
PEMANFAATAN SUMBERDAYA PERAIRAN
SEKOLAH TINGGI TEKNOLOGI KELAUTAN (STITEK)
MAKASSAR
2019
PENENTUAN TINGKAT KEMATANGAN GONAD, FEKUNDITAS
DAN DIAMETER TELUR IKAN LAYANG (Decapterus spp)
DI LABORATORIUM HISTOLOGI LOKA RISET
PERIKANAN TUNA DENPASAR BALI
LAPORAN PRAKTEK KERJA LAPANG
Sebagai Salah Satu Syarat penyelesaian studi mahasiswa
di Sekolah Tinggi Teknologi Kelautan (STITEK) Makassar
Oleh:
ASTITI EKA PUTRI
316005
PEMANFAATAN SUMBERDAYA PERAIRAN
SEKOLAH TINGGI TEKNOLOGI KELAUTAN (STITEK)
MAKASSAR
2019
HALAMAN PENGESAHAN
i
KATA PENGANTAR
Penulis menyajikan usulan praktik kerja lapang yang berjudul
“Penentuan Tingkat Kematangan Gonad, Fekunditas dan Diameter Telur
Ikan Layang di Laboratorium Histologi Loka Riset Perikanan Tuna,
Denpasar Bali” sebagai salah satu syarat untuk meraih gelar sarjana
perikanan di Sekolah Tinggi Teknologi Kelautan (STITEK) Makassar.
Dalam penyusunan laporan Praktek Kerja Lapang ini, penulis
banyak mengalami kesulitan, namun berkat bimbingan dan arahan dari
berbagai pihak sehingga laporan Praktek Kerja Lapang ini dapat
terselesaikan.
Atas selesainya Laporan Praktek kerja Lapang ini penulis juga tidak
lupa menyampaikan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Ketua yayasan pendidikan Sekolah Tinggi Teknologi Kelautan
(STITEK) Makassar, Ibu Dr. Hj. Andi. Aslinda, M.Si,
2. Ketua Sekolah Tinggi Teknologi Kelautan (STITEK) Makassar,
Bapak Prof.Dr.H.Muh.Akmal Ibrahim, M.Si,
3. Wakil ketua I Bidang Akademik Sekolah Tinggi Teknologi Kelautan
(STITEK) Makassar, Bapak Awaluddin,SP.,M.Sc,
4. Dosen pembimbing PKL di Sekolah Tinggi Teknologi Kelautan
(STITEK) Makassar, Bapak Dr.Wayan Kantun. M.P, yang telah
memberikan masukan yang sangat berguna mulai dari penyusunan
laporan hingga saya mampu menyelesaikan penulisan laporan ini,
i
5. Pembimbing lapangan selama PKL di LRPT, Ibu Hety Hartaty.S.Pi
yang selalu membantu memudahkan penulis saat melaksanakan uji
laboratorium,
6. Kepada semua Staf Sekolah Tinggi Teknologi Kelautan (STITEK)
Makassar,
7. Seluruh pegawai LRPT, terkhusus kepada penyelia laboratorium
histologi yaitu Gussasta Levi A., S.S.T.Pi, dua orang analis yaitu
Indrastiwi Pramulati.,S.Si dan Desy Shintya Irene,S.Kel yang telah
banyak membantu saya pada saat kegiatan PKL berlanjut.
8. Teristimewa kepada kedua orangtuaku tercinta yang telah banyak
memberikan dukungan baik dari segi moral maupun materi dan
kasih sayangnya yang tak terhingga serta doa yang selalu mengalir
tiada hentinya.
Pada penulisan laporan ini, masih terdapat banyak kekurangan
bahkan kekeliruan. Oleh karena itu, diharapkan kritik dan saran yang
bersifat membangun agar selanjutnya lebih sempurna dan bermanfaat
bagi para pembaca dan yang membutuhkan.
Makassar, Oktober 2019
Penulis
ii i
DAFTAR ISI
Halaman
KATA PENGANTAR ............................................................................. iii
DAFTAR ISI .......................................................................................... iv
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ v
BAB I PENDAHULUAN ......................................................................... 1
A. Latar Belakang ......................................................................... 1
B. Maksud dan Tujuan .................................................................. 3
1. Maksud............................................................................... 3
2. Tujuan ....................................................................................... 3
C. Sasaran .................................................................................... 4
D. Metodologi ................................................................................ 4
1. Waktu dan Tempat .............................................................. 4
2. Tahapan Kegiatan ............................................................... 4
3. Mitra Kerja ........................................................................... 5
4. Alat dan Bahan .................................................................... 6
5. Metode Praktek Kerja Lapang ............................................. 11
6. Analisis Data ........................................................................ 14
BAB II KEADAAN UMUM LOKASI PRAKTEK KERJA LAPANG .......... 22
1. Peta Lokasi Praktek Kerja Lapang ......................................... 22
2. Sejarah Berdirinya Loka Riset Perikanan Tuna (LRPT) ......... 23
3. Visi dan Misi LRPT ................................................................. 24
4 .Tujuan dan Sasaran LRPT ..................................................... 24
ii i
5. Struktur Organisasi LRPT ...................................................... 25
6. Fasilitas LRPT ........................................................................ 27
7. Laboratorium Histologi LRPT ................................................. 27
BAB III URAIAN KEGIATAN ................................................................. 29
1. Kegiatan Enumerasi ............................................................... 29
2. Pengumpulan Sampel Ikan .................................................... 32
3. Pengambilan Data Biologis Ikan ............................................ 33
4. Pembuatan Preparat Sampel Gonad Ikan .............................. 35
5. Klasifikasi Tingkat Kematangan Gonad (TKG) ....................... 47
6. Diameter Telur ....................................................................... 52
7. Fekunditas .............................................................................. 53
8. Hubungan Panjang Bobot ...................................................... 56
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN .................................................... 58
1. Kesimpulan ............................................................................. 58
2. Saran ...................................................................................... 59
DAFTAR PUSTAKA .............................................................................. 60
LAMPIRAN............................................................................................. 62
ii i
ii i
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.1 AlurTahapanKegiatan PKL ............................................... 6
Gambar 2.1 PetaLokasi PKL di Kantor LRPT ...................................... 22
Gambar 2.2 StrukturOrganisasiLRPT .................................................. 23
Gambar 3.1 (a) Proses penimbangan ikan tuna. (b) pengukuran
pada ikan tuna sirip kuning. (c) penulisan hasil
penimbangan dan pengukuran pada form
sampling yang telah disediakan. ................................... 26
Gambar 3.2 IkanTuna Sirip Kuning ...................................................... 27
Gambar 3.3 Tuna Mata Besar (Thunnus obesus) ................................ 27
Gambar 3.4 Ikan Tuna Sirip Biru Selatan ............................................. 28
Gambar 3.5 Ikan Albakora (Thunnus alalunga) ................................. 28
Gambar 3.6 Gambar IdentifikasiIkan Layang ....................................... 29
Gambar 3.7 Alur Pengambilan data biologis ikan layang ..................... 30
Gambar 3.8 Alur Pembuatan Preparat Sampel Gonad ........................ 32
Gambar 3.9 Pemotongan Sampel Gonad ............................................ 33
Gambar3.10 (a) Memasukkan gonad ke tissue cassette, (b)
Proses Fiksasi ................................................................. 34
Gambar 3.11 Alur dehidrasi dalam proses preparasi sampel gonad .... 35
Gambar 3.12 (a) Memasukkan keranjang ATP kedalam ATP.
(b) Dehidrasi menggunakan ATP .................................... 36
Gambar 3.13 Penanaman sampel / blocking (penuangan
parafin pada base mould) ................................................ 37
Gambar 3.14 Pemotongan Blok Parafin ............................................... 38
Gambar 3.15 proses pemotongan (sectioning) .................................... 39
Gambar 3.16 (a) Peletakan pita parafin dalam water bath.(b) proses
pengeringan preparat pada hot plate ............................... 40
x
Gambar 3.17 Tahapan Pewarnaan Preparat Gonad ............................. 41
Gambar 3.18 (a) Proses staining. (b) perendaman preparat ke dalam
larutan hematoxylin. ......................................................... 42
Gambar 3.19 (a) Covering (pemberian lem entelan). (b) penutupan dengan
cover glass ....................................................................... 43
Gambar 3.20 Hasil pengamatan TKG secara histologi menggunakan
mikroskop compound dengan perbesaran 10x ................. 44
Gambar 3.21 Unyolked Stage (belum berkembang) ............................. 45
Gambar 3.22 Early yolked stage (berkembang) .................................... 45
Gambar 3.23 Advanced yolked stage (permulaan matang) .................. 46
Gambar 3.24 Migratory nucleus (hampir matang) ................................. 46
Gambar 3.25 Hydrated stage (matang/hidrasi) ..................................... 47
Gambar 3.26 Folikel Postovulasi (POF) ................................................ 47
Gambar 3.27 Pengukuran diameter telur menggunakan mikroskop trinokuler
perbesaran 10x ................................................................ 48
Gambar 3.28 Alur perhitungan fekunditas ............................................ 49
Gambar 3.29 Penampakan telur menggunakan mikroskop stereo ....... 50
Gambar 3.30 Hubungan panjang total & bobot ikan layang ................. 51
Gambar 3.31 Hubungan panjang cagak & bobot ikan layang ............... 52
1
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1. Surat Permohonan Izin PKL ....................................................... 56
2. Surat Persetujuan PKL ............................................................... 57
3. Surat Pengantar PKL ................................................................. 58
4. Jurnal Harian PKL ...................................................................... 59
5. Halaman Pengesahan Draft Laporan ......................................... 101
6. Dokumentasi Kegiatan ............................................................. 102
7. Peralatan yang digunakan .......................................................... 103
8. Bahan yang digunakan ........................................................... 109
9. Perhitungan diameter telur ........................................................ 110
10. Surat Keterangan/Sertifikat ........................................................ 113
DAFTAR TABEL
2
Halaman
Tabel 1.1 Alat-alat yang digunakan ...................................................... 7
Tabel 1.2 Bahan yang digunakan ......................................................... 9
Tabel 1.3 Penentuan Tingkat Kematangan Gonad (TKG)
secara histologi .......................................................................... 17
Tabel 3.1 Diameter Telur ...................................................................... 48
3
BAB I
PENDAHULUAN A. Latar Belakang
Ikan layang (Decapterus spp.) adalah ikan pelagis kecil yang
memiliki nilai ekonomis dan melimpah di perairan Indonesia. Ikan
yang tergolong suku Carangidae ini biasanya hidup bergerombol
(Nontji, 2005). Ikan layang mempunyai peranan penting dalam
perikanan purse seine sehingga banyak dicari dan ditangkap oleh
armada purse seine sebagai target utama hasil tangkapan. Dalam
upaya pengelolaan sumberdaya perikanan, terutama sumberdaya
ikan pelagis kecil maka diperlukan informasi yang up to date tentang
sumberdaya tersebut (Ongkers et al., 2016).
Ikan layang merupakan komoditas ekonomis penting sehingga
jika terjadi upaya penangkapan ikan yang tidak terkontrol maka dapat
mengancam kelestariannya, dan lebih lanjut dapat menghancurkan
potensi ekonomis yang terkandung di dalamnya (Dahlan, 2012). Oleh
karena itu, kajian mengenai biologi reproduksi seperti Tingkat
Kematangan Gonad (TKG), Diameter Telur dan Fekunditas perlu di
lakukan untuk menambah wawasan mengenai sumberdaya perikanan
agar populasi ikan layang tidak mengalami degradasi.
Laboratorium Histologi Loka Riset Perikanan Tuna (LRPT)
merupakan laboratorium uji yang sudah beroperasi sejak tahun 2011.
4
Fokus kegiatan di histologi LRPT menitiberatkan pada perkembangan
gonad ikan dengan pengamatan tingkat/stadium kematangan secara
mikroskopis melalui jaringan gonadnya, perhitungan fekunditas dan
diameter telur.
Aspek biologi pada perikanan merupakan aspek penting dalam
kajian ilmu-ilmu perikanan, pada umumnya ikan menjadi salah satu
organisme yang sering digunakan sebagai obyek penelitian.
Penelitian-penelitian mengenai kehidupan ikan telah berkembang dan
kini mengalami spesifikasi secara sistematis.
Parameter yang biasanya diukur adalah tingkat kematangan
gonad, fekunditas dan beberapa parameter lainnya. Fekunditas
adalah semua telur-telur yang telah siap untuk dikeluarkan pada waktu
pemijahan. Pengetahuan tentang fekunditas, dapat membantu dalam
menduga jumlah anak ikan yang akan dihasilkan dan juga dapat
ditentukan jumlah ikan yang akan hidup dalam kelas umur yang
bersangkutan.
Gonad merupakan organ reproduksi yang terdapat pada ikan.
Gonad dibagi menjadi dua yaitu gonad ikan jantan dan gonad ikan
betina, untuk gonad ikan jantan dinamakan testis dan untuk gonad
ikan betina bernama ovarium. Di dalam gonad terdapat telur yang
kemudian akan berkembang menjadi gamet.
Berdasarkan uraian di atas, maka perlu dilakukan praktikum
laboratorium untuk mengetahui berbagai sifat biologi reproduksi ikan
5
terutama tingkat kematangan gonad, fekunditas dan diameter telur.
Tingkat kematangan gonad dapat digunakan sebagai pendugaan
status reproduksi ikan, ukuran dan umur pada saat pertama kali
matang gonad, proporsi jumlah stok yang secara produktif matang
dengan pemahaman tentang siklus reproduksi bagi suatu populasi
atau spesies (Nielson,1983). Pengetahuan tentang tingkat
kematangan ikan perlu untuk mengetahui musim-musim ikan memijah,
sehingga penangkapannya dapat dikontrol.
B. Maksud dan Tujuan
1. Maksud
Maksud dari pelaksanaan Praktek Kerja Lapang (PKL) di LRPT,
Denpasar Bali adalah untuk menambah pengalaman bagi
mahasiswa dalam dunia kerja, mengaplikasikan ilmu yang
diperoleh pada saat perkuliahan di kampus Sekolah Tinggi
Teknologi Kelautan (STITEK) Makassar dan menambah
pengetahuan tentang penentuan TKG ikan dengan
menggunakan metode histologi.
2. Tujuan
Tujuan dari pelaksanaan PKL ini adalah sebagai berikut:
a. Mengetahui dan memahami cara pengambilan sampel
gonad ikan layang yang baik dan benar.
6
b. Mengetahui dan memahami cara pembuatan preparat
sampel gonad ikan layangdi laboratorium histologi LRPT
Denpasar Bali.
c. Mengetahui dan dapat menganalisa hasil dari pembacaan
preparat yang meliputi penentuan tingkat kematangan
gonad, pengukuran diameter telur serta perhitungan
fekunditas.
C. Metodologi
1. Waktu dan Tempat
Kegiatan PKL dilaksanakan di Loka Riset Perikanan
Tuna (LRPT) Denpasar, Bali. Total kegiatan yang dilakukan
pada saat PKL adalah 36 hari orang kerja (HOK) mulai pada
tanggal 25 September sampai 31 Oktober 2019.
2. Tahapan Kegiatan
Tahap kegiatan PKL dimulai dari mengikuti kegiatan
enumerasi selama seminggu di pelabuhan benoa,
pengumpulan sampel ikan (meliputi pengidentifikasian jenis dari
sampel ikan yang digunakan), pengambilan data biologis
(panjang dan berat), pembuatan preparat sampel gonad ikan,
klasifikasi perkembangan gonad, pengukuran diameter telur,
perhitungan fekunditas, serta analisa preparat secara histologi
di Loka Riset Perikanan Tuna (LRPT), Bali. Adapun tahapan
kegiatan PKL dapat dilihat pada gambar 1.1
7
.
Gambar 1.1 Alur Tahapan Kegiatan PKL.
Enumerasi
Pengumpulan Sampel Ikan Layang
Pengumpulan Data Biologi Ikan Layang
Pembuatan Preparat Sampel Gonad Ikan Betina
Klasifikasi Perkembangan Gonad
Pengukuran Diameter Telur
Perhitungan Fekunditas
Analisis Data
Penyusunan Laporan
Seminar Hasil
8
3. Mitra Kerja
Mitra kerja dari kegiatan PKL ini yaitu LRPT
merupakan Unit Pelaksana Teknis Kementerian Kelautan
dan Perikanan di bidang riset sumber daya perikanan tuna
dan sejenisnya, yang berada di bawah dan bertanggung
jawab kepada Kepala Badan yang menangani Riset
Kelautan dan Perikanan serta Pengembangan Sumber Daya
Manusia Kelautan dan Perikanan. LRPT mempunyai tugas
melaksanakan kegiatan riset sumber daya perikanan tuna
dan sejenisnya (tuna like species) di wilayah Republik
Indonesia di perairan Samudera Hindia.
4. Alat dan Bahan
Alat-alat dan bahan-bahan yang dipergunakan untuk
penentuan TKG, fekunditas dan diameter telur, seperti
terlihat pada Tabel 1.1 dan 1.2
Tabel 1.1 Alat-alat yang digunakan
No. Nama Alat Fungsi
1. Dissecting set Untuk membedah perut ikan
dan mengambil gonad
2. Botol sampel Sebagai wadah
penyimpanan sampel gonad
3. Timbangan Untuk menimbang ikan dan
gonad
4. Rak preparat
Sebagai media untuk
meletakkan object glass yang
telah berisi preparat
5. Base mould Sebagai cetakan pada saat
penanaman sampel gonad
9
(embedding)
6. Staining jar
Sebagai media untuk
meletakkan larutan kimia
pada saat staining dan
dehidrasi
7. Lemari asam
Sebagai media pelindung
pada saat dehidrasi dan
staining agar bau bahan
kimia tidak menyebar
8. Microtome
Untuk memotong sampel
pada saat sectioning dengan
ketebalan 5µm
9. Water bath
Untuk memanaskan air pada
saat sectioningagar sampel
dapat meregang dan
mengurangi kerutan
10. Hot plate Untuk mengeringkan object
glass
11. Parafin dispenser Untuk mencairkan parafin
pada saat proses embedding
12. Cold plate
Untuk mempercepat proses
pembekuan parafin pada
saat blocking
13. Automatic Tissue
Procesor
Untuk proses dehidrasi
secara modern
14. Cawan petri
Sebagai tempat untuk
memisahkan butir telur
dengan selaputnyapada saat
pengamatan fekunditas
15.
MikroskopStereo
Zeiss Stemi
2000-C
Untuk menghitung
fekunditas.
16.
Mikroskop
compound
trinokuler + PC
Untuk mengamati TKG dan
diameter telur disambungkan
dengan komputer.
17. Handtally counter Untuk menghitung jumlah
telur
18. Jas lab Melindungi tubuh dari bahan
kimia
10
19. Sendal kodok Melindungi kaki dari bahan
kimia
20. Baskom plastik Sebagai tempat untuk
meletakkan rak tissue
casette pada saat washing
21. Tissue Casette Sebagai media untuk
meletakkan sampel gonad
yang telah dipotong.
22. Pipet tetes Untuk mengambil dan
memindahkan sampel telur
23. Spatula Untuk memisahkan telur dari
selaputnya
24. Jarum Ose Untuk memisahkan telur
dengan selaputnya
25. Bogorov Sebagai tempat meletakkan
butir telur pada saat
pengamatan
26. Botol semprot Sebagai sempat aquadest
27. Diamond pen Untuk menulis pada object
glass
28. Digital Timer Sebagai penanda waktu
29. Lemari sampel Untuk menyimpan sampel
30. Kuas Untuk membersihkan
microtome
31. Kotak preparat Untuk menyimpan preparat
32. Kalkulator Untuk membantu
perhitungan
33. Alat tulis Untuk mencatat hasil
pengamatan
34. Pengggaris Untuk mengukur panjang
ikan
Tabel1.2. Bahan yang digunakan
No. Nama Bahan Fungsi
1. Gonad betina
ikan layang
Sebagai objek yang diamati
2. Tissue cassette Sebagai wadah irisan gonad
yang dijadikan sampel
3. Formalin 10 % Untuk mengawetkan gonad
11
agar tidak mudah rusak
4. Air
Sebagai penetral objek,
melarutkan formalin 10 %
pada saat washing setelah
fiksasi, mengurangi warna
yang terlalu tebal saat staining
5. Alkohol 70 %
Untuk membersihkan dan
mengurangi cairan dalam
irisan gonad dalam tissue
cassette pada saat dehidrasi
6. Alkohol 90 %
Untuk membersihkan dan
mensterilkan sampel saat
dehidrasi dan mengurangi
kandungan cairan pada
sampel, untuk memasukkan
kembali cairan pada preparat
sebelum preparat dimasukkan
kedalam zat warna serta
mengurangi cairan didalam
preparat setelah dimasukkan
kedalam cairan pewarna
(staining)
7. Alkohol absolut
Untuk membersihkan dan
mensterilkan sampel saat
dehidrasi dan mengurangi
kandungan cairan pada
sampel
8. Aquadest
Untuk cairan penetral pada
saat staining dan cairan untuk
membantu pemisahan telur
dengan selaputnya pada saat
pengamatan fekunditas
9. Parafin Untuk penanaman gonad pada
base mould
10. Xylen
Untuk membersihkan dan
mensterilkan sampel serta
menghilangkan cairan dalam
sampel agar parafin bisa
masuk ke jaringan, untuk
melunturkan parafin pada saat
12
staining agar zat warna dan
cairan bisa masuk kedalam
jaringan dan mengeringkn
jaringan pada saat setelah
pewarnaan
11. Hematoxilin Untuk memberikan warna
ungu pada inti sel
12. Eosin Untuk memberikan warna
orange pada sitoplasma
13. Entellan Lem untuk merekatkan object
glass dan cover glass
14. Sarung tangan /
glove
Untuk melindungi tangan dari
zat-zat berbahaya pada saat
pengamatan
15. Masker
Untuk menutup hidung agar
terhindar dari bau menyengat
dari larutan
16. Tissue Untuk membersihkan
peralatan
17. Kertas kalkir
Untuk menulis identitas ikan
yang dimasukkan kedalam
botol sampel berisi sampel
gonad.
5. Metode Praktek Kerja Lapang
a. Sumber Data
Sumber data yang digunakan dalam kegiatan Praktek
Kerja Lapang ini yaitu data primer, obervasi dan
dokumentasi seperti diuraikan berikut.
1) Data Primer
Data primer yang diambil dalam Praktek Kerja
Lapang terdiri dari pengamatan aspek biologi
13
reproduksi ikan layang, seperti data panjang cagak
ikan/Forked Length (FL), panjang total/Total Length
(TL), bobot ikan, bobot gonad, klasifikasi
perkembangan gonad, diameter telur dan fekunditas.
2) Observasi
Kegiatan observasi pada Praktek Kerja Lapang
dilakukan dengancara mengamati dan mencatat
hasil pengamatan untuk memperoleh gambaran
yang lebih jelas tentang kondisi pengamatan.
3) Dokumentasi
Kegiatan dokumentasi dilakukan dengan cara
mendokumentasikan kegiatan penelitian dalam
bentuk foto baik di lapangan maupun di laboratorium.
b. Metode Praktek
Dalam kegiatan PKL pengamatan aspek biologi
reproduksi ikan layang, data yang dikumpulkan yaitu
panjang ikan Forked Length (FL), Total Length (TL),
bobot ikan, bobot gonad, klasifikasi perkembangan
gonad, diameter telur dan fekunditas.
1) Penentuan ukuran Ikan
Ukuran ikan yang dipergunakan sebagai sumber
data primer pada PKL ini adalah ukuran panjang
cagak dan bobot total ikan. Ukuran panjang cagak
14
dipergunakan untuk menduga ukuran matang gonad
dari ikan, sedangkan bobot dipergunakan untuk
memprediksi bobot matang gonad ikan.Selain itu
ukuran panjang dan bobot ikan juga dapat
dipergunakan untuk menduga hubungan antara
panjang ikan dengan ukuran pertama kali matang
gonad, hubungan panjang dengan fekunditas dan
hubungan bobot dengan fekunditas.
2) Penentuan Kematangan Gonad
Tingkat kematangan gonad adalah tahap tertentu
perkembangan gonad sebelum dan sesudah ikan
memijah (Effendie, 1979). Penentuan tingkat
kematangan gonad sangat penting dilakukan, karena
sangat berguna untuk mengetahui perbandingan
antara gonad yang matang dengan stok yang ada di
perairan, ukuran pemijahan, musim pemijahan, dan
lama pemijahan dalam suatu siklus (Sukimin et al.,
2002). Penentuan tingkat kematangan gonad dapat
dilakukan dengan 2 cara yaitu secara morfologis
(visual) dan secara histologis. Untuk penelitian di
perairan Laut Bali penentuan tingkat kematangan
gonad dilakukan secara histologi.
15
3) Fekunditas
Studi aspek biologi ikan tentang fekunditas ikan yang
berhubungan erat dengan populasi ikan di suatu
perairan sangat penting, karena berguna untuk
pengelolaan sumber daya ikan tersebut. Untuk
mendapatkan data tersebut, teknik-teknik
pengambilan, pengawetan dan penghitungan telur
ikan yang benar dan akurat sangat diperlukan.
4) Diameter Telur
Diameter telur adalah garis tengah atau ukuran
panjang dari suatu telur yang diukur dengan
menggunakan mikrometer berskala yang sudah di
tera. Semakin meningkat tingkat kematangan gonad,
garis tengah telur yang ada di ovarium juga semakin
besar.
6. Analisis Data
a. Korelasi panjang dan bobot ikan dengan fekunditas
Kegunaan analisis hubungan panjang berat dari suatu
populasi ikan jika dihubungkan dengan data kelompok
umur adalah untuk mengetahui stok, umur saat
pertama memijah, siklus kehidupan, kematian
pertumbuhan dan produksi (Fafloye,2005).
Untuk menganalisis hubungan panjang berat panjang
16
ikan dikonversikan kedalam berat dengan
menggunakan fungsi berpangkat (Pauly,1984) yaitu
hubungan panjang berat ikan dapat diperoleh dengan
rumus persamaan:
W = a L�
Keterangan :
W = Berat (gram)
L = Panjang Cagak (cm)
a = Intercept
b = Slope
Bentuk linier dengan persamaan tersebut menjadi:
Log W = log a+ log b L
Nilai a dan b diperoleh dari analisis regresi dengan Log
W sebagai sumbu y dan Log L sebagai sumbu x.
Mengetahui nilai b=3 atau b≠3 dilakukan uji-t dengan
hipotesis sebagai berikut:
H0 :pertumbuhan isometrik (b=3), b > 3 yaitu
pertumbuhan ikan sebanding dengan pertambahan
beratnya.
H1 : pertumbuhan allometrik (b≠3), b < 3 berarti
pertumbuhan bersifat allometrik negatif, yaitu
pertumbuhan panjang lebih cepat dari pada
pertumbuhan berat, b > 3 berarti pertumbuhayaitu
17
pertumbuhan berat lebih cepat dari pada pertumbuhan
panjang.
Kaidah pengambilan adalah sebagai berikut:
Jika :
t hitung < t α/2 ; (n-2), terima H0
t hitung > t α/2 ; (n-2), terima H1
Kematangan Gonad
Penentuan tingkat kematangan gonad secara histologi
dilakukan di laboratorium histologi LRPT yang mengacu
pada kriteria Farley dan Davis (1999) yang membagi
menjadi 5 tahapan (tabel 1.3),yaitu :
18
Tabel 1.3. Penentuan Tingkat Kematangan Gonad (TKG)
secara histologi.
Keadaan Deskripsi
Belum berkembang
(Unyolked stage)
Sel telur berukuran kecil dengan
sitoplasma berwarna ungu dan nukleus
yang berbentuk bulat.Peripheral
nucleoli mungkin bisa terlihat di dalam
nukleus, bersamaan dengan
perbedaan warna dari sitoplasma.
Berkembang
(Early yolked
stage)
Butiran york yang berwarna ungu
pucat mulai terlihat di sitoplasma.
Butiran york tersebut awalnya berada
di tepi oosit dan berpindah kearah
nukleus. Nukleus telah terlihat.
Keseluruhan oosit berwarna merah
muda saat butiran york muncul di tepi.
York yang berwarna ungu masih
terlihat dekt inti sel. Zona radiata yang
berwarna ungu sangat terlihat dalam
fase ini.
Permulaan
matang
(Advanced yolked
stage)
Butiran york yang berwarna pink
terlihat di sepanjang oosit. Zona
radiata melebar, berubah menjadi
merah muda dan mengalami
penebalan. Nukleus terletak ditengah-
tengah.
Hampir matang
(Migratory
nucleus stage)
Nukleus berpindah ke tepi dari oosit
dan mulai muncul beberapa oil
droplets berukuran besar. Terkadang
bisa terlihat oosit dengan butiran york
19
dan oil droplets saja. Jarang terlihat
nukleus terletak di sudut oosit, tetapi
dengan mulai munculnya oil droplets
dibagian tengah biasanya
menandakan adanya fase perpindahan
nukleus. Fase ini berumur singkat dan
hanya dapat terjadi pada waktu
tertentu.
Matang / hidrasi
(Hydrated stage)
Butiran york bergabung sepenuhnya
(berwarna pink keseluruhan). Oosit
mengalami perbesaran ukuran yang
signifkan dan berbentuk tidak
beraturan (mungkin karena kehilangan
cairan selama proses preparasi
histologi) dengan tidak atau tidak ada
gelembung lemak (oil droplets). Saat
oosit meluas, zona radiata merengang
menjadi lebih tipis.
Dalam klasifikasi perkembangan gonad ditentukan
dengan melihat ada tidaknya maturity markers. Dengan adanya
Maturity markers dapat membedakan ikan yang belum dewasa
(immature) sampai ikan dewasa (mature) namun sedang
memasuki masa istirahat dalam bereproduksi (inactive).
Terdapat 4 analisis menentukan maturity markers antara lain
Postovulatory Follicle (POF), Alpha atresia, Beta atresia, dan
Brown Bodies (Farley et.al.,2013).
20
b. Fekunditas
Metode perhitungan yaitu menggunakan metode
gravimetrik berdasarkan Bagenal (1978) dalam
Tampubolon (2016). Adapun rumus perhitungan
fekunditas ikan adalah sebagai berikut :
F = ����� x n... (3)
Keterangan :
F = Fekunditas (butir)
Wg = Berat Gonad Total (gram)
Ws = Berat Gonad Sampel (gram)
N = Jumlah Telur Sampel (butir).
c. Diameter Telur
Perhitungan diameter telur dilakukan di laboratorium
histologi LRPT dengan menggunakan mikroskop
compound trinokuler yang disambungkan ke PC dan
menggunakan aplikasi Zen axio vision yang telah
diinstal di PC. Perhitungan diameter telur dilakukan
dengan cara mengukur diameter telur secara vertikal
dan horizontal. Apabila bentuk telur tidak bulat
sempurna maka diameter telur dihitung menggunakan
rumus sebagai berikut :
D = �� � �� � .....(2)
Keterangan :
21
D = Diameter telur sebenarnya ( μm )
D1 = Diameter telur secara horizontal (μm)
D2 = Diameter telur secara vertikal (μm)
22
BAB II
KEADAAN UMUM LOKASI PKL
A. Profil Instansi
1. Sejarah Berdirinya Loka Riset Perikanan Tuna (LRPT)
Loka Riset Perikanan Tuna atau disingkat LRPT merupakan
Unit Pelaksana Teknis Kementerian Kelautan dan Perikanan di
bidang riset sumber daya perikanan tuna dan sejenisnya (tuna like
species) yang berada di bawah dan bertanggung jawab kepada
Kepala Badan Riset dan Sumber Daya Manusia Kelautan dan
Perikanan. Loka Riset Perikanan Tuna pertama dibentuk pada
tahun 2011 dengan nama Loka Penelitian Perikanan Tuna
berdasarkan Persetujuan Menteri Negara Pendayagunaan Aparatur
Negara dan Reformasi Birokrasi dalam Surat Nomor B-
3677/M.PAN-RB/12/12 tanggal 2 Desember 2010. Kemudian pada
tahun 2017, nama Loka Penelitian Perikanan Tuna berubah
menjadi Loka Riset Perikanan Tuna yang ditetapkan melalui
PERMEN KP No. 16/ PERMEN-KP/ 2017 tentang Organisasi dan
Tata Kerja Loka Riset Perikanan Tuna.
Dasar hukum pembentukan Loka Riset Perikanan (LRPT)
meliputi Persetujuan Menteri Negara Pendayagunaan Aparatur
Negara dan Reformasi Birokrasi dalam Surat Nomor B-
3677/M.PAN-RB/12/12 tanggal 2 Desember 2010 dan Peraturan
23
Menteri Kelautan dan Perikanan Republik Indonesia Nomor:
PER.27/MEN/2010 tentang Organisasi dan Tata Kerja Loka
Penelitian Perikanan Tuna. Pada 27 Maret 2017, LP2T resmi
berganti nama menjadi Loka Rist Perikanan Tuna (LRPT)
berdasarkan Peraturan Menteri Kelautan dan Perikanan Republik
Indonesia Nomor 16/PERMEN-KP/2017 tentang Organisasi dan
Tata Kerja Loka Riset Perikanan Tuna.
2. Peta Lokasi Praktek Kerja Lapang
Lokasi Praktek Kerja Lapang di lakukan di Kantor Loka Riset
Perikanan Tuna (LRPT) yang terletak di Jl.Mertasari No.140
Br.Suwung Kangin, Sidakarya, Denpasar, Bali. Dengan Kode Pos
80223 , Indonesia dengan titik koordinat 08° 42’ 18.54” LS dan 115°
14’ 00,23” BT. Selain itu, dilakukan juga praktek enumerasi di
Pelabuhan Benoa (Gambar 2.1).
Gambar 2.1. Peta Lokasi PKL di Kantor LRPT (Google earth,2019)
24
3. Fasilitas LRPT
Adapun fasilitasyang disediakan di Loka Riset Perikanan
Tuna (LRPT) Denpasar, Bali yaitu:
a. Ruang kepala
Loka
b. Ruangurusan tata
usaha
c. Ruang urusan tata
operasional
d. Ruang urusan
pelayanan teknis
e. Ruang peneliti
f. Ruang rapat
g. Ruang rapat kecil
h. Laboratarium
Histologi
i. Laboratarium
genetika
j. Laboratarium
otolith
k. Laboratarium data
l. Mushola
m. Perpustakaan
n. Parkiran
o. Pura
p. Guest House
q. Dapur
B. Visi dan Misi Loka Riset Perikanan Tuna (LRPT)
Adapun visi dan misi yang dimiliki oleh Loka Riset Perikanan
Tuna (LRPT) antara lain:
1. Visi
“Menjadi Institusi Utama Penyedia Data dan informasi Perikanan
Tuna di Samudera Hindia”
2. Misi
a. Menyediakan data dan informasi terkini hasil riset perikanan
tuna
b. Mengembangkan profesionalisme kelembagaan dan
sumberdaya riset perikanan tuna
25
C. Struktur Organisasi Loka Riset Perikanan Tuna (LRPT)
Adapun struktur organisasi dan pejabat struktural yang duduk
dalam organisasi Loka Riset Perikanan Tuna terlihat pada Bagan
dibawah ini.
Gambar 2.2 Struktur Organisasi LRPT TA2019.
LRPT memiliki struktur organisasi yang dipimpin oleh kepala
Loka Riset Perikanan Tuna dan empat bagian dibawahnya yaitu
Urusan Tata Usaha mempunyai tugas melakukan urusan tata usaha,
keuangan, kepegawaian, perlengkapan, dan rumah tangga, serta
penyusunan laporan. Subseksi Tata Operasional mempunyai tugas
melakukan penyusunan rencana, program dan anggaran,
penyebarluasan hasil riset serta pemantauan dan evaluasi. Subseksi
Pelayanan Teknis Mempunyai tugas melakukan pelayanan teknis,
pengelolaan sarana dan prasarana, dan kerja sama riset. Kelompok
Jabatan Fungsional mempunyai tugas melaksanakan kegiatan
penelitian sumberdaya perikanan tuna dan sejenisnya (tuna like-
species) dan kegiatan lain sesuai dengan tugas masing-masing
jabatan fungsional berdasarkan peraturan perundang-undangan.
26
Laboratarium histologi merupakan laboratarium yang terdapat
di LRPT dan mulai berproses pada tahun 2011. Didalam
Laboratorium histologi terdapat 2 ruangan antara lain ruang Lab.
Basah dan Lab. Kering (analisa). Fokus penelitian pada
Laboratorium histologi LRPT yaitu pengamatan TKG ikan betina
secara mikroskopis.Penentuan TKG ikan dimulai dari pembuatan
preparat gonad secara histologi hingga analisis. Pembuatan preparat
dilakukan di Lab.Basah dan proses analisa dilakukan di Lab. Kering.
Organisasi Laboratorium histologi meliputi kepala
Laboratorium histologi yaitu Hety Hartati, S.Pi, penyelia Laboratorium
histologi yaitu Gussasta Levi A., S.S.T.Pi, dua orang analis yaitu
Indrastiwi Pramulati.,S.Si dan Desy Shintya Irene,S.Kel. Sampel
yang dianalisis adalah sampel gonad ikan betina yang berasal dari
lokasi pengambilan data LRPT.
27
BAB III
URAIAN KEGIATAN
A. Kegiatan Enumerasi
Mengikuti kegiatan enumerasi yang dilakukan selama 4 hari di
Benoa, bertujuan untuk mengetahui bagaimana cara enumerator
mengumpulkan data hasil tangkapan ikan segar dan ikan beku.
Kegiatan pengumpulan data di perusahaan dilakukan dengan
mencatat bobot dan panjang hasil tangkapan.
Gambar 3.1 (a) prosespenimbangan ikan tuna. (b) pengukuran
pada ikan tuna sirip kuning. (c) penulisan hasil penimbangan dan pengukuran pada form sampling yang telah disediakan.
a b
c
28
Berikut jenis-jenis ikan beserta ciri-ciri khusus hasil identifikasi
secara visual di lapangan:
1. Tuna Sirip Kuning (Thunnus albacores)
Gambar 3.2 Tuna sirip kuning (Dokumentasi pribadi).
a) Badan ramping dan memanjang,
b) Finlet berwarna kuning dengan tepi garis hitam sangat
tipis,
c) Keel berwarna hitam.
2. Tuna Mata Besar (Thunnus obesus)
Gambar 3.3 Tuna mata besar (Dokumentasi pribadi).
a) Bentuk tubuh lebih bulat dan lebih pendek,
b) Diameter mata lebih besar terlihat jelas bagian kornea
mata dengan lensa mata,
29
c) Finlet berwarna kuning dengan tepi garis hitam tebal,
d) Keel berwarna hitam keabu-abuan.
3. Tuna Sirip Biru Selatan (Thunnus maccoyii)
Gambar 3.4 Tuna sirip biru selatan (Dokumentasi pribadi).
a) Finlet berwarna kuning hitam dengan ujung tepi
berwarna putih tipis,
b) Bagian perut badan berwarna putih perak,
c) Keel berwarna kuning.
4. Albakora (Thunnus alalunga)
Gambar 3.5 Tuna albakora (Dokumentasi LRPT, 2019).
a) Finlet berwarna putih,
b) Sirip dada sangat panjang mencapai sirip punggung
kedua,
c) Keel berwarna hitam.
30
B. Pengumpulan Sampel Ikan
Spesies ikan yang diambil adalah spesies ikan layang. Ikan
layang dipilih karena merupakan ikan pelagis kecil dan pada ukuran
15cm telah terdapat gonad yang bisa diamati. Ikan yang digunakan
diambil di pasar Kedonganan, Jimbaran, Bali pada hari Sabtu
tanggal 28 September 2019.
Adapun klasifikasi ikan layang Menurut Saanin (1984) vide
Simbolon (2011), sebagai berikut :
Kelas : Pisces
Sub kelas : Teleostei
Ordo : Percomorphi
Sub ordo : Percoidae
Famili : Carangidae
Sub Famili: Carangidae
Genus : Decapterus
Spesies: Decapterus spp.
Gambar 3.6. Gambar Identifikasi Ikan Layang (Dokumentasi pribadi).
31
C. Pengambilan Data Biologis Ikan
Proses pengambilan data biologis ikan layang merupakan
tahap pertama dalam kegiatan histologi. Pengambilan data biologis
dilakukan pada hari sabtu, 28 Oktober 2019 di Loka Riset Perikanan
Tuna (LRPT) Denpasar, Bali. Alur Pengambilan Data biologisikan
layang dapat lihat pada gambar 3.7,
Gambar 3.7. Alur Pengambilan data biologis ikan layang
Sebelum pengambilan data biologis ikan dilakukan, hal
pertama yang harus dilakukanyaitu pengambilan gambar ikan.
Pengambilan gambar tersebut dilakukan pada latar belakang
berwarna putih dan diberi penggaris. Setelah pengambilan foto
selesai, maka selanjutnya ikan yang akan dibedah dan diberi nomor
urut agar data yang dihasilkan tidak tertukar satu sama lain. kedua
yaitu pengukuran panjang cagak. Pengukuran panjang cagak
dilakukan dengan cara meletakkan ikan diatas papan ukur yaitu
Pengambilan Data Panjang CagakIkan
Pengambilan Data Panjang Total Ikan
Pengambilan Data Berat Ikan
Pengambilan Data Berat Gonad Ikan
Pengambilan Gambar Ikan Layang
32
mulai dari ujung mulut hingga pangkal ekor kemudian dicatat
hasilnya. Ketiga yaitu pengukuran panjang total dilakukan dengan
cara yang sama seperti mengukur panjang cagak yaitu meletakkan
ikan diatas papan ukur kemudian mulai diukur dari ujung mulut
hingga ujung ekor ikan. Setelah didapatkan ukuran panjang ikan,
kemudian tahap keempat yaitu ikan ditimbang menggunakan
timbangan untuk mendapatkan berat ikan. Tahap kelima yaitu
pembedahan perut ikan untuk pengambilan gonad. Perut ikan
dibedah menggunakan Dissecting set mulai dari anus menuju ke
dada secara horizontal, lalu gonad diambil secara hati-hati agar tidak
mudah rusak. Gonad yang telah diambil tersebut lalu ditimbang
beratnya menggunakan timbangan digital dan dicatat hasilnya.
Gonad yang telah diambil dimasukkan kedalam botol sampel dan
diberi larutan formalin 10% agar gonad tetap awet dan tidak mudah
rusak sehingga gonad dapat digunakan dalam proses pegamatan
selanjutnya.
D. Pembuatan Preparat Sampel Gonad Ikan
Pembuatan preparat dilakukan di laboratorium LRPT
Denpasar, Bali.Sampel yang digunakan adalah sampel gonad ikan
layang betina. Tahapan dari pembuatan preparat dapat dilihat pada
gambar 3.8.
33
Gambar 3.8. Alur Pembuatan Preparat Sampel Gonad
Adapun langkah kerja dalam pembuatan preparat sampel gonad
secara histologi antara lain :
1. Pemotongan sampel
Tahap pertama yaitu tahap pemotongan sampel.
Pemotongan dilakukan dengan menggunakan pisau bedah dan
Pemotongan Sampel
Pengawetan (Fiksasi)
Dehidrasi
Penanaman Sampel (Blocking)
Pemotongan (Sectioning)
Pewarnaan (Staining)
Penutupan Sampel (Covering)
Analisis
Hasil
34
pinset untuk menjepit gonad. Sampel gonad dalam keadaan
utuh diambil pada bagian tengah gonad, titik tersebut
merupakan titik yang mewakili seluruh gonad. Tahap
pemotongan dapat dilihat pada gambar 3.9.
Gambar 3.9. Pemotongan sampel gonad.
Pemotongan sampel dilakukan secara hati-hati dengan
ketebalan kurang lebih 1mm untuk menghindari kandungan air
yang berlebihan pada irisan sampel gonad tersebut, karena
apabila sampel terlalu tebal dan proses selanjutnya tidak
berjalan sempurna maka bagian tengah sampel akan
mengalami pembusukan atau berjamur. Sampel yang masih
sisa disimpan kembali pada botol sampel untuk cadangan
apabila terjadi proses yang gagal selama pengamatan
sehingga dapat dilakukan pengamatan ulang menggunakan
sampel yang masih tersisa.
35
2. Pengawetan (Fiksasi)
Sampel gonad yang telah dipotong dimasukkan
kedalam tissue cassette yang sebelumnya telah diberi kode
sampel menggunakan pensil. Tissue cassette yang telah
berisi sampel tersebut kemudian selanjutnya direndam dalam
larutan formalin 10% selama ± 24 jam, proses ini disebut
dengan proses fiksasi.
Gambar 3.10. (a) Memasukkan gonad ke tissue casette.
(b) Proses Fiksasi.
Fiksasi bertujuan untuk mempertahankan elemen-elemen
jaringan agar tetap sama dalam bentuk, warna dan ukurannya.
Selain itu, fiksasi juga berfungsi agar jaringan lebih mudah
menyerap zat warna.
3. Dehidrasi
Dehidrasi sendiri berarti pengurangan cairan yang
berada pada sampel gonad, dalam hal ini yang dimaksud
cairan adalah air. Air harus dikurangi karena akan mengganggu
proses selanjutnya yaitu pada saat perendaman pada parafin,
a b
36
jika masih terdapat air maka parafin tidak dapat menembus
jaringan sehingga akan berpengaruh pada tahap selanjutnya
dan sampel akan hancur atau susah pada saat pemotongan
(sectioning). Dehidrasi dilakukan dengan menggunakan alat
Automatic Tissue Processor (ATP). Untuk tahapan dehidrasi
dapat dilihat dalam diagram alur pada gambar 3.11.
Gambar 3.11 Alur dehidrasi dalam proses preparasi sampel
gonad.
Tiap-tiap komponen tersebut ditempatkan dalam gelas
berukuran besar dan sampel dalam tissue casette ditempatkan
pada keranjang berbentuk tabung yang kemudian dipasang pada
alat. Waktu yang diperlukan untuk satu kali running yaitu 8 jam.
Dalam penggunaan alat ATP tidak perlu memindahkan objek
dari larutan satu ke larutan lainnya, karena ATP akan bekerja
secara otomatis sesuai waktu yang telah di setting. Proses
running menggunakan ATP dapat dilihat pada gambar 3.12.
Alkohol 70% Alkohol 70% Alkohol 90%
Alkohol 90% Alkohol Absolut Xylene
Xylene Paraffin Paraffin
37
Gambar 3.12. (a) Memasukkan keranjang ATP kedalam ATP.
(b)Dehidrasi menggunakan ATP.
4. Penanaman sampel (blocking)
Blocking yaitu proses penanaman sampel gonad dalam
parafin yang bertujuan untuk memudahkan dalam proses
pemotongan (sectioning). Parafin padat dimasukkan kedalam
parafin dispanser bersuhu ± 60°C agar mencair, kemudian
sampel gonad yang telah melewati tahap dehidrasi lalu
diangkat dan diletakkan pada baskom plastik. Base mould diisi
dengan parafin cair hingga setengah wadah menggunakan
parafin dispanser lalu gonad dikeluarkan dari tissue casette dan
diletakkan pada base mould berisi parafin cair dengan posisi
sejajar dan ditengah, lalu ditutup menggunakan tissue casette
yang terdapat kode gonad ikan tersebut kemudian dialiri parafin
cair lagi hingga penuh dan menutup semua area. Base mould
diangkat dan diletakkan diatas cold plate agar parafin cepat
dingin dan mengeras. Dalam tahap blocking ini, pemindahan
sampel dari tissue cassette ke cairan parafin dalam base mould
a b
38
harus dilakukan dengan cepat agar gonad tidak kering dan
menempel pada tissue cassette sehingga susah untuk
pengambilannya. Proses blocking dapat dilihat pada gambar
3.13.
Gambar 3.13. Penanaman sampel/blocking (penuangan parafin
pada base mould).
5. Pemotongan (sectioning)
Sectioning atau pemotongan sampel dilakukan untuk
mendapatkan potongan jaringan gonad yang sangat tipis
menggunakan alat pemotongan yang bernama microtome dan
pisau pemotong (microtome blade) dengan ketebalan 5 µm.
Setelah parafin mengeras, balok parafin dikeluarkan dari base
mouldmenggunakan pisau secara hati-hati agar parafin tidak
pecah. Blok paraffin tersebut selanjutnya dibersihkan bagian
pinggir tissue cassette dari parafin yang berceceran dan juga
dilakukan pemotongan parafin yang tidak terdapat gonad
didalamnya menggunakan pisau, agar proses sectioning dapat
berjalan dengan lancar pada saat pemotongan menggunakan
39
microtome tidak mengenai pinggiran tissue cassette sehingga
pita parafin yang dihasilkan bagus dan tepat pada sasaran
yaitu jaringan gonad.
Gambar 3.14. Pemotongan Blok Parafin.
Blok parafin yang telah rapi kemudian dipasang pada
microtome dan jaraknya diatur sedemikian rupa sehingga jarak
antara balok parafin dan microtome blade tidak terlalu dekat
atau jauh, jika jaraknya terlalu dekat maka dikhawatirkan
sampel gonad dalam parafin akan terpotong habis. Dalam
pengaturan microtome ini hal yang perlu diperhatikan yaitu
penguncian engkol pemutar sampel, karena apabila engkol
pemutar sampel tidak dikunci pada saat pengaturan maka
ditakutkan jari kita akan terkena microtome blade, sehingga
perlu sangat berhati-hati dalam pengoperasiannya. Apabila
jarak antara balok parafin dan microtome blade telah sesuai
dan ketebalan sampel yang diinginkan telah sesuai maka
selanjutnya kunci dibuka dan pemutar sampel diputar searah
jarum jam hingga parafin terpotong membentuk pita parafin.
40
Gambar 3.15. proses pemotongan (sectioning).
Pita parafin yang berisi sampel gonad kemudian diambil
menggunakan pinset dikedua ujung lalu dimasukkan kedalam
water bath berisi air bersuhu 45-50°C sambil sedikit ditarik agar
parafin merenggang sempurna dan tidak kusut atau bertumpuk.
Setelah pita parafin merenggang sempurna, pita parafin
tersebut diambil menggunakan object glass secara berhati-hati
agar pita parafin menempel pada object glass. Object glass
berisi pita parafin dan sampel gonad kemudian diletakkan pada
hot plate selama ±2 jam dengan suhu 50°C agar object glass
mengering dan pita parafin menempel sempurna pada object
glass. Proses pemotongan dapat dilihat pada gambar 3.16.
Gambar 3.16. (a) peletakan pita parafin dalam water bath. (b)
proses pengeringan preparat pada hot plate.
a b
41
6. Pewarnaan (staining)
Preparat yang telah kering selanjutnya dilakukan
perwarnaan. Pewarnaan berfungsi untuk memberikan warna pada
jaringan agar dapat mempermudah proses identifikasi
menggunakan mikroskop. Prinsip pewarnaanya itu memasukkan
zat warna pada jaringan. Zat warna yang dipakai yaitu hematoxilin
dan eosin. Hematoxilin berfungsi untuk mewarnai inti sel, karena
inti sel bersifat asam dan hematoxilin bersifat basa, sedangkan
eosin berfungsi untuk mewarnai sitoplasma karena sitoplasma
bersifat basa dan eosin bersifat asam. Urutan dalam proses
staining dapat dilihat pada gambar 3.17.
Gambar 3.17.Tahapan Pewarnaan Preparat Gonad
Sebelum dimasukkan kedalam larutan pewarna, object glass
yang berisi potongan sampel yang sudah kering ditata pada
staining rack, kemudian staining rack dimasukkan kedalam larutan
Xylene Alkohol Absolut Alkohol 90%
Aquadest Hematoxylin Aliran Air
Eosin Aliran Air Alkohol 90%
Alkohol Absolut Xylene
42
pewarna secara berurutan dan sesuai dengan waktu yang
ditetapkan.
Pertama dimasukkan kedalam larutan xylene, hal ini
berfungsi untuk melunturkan paraffin yang terdapat dalam jaringan,
lalu dimasukkan kedalam alkohol absolute dan alkohol 90% hal
tersebut berfungsi untuk redehidrasi yaitu memasukkan cairan
kembali dalam jaringan, selanjutnya dimasukkan kedalam aquades
untuk menetralkan jaringan, lalu masuk kedalam pewarnaan yaitu
hematoxylin, kemudian diambil dan dialiri air agar zat warna yang
terdapat pada jaringan tidak terlalu pekat, lalu dimasukkan kembali
kedalam zat warna eosin untuk mewarnai sitoplasma, dan
dimasukkan kedalam aliran air kembali.
Setelah masuk ke zat warna, cairan di dalam jaringan harus
dikurangi agar preparat tidak mudah busuk dan berubah warna
dengan cara memasukkan kedalam larutan pencuci yaitu alkohol
90%, alkohol absolute dan terakhir larutan xylene agar jaringan
menjadi kering dan dapat di identifikasi menggunakan mikroskop.
Setelah proses staining selesai, maka preparat di letakkan diatas
hot plate agar cepat kering sebelum proses covering.
43
Gambar 3.18. (a) Proses staining. (b) perendaman preparat
kedalam larutan hematoxylin.
7. Penutupan (Covering)
Covering yaitu proses penutupan object glass. Dalam
proses penutupan ini, menggunakan lem entelan sebanyak ±3
tetes agar object glass dan cover glass dapat melekat
sempurna. Proses covering harus dilakukan secara berhati-
hati agar tidak terdapat gelembung udara diantara object
glass dan cover glass, hal tersebut sangat penting karena
apabila terdapat gelembung udara maka objek tidak dapat
diamati menggunakan mikroskop. Setelah cover glass
dipasang, maka selanjutnya informasi sampel yang diukur
pada object glass ditutup menggunakan kertas label. Langkah
covering dapat dilihat pada gambar3.19.
a b
44
Gambar 3.19.(a) Covering (pemberian lem entelan).
(b) penutupan dengan cover glass.
E. Klasifikasi Tingkat Kematangan Gonad (TKG)
Dari analisis didapatkan hasil bahwa untuk ikan layang
berjenis kelamin betina dalam 1 preparat terdapat beberapa
tingkatan perkembangan oosit. Pengamatan tingkat kematangan
gonad ikan layang dapat dilihat pada gambar 3.20.
Gambar 3.20. Hasil pengamatan TKG secara histologi menggunakan
mikroskop compound dengan perbesaran 10x.
Dari 90 ekor ikan, diperoleh 55 preparat gonad betina. Hasil
penelitian secara histologi menunjukkan fase oosit didominasi oleh
fase hydrated stage. Beberapa fase yang ditentukan mengacu kepada
Unyolked Migratory nucleus
Hydrated stage
Early yolk
Advance Yolk
a b
45
kriteria Farley dan Davis (1999). Hasil tingkat perkembangan oosit
dalam gonad ikan layang yang diamati yaitu :
1. Unyolked stage: Sel berukuran kecil, berbentuk bulat atau oval
dan begitu pun dengan inti selnya, inti sel masih terlihat bulat,
dalam pengamatan terlihat bahwa sel berwarna ungu pekat.
Seperti pada gambar 3.21.
Gambar 3.21. Unyolked Stage (belum berkembang).
2. Early yolked stage : Didapatkan hasil bahwa sel berukuran
lebih besar disbanding fase unyolked stage, dan masih
terdapat inti sel yang jelas, inti sel dan sel masih berbentuk
bulat atau oval, terdapat butiran-butiran yolk (kuning telur)
disekitar sel tetapi belum terlalu nampak. Fase Early yolked
stage dapat dilihat pada gambar 3.22.
Unyolked Stage
46
Gambar 3.22. Early yolked stage (berkembang).
3. Advanced yolked stage : Didapatkan hasil bahwa sel semakin
membesar. Inti sel juga terlihat besar ditengah, sel mulai
terlihat banyak butiran kuning telur pada sel dan oil droplet
(gelembung lemak) juga mulai nampak.
Gambar 3.23. Advanced yolked stage (permulaan matang).
Advanced yolked
Early Yolked
47
4. Migratory nucleus: didapatkan hasil bahwa sel berukuran
besar, Inti sel sudah berada dipinggir dan bahkan tidak terlihat
adanya inti sel, sel telur dipenuhi dengan bulatan-bulatan
kuning telur dan oil droplet semakin banyak. Fase Migratory
nucleus dapat dilihat pada gambar 3.22.
Gambar 3.24. Migratory nucleus (hampir matang).
5. Hydrated stage : didapatkan hasil bahwa bentuk sel telur tidak
beraturan, sel mulai kosong tanpa adanya butiran kuning telur,
ukuran sel telur sangat besar dan nampak jelas.
Gambar 3.25. Hydrated stage (matang/hidrasi)
Migratory nucleus
Hydrated
48
Hasil pengamatan klasifikasi perkembangan gonad
berdasarkan analisis preparat ditemukan bahwa keberadaan folikel
postovulasi (POF) mendominasi ditemukan pada sampel gonad ikan
layang. POF merupakan ciri-ciri khusus ikan memijah. Hal Ini
menunjukkan bahwa ikan termasuk dalam kelas dewasa (Mature).
Gambar 3.26. Folikel Postovulasi (POF).
F. Diameter Telur
Pengukuran diameter telur dilakukan di bawah mikroskop
yang dilengkapi mikrometer okuler yang telah ditera sebelumnya
dengan mikrometer obyektif. Pengukuran dilakukan pada
pembesaran 10 kali.
Proses perhitungan diameter telur dapat dilihat pada gambar
3.27.
POF
49
Gambar 3.27. Pengukuran diameter telur.
Hasil perhitungan diameter telur ikan layang adalah sebagai
berikut :
Tabel 3.1. Diameter Telur
No Tingkat perkembangan oosit Diameter oosit
1. Unyolked stage 64,50 μm –140,66 μm
2. Early yolked stage 112,26 μm –260,44 μm
3. Advanced yolked stage 205,87μm –307,71 μm
4. Migratory nucleus stage 225,10 μm –611,05 μm
5. Hydrated stage 385,28 μm –662,42 μm
Rata-rata ukuran diameter telur ikan layang pada setiap
perkembangan oosit yaitu Unyolked stage 93,42 μm, Early yolked
stage 191,96 μm, Advanced yolked stage 277,96 μm, Migratory
nucleus stage 1593,167 μm dan Hydrated stage 498,26 μm.
G. Fekunditas
Perhitungan fekunditas sangatlah penting untuk memprediksi
berapa banyak jumlah larva atau benih yang akan dihasilkan oleh
individu ikan. Di laboratorium histologi LRPT kegiatan fekunditas
menggunakan metode gravimetrik yaitu perhitungan fekunditas
50
berdasarkan perbandingan berat gonad total dibanding berat gonad
yang diamati. Langkah-langkah dalam perhitungan fekunditas dapat
dilihat pada gambar 3.28:
Gambar 3.28. Alur perhitungan fekunditas.
Gonad ikan utuh diambil kemudian ditimbang berat totalnya
(Wg) menggunakan timbangan digital dan gonad tersebut diambil
berat Sub-sampel sekitar 0,5g-1,0g (Ws) dengan mengikuti
Letakkan gonad di cawan pentri
Cacah Telur dan pisahkan dari kotoran
Ambil telur menggunakan pipet tetes
Pindahkan telur ke cawan Bogorov
Nyalakan Mikroskop stereo dan komputer
Sampel diamati dibawah Mikroskop stereo
Hitung jumlah gonad menggunakan handtally counter
Hasil
Penimbangan gonad ikan layang
51
penelitian sebelumnya oleh Farley dan Davis (1999). Gonad sampel
yang telah ditimbang diletakkan dalam cawan petri dan ditambahkan
aquadest kemudian dipisahkan dari selaputnya menggunakan
spatula dan jarum ose. Pemisahan telur dan selaputnya harus
dilakukan secara berhati-hati agar telur tidak pecah sehingga tidak
mengganggu proses perhitungan. Setelah telur terpisah dari
selaputnya, telur dipindahkan ke cawan bogorov menggunakan pipet
tetes kemudian dihitung dibawah mikroskop. Perhitungan telur
dilakukan dengan menggunakan mikroskop stereo dengan
perangkat PC. Perhitungan jumlah telur menggunakan mikroskop
stereo dilakukan dengan cara mengintip object pada lensa okuler
mikroskop dan menghitung jumlahnya menggunakan handtally
counter. Sedangkan apabila menggunakan mikroskop okuler yang
disambungkan ke PC, perhitungan dapat dilakukan dengan cara
melihat pada layar monitor PC dan menghitung jumlahnya
menggunakan handtally counter. Kelebihan menggunakan
mikroskop stereo yaitu analis tidak perlu lelah untuk mengintip
mikroskop selain itu juga analis dapat melihat telur dengan jelas
serta dapat mengetahui tingkat kematangan telurnya. Kegiatan
perhitungan fekunditas dapat dilihat pada gambar 3.29 :
52
Gambar 3.29. penampakan telur menggunakan
mikroskop stereo.
Jumlah fekunditas ikan layang berkisar antara 662,2 -
47.129,8 dengan rata-rata 12.264.3 butir pada kisaran panjang total
17,7-22,9 cm dengan bobot gonad seberat 1,02 -7,70 gram.
H. Hubungan Panjang bobot
Hubungan panjang-bobot dapat menunjukkan pola
pertumbuhan ikan layang. Jumlah ikan layang yang diukur selama
praktek sebanyak 90 ekor, terdiri dari jenis kelamin jantan 35 ekor
dan betina 55 ekor. Model hubungan panjang-bobot ikan betina
disajikan pada gambar berikut:
Gambar 3.30. Hubungan panjang total & bobot ikan layang.
W= 0.017L2.784
R² = 0.588
n =90
0
20
40
60
80
100
120
0 5 10 15 20 25
Bo
bo
t ik
an
(g
ram
)
panjang ikan (cm)
Hubungan panjang total (TL) dan Bobot
Ikan
53
Gambar 3.31. Hubungan panjang cagak & bobot ikan layang.
Hasil analisis hubungan panjang bobot yang berjumlah 90
ekor terlihat bahwa hubungan panjang total-bobot ikan adalah W =
0,017 L�.��� dengan nilai b sebesar 2,784. Sedangkan hasil analisis
hubungan panjang cagak-bobot ikan adalah W =0,022 L�.��� dengan
nilai b sebesar 2,773.
Nilai koefisien regresi (b) menunjukkan adanya keeratan
hubungan antara panjang dan berat tubuh ikan. Hubungan panjang
berat ikan Layang dapat diketahui bahwa pola pertumbuhan
bersifat isometrik dengan nilai brata-rata sebesar 2,78.
W = 0.022L2.773
R² = 0.764
n= 90
0
20
40
60
80
100
120
0 5 10 15 20 25
bo
bo
t ik
an
(g
ram
)
panjang ikan (cm)
Hubungan panjang cagak (FL) dan bobot
ikan
54
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Kesimpulan yang dapat diambil dari hasil praktek kerja lapang
adalah sebagai berikut :
a. Kegiatan di laboratorium histologi LRPT menitikberatkan pada
perkembangan gonad ikan dengan pengamatan tingkat/stadium
kematangan secara mikroskopik melalui jaringan gonadnya,
perhitungan fekunditas dan diameter telur. Metode dipilih
sesuai dengan keahlian staf laboratorium serta ketersedian
peralatan yang ada untuk fokus pada penelitian.
b. Pola pertumbuhan ikan layang di perairan selat Bali bersifat
isometrik, karena kisaran nilai b <3 yaitu rata-rata sebesar 2,784
pada hubungan panjang total, dan 2,773 pada hubungan
panjang cagak.
c. Rata-rata ukuran diameter telur ikan layang pada setiap
perkembangan oosit yaitu Unyolked stage sebesar 93,42 μm,
Early yolked stage 191,96 μm, Advanced yolked stage 277,96
μm, Migratory nucleus stage 1593,167 μm dan Hydrated stage
498.26 μm.
d. Jumlah fekunditas ikan layang berkisar antara 662,2 - 47.129,8
dengan rata-rata 12.264,3 butir.
55
B. Saran
Adapun saran yang dapat disampaikan oleh penulis antara lain :
a. Perlu adanya penambahan waktu PKL agar dapat lebih
mengetahui tentang proses kegiatan-kegiatan yang dilakukan
oleh Loka Riset Perikanan Tuna. Maksimal waktu yang
dibutuhkan yaitu 2 bulan.
b. Pengambilan sampel perlu memperhatikan kisaran ukuran ikan
terkecil hingga terbesar, sehingga dapat diketahui
perkembangan ikan yang belum dewasa (immature) dan ikan
dewasa (mature).
56
DAFTAR PUSTAKA
Anonimous. 2011. Biologi ikan layang.http://perikananhangtuah.blog
spot.com/ 2011/04/biologiikan-layang.html.diakses 20 Januari
2014
Bagenal. T. 1978. Methods for Assessment of Fish Production in
Fresh Waters.Blackwell Scientific Publication Ltd. Oxford. 165-
178
Dahlan, Muh.Arifin. 2012. Keragaman Populasi Dan Biologi
Reproduksi Ikan Layang (Decapterus Macrosoma BLEEKER
1841) Di Selat Makassar, Laut Flores Dan Teluk Bone.
Effendie, M. l.1979.Metoda biologi peikanan.Yayasan Dewi Sri.
Bogor. 112 hal.
Nontji , A , 2005. Laut Nusantara Penerbit Djambatan, Jakarta.
Nielson,J.S. 1983. Fishes of the world.John Wiley and
Sons.NewYork. 600p.
Ongkers, O.T.S., Pattikawa, J.A., Rijoly, F., 2016. Aspek Biologi Ikan
Layang (decapterus ruselli) di perairan Latuhalat, Kecamatan
Nusaniwe, Pulau Ambon. Omni-Akuatika 12.
PPN Pekalongan 2005. Statistik Produksi Pelabuhan Perikanan
Nusantara Pekalongan, 2004 Pelabuhan Perikanan Nusantara
Pekalongan.
Pauly,D.,1984. Some Simple Methods for the Assessment of Tropical
Fish Stock, FAO Rome.
57
Saanin H.1984. Taksonomi dan Kunci Determinasi Ikan I dan II
Penerbit Pusaka Bandung.
Sukimin, S.,lsdrajat S.,& Yon Vitner. 2002. Penelitian. Penerbit CV.
Alfabeta. Bandung. Petunjuk praktikum biologi
perikanan.Fakultas 158 hal. Perikanan dan llmu Kelautan.
Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Yanuarto, Wanda Nugroho. 2015. Deskripsi Partisipasi Aktif, Dan
Kemampuan Komunikasi Matematis Mahasiswa Pada Mata
Kuliah Geometri Analitik Bidang Melalui Penerapan Lesson
Study. Purwokerto : Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
58
Lampiran 1. Surat permohonan izin PKL
59
Lampiran 2 . Surat Persetujuan PKL
60
Lampiran 3. Surat Pengantar PKL
61
Lampiran 4. Jurnal Harian PKL
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
Lampiran 5. Halaman Pengesahan Draf Laporan
104
Lampiran 6. Dokumentasi Kegiatan PKL
Seminar Awal PKL
Monitoring di pelabuhan Benoa Kegiatan sampling hasil tangkapan
Pengukuran panjang ikan pengambilan sampel ikan di pasar kedonganan
105
Pengukuran Panjang Ikan Pengambilan Gonad
Penimbangan Berat Ikan Proses Fiksasi
Mencatat Hasil Pengukuran Dan Penimbangan Berat Ikan
106
Membaca buku di perpustakaan Mencuci Botol Sample
Penulisan Kode Ikan Pada Tissue Casatte
Pemotongan Sampel
Memasukkan Tissue Casatte Ke Keranjang ATP
Mempersiapkan Larutan
107
Memasukkan Keranjang ke mesin ATP
Memasukkan Parafin Padat Ke Parafin Dispenser
Penanaman Sampel Pemotongan Blok Sampel
Sectioning Fekunditas
108
Pemisahan Telur Dengan Selaputnya
Menghitung Fekunditas Menghitung Diameter Telur
Memindahkan telur ke cawan bogorov
109
Post Test Foto Bersama Pembimbing PKL (Ibu Hety Hartaty , S.Pi )
Senam Bersama Karyawan LRPT Mencari Literatur Di Perpustakaan LRPT
Seminar Akhir PKL Foto Bersama Analis Histologi
110
Lampiran 7. Peralatan yang digunakan
Dissecting set Botol Sampel Timbangan Analitik
Rak Preparat Base Mould Staining Jar
Lemari Asam Microtome Water Bath
Hot plate Parafin Dispanser Cold Plate
111
Jas Lab Sendal Kodok Baskom plastik
Mesin ATP Mikroskop Stereo Zeiss Mikroskop Trinokular
Pipet Tetes Spatula Jarum Ose
Bogorov Botol Semprot Cawan Pentri
112
Handtally Counter Pisau Microtome Digital Timer
Lemari Sampel Kotak Preparat Timbangan Digital
Kalkulator Alat Tulis Penggaris
Kuas Pisau Diamond Pen
113
Lampiran 8. Bahan yang digunakan
Sampel Gonad Masker Glove
Alkohol 70% Alkohol 90% Alkohol Absolut
Hematoxilin Eosin Aquadest
Formalin 10% Xylene Parafin
114
Kertas Kalkir Tissue Tissue Casette
115
Lampiran 9. Perhitungan Diameter Telur
Pengukuran Diameter Telur Pada Fase Unyolked Stage
Pengukuran Diameter Telur Pada Fase Early Yolked Stage
Pengukuran Diameter Telur Pada Fase Advanced Yolked Stage
116
Pengukuran Diameter Telur Pada Fase Migratory Nucleus Stage
Pengukuran Diameter Telur Pada Fase Hydrated Stage
117
Lampiran 10. Surat Keterangan / Sertifikat
118