LAPORAN TETAP MUMTIKA EMPAT.doc

8/18/2019 LAPORAN TETAP MUMTIKA EMPAT.doc

http://slidepdf.com/reader/full/laporan-tetap-mumtika-empatdoc 1/9

LAPORAN TETAP

PRAKTIKUM BIOKIMIA II

JUDUL PRAKTIKUM : ISOLASI BROMELIN DARI NANAS

KELOMPOK : II (DUA)

NAMA : MUMTIKANAH

NIM : 06101381320029

DOSEN PEMBIMBING : Drs MADE SUKAR!A"AN# MS$

DESI# SP%# MT

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA

JURUSAN PENDIDIKAN MIPA

&AKULTAS ILMU KEGURUAN DAN KEPENDIDIKAN

UNI'ERSITAS SRI"IJA!A

2016



LAPORAN TETAP

PRAKTIKUM BIOKIMIA II

I Pr*+,,- K : I (S,./)

II T,-, Pr*+,,- : 20 J,-/,r$ 2016

III J/%/ Pr*+,,- : Is*,s$ Br*$- %,r$ N,-,s

I' T//,- Pr*+,,- : U-./4 -$s*,s$ -5$ +r*$-

%,r$ -,-,s

' D,s,r T*r$

Buah nanas yang muda maupun yang tua mengandung bromelin. Keaktifan

bromelin pada kasein dari buah yang muda lebih tinggi bila dibanding buah yang tua.

Bromelin aktif pada substrat yang sama seperti substrat yang diperlukan tripsin

(Winarno, 1986).Kandungan bromelin pada aringan yang umurnya belum tua terutama

yang bergetah sangat sedikit sekali bahkan kadang!kadang tidak ada sama sekali.

"edangkan bagian tengah batang mengandung bromelin lebih banyak dibandingkan

dengan bagian tepinya. Buahnanas yang masih hiau atau belum matang ternyata

mengandung bromelin lebih sedikit dibanding buah nanas segar yang sudah matang.

#enelitian yang lain menunukkan buah yang matang karena diperam memiliki

kandungan yang lebih sedikit dibandingkan buah yang masih hiau. ($uniarti, %&&6).

Kandungan en'im bromelin ini pun berbeda!beda pada tiap bagian buah nanas. al ini

dapat dilihat pada abel 1.

abel 1. Kandungan *n'im Bromelin padaiap Bagian Buah +anas

N B,$,-B/, K,-%/-,-Br*$- (7)

1 Buahtuh$asak &,&6&!&,&8&

% -agingBuah$asak &,&8&!&,1%

/ KulitBuah &,&&!&,&0 angkaiBuah &.&&!&,&6&

Buahtuh$atang &,&&!&,&6&

6 -agingBuah$entah &,&&!&,&0&

"umber 2 3nonim, %&&9

+anas membantu pen4ernaan protein dan memper4epat proses penyembuhan.

Buah nanas kaya akan en'im bromelin yang berguna untuk melegakan tenggorokan dan

membantu pen4ernaan. *n'im bromelin men4erna protein di dalam makanan dan

menyiapkannya agar mudah untuk diserap oleh tubuh. +anas uga dapat digunakan

untuk mengempukkan daging. (3nonim, %&1&). Bromelin dapat diisolasi dari sari atau

batang nanas dan banyak digunakan dalam proses chilled proofing bir seperti halnya



en'im papain. #ada umumnya bir yang tidak mengalami chilled proofing akan menadi

keruh bila didinginkan. Kekeruhan yang teradi disebabkan oleh protein yang terdapat

dalam bir. -engan menggunakan papain atau bromelin, protein tersebut dapat habis

terhidrolisis menadi bagian!bagian yang larut, sehingga dalam 4ontoh yakni bir bila

didinginkan tidak lagi menadi keruh. "eperti papain dan fisin, bromelin tergolong

kelompok en'im protease sulfhidril. Bedanya dengan papain dan fisin, en'im ini

merupakan glukoprotein sedangkan molekul papain dan fisin merupakan protein.

(Winarno, 1986).

*n'im bromelin yang termasuk dalam kelompok hidrolase di mana bekera

sebagai katalis pada reaksi hidrolisis. 5leh karena bekera sebagai reaksi peme4ahan

molekul protein maka en'im ini disebut en'im proteolitik atau protease. ("upriyanti dan

#oediadi, %&&9). #rotease merupakan en'im proteolitik yang sangat penting dalam

banyak prosedur pemrosesan makanan industri. eaksi yang dikatalisis oleh en'im

proteolitik ialah hidrolisis ikatan pepetida protein. #ersyaratan kekhasan untuk hidrolisis

ikatan peptida oleh en'im proteolitik. -isini termasuk sifat gugus 1 dan %, konfigurasi

asam amino, ukuran molekul substrat dan sifat gugus 7 dan . aktor utama yang

membedakan en'im proteolitik ialah efek 1 dan %. *n'im :!kimotripsin

menghidrolisis ikatan peptida dengan mudah hanya ika 1 merupakan dari tirosil,

fenilalanin atau triptofanil. *n'im proteolitik dapat dipilah ke dalam golongan yaitu

protease asam, rotease serina, protease sulfihidril dan protease yang mengandung logam

(de$an, 1990).

;ambar "truktur en'im protease sulfihidril

l

" < =% < = < =55

!

=ysteine l

>+/

"umber 2 "fakhri, %&1&

;ambar Kinera *n'im #rotease "istein?"ulfihidril



#rotein sistein merupakan protease yang memiliki residu sistein pada sisi

aktifnya dan bekera maksimum pada p netral. "ehingga keberadaan asam atau basa

yang berlebih dapat mengganggu kinera dari en'im ini sendiri. Kinera en'im ini

sendiri dapat dihambat oleh senya@a oksidator, alkalitor dan logam berat. 3dapun efek

samping yang sering ditemukan antara lain mual, diare, muntah, peningkatan detak

antung, kantuk berlebihan, dan menstruasi berlebihan. "eseorang yang alergi terhadap

nanas disarankan tidak mengonsumsi bromelin. Bromelin dapat menimbulkan alergi dan

geala asma seperti sesak napas dan gatal!gatal. eaksi alergi terhadap bromelin uga

dapat mun4ul pada seseorang yang alergi terhadap @ortel, seledri, gandum, papaya dan

serbuk sari. (3nonim, %&11)

'I A,. D,- B,,-

3lat yang digunakan 2

1. #isau

%. Baskom

/. Blender

. Kain saring

. "endok

6. ;elas kimia

0. ;elas ukur

8. #ipet tetes

9. Batang pengaduk



1&. Botol semprot aAuades

11. imbangan?+era4a 3nalitik

Bahan yang digunakan 2

N,, B,,- J/,

+anas %& gram

Bongkol +anas %& gram

34eton $l

3Auades 1&& ml

'II Pr*s%/r Pr*+,,-

1. $enyiapkan dan membersihkan buah nanas.

%. $emisahkan daging buah nanas dari bonggol bagian tengahnya.

/. $emotong daging buah nanas menadi ke4il!ke4il lalu ditimbang %& gram.

. $emblender buah nanas sampai halus dengan menambahkan 1&& m aAuadest.

. "etelah nanas diblender, kemudian disaring dengan menggunakan kain saring,

dan mengambil filtratnya ke dalam gelas kimia.

6. $endiamkan filtrat di dalam gelas kimia selama 1 menit agar sisa serat?ampas

nanas mengendap.

0. $enambahkan aseton dingin sedikit demi sedikit pada filtrat sambil diaduk

sehingga kadar aseton /&C D?D.

8. $engambil filtrat yang telah ditambahkan aseton ke dalam % labu untuk

disentrifuge, masing!masing sebanyak 1/ m.

9. arutan disentrifuge selama 1 menit dengan ke4epatan && rpm untuk

memisahkan endapan dari filtrat.

1&. $engumpulkan endapan dan menimbang endapan (fraksi E), sedangkan

filtratnya ditampung.

11. langi langkah yang sama pada langkah /!1& untuk per4obaan bonggol bagian

tengah nanas.

'III H,s$ P-,,.,-

N* PERLAKUAN HASIL PENGAMATAN

D,$- B/, N,-,s

1 +anas dibersihkan,

-aging buah nanas dipotong ke4il < ke4il

imbang sebanyak %& gram

-iketahui berat nanas diperoleh

1. %& gram



2 -itambah air 1&& ml

-ihaluskan dengan blender

Kuning 4erah

"etelah di blender @arna kuning muda

3 -isaring untuk mendapatkan filtrat

$enyimpan filtrat selama 1 menit

-iperoleh Dolume %0/ ml

-itambahkan a4eton dingin Fa4eton G 8% ml

@arna menadi kuning muda

@arna menadi kuning 4erah

$enimbang endapan yang terbentuk gram

B*-* B,$,- T-, N,-,s

1 +anas dibersihkan,

Bonggol bangian tengah nanas

dipotong ke4il <ke4il,

imbang sebanyak %& gram

-iketahui berat nanas diperoleh

& gram

2 -itambah air 1&& ml

-ihaluskan dengan blender

Kuning 4erah

"etelah di blender @arna kuning muda

3 -isaring untuk mendapatkan filtrat

$enyimpan filtrat selama 1 menit

-iperoleh Dolume / ml

-itambahkan a4eton dingin !

$enimbang endapan yang terbentuk !

I Prs,,,- R,4s$

A-,$s, D,.,

• Esolasi *n'im Bromelin dari -aging Buah +anas

-iketahui2 ! Berat =a@an #etri > kertas aluminium foil G /6,/ gram

! iltrat G %0/ m

! Berat endapan > (4a@an petri > kertas aluminium foil) G .... gram



-i4ari 2 a.Folume aseton yang diperlukan (F aseton) G . . . . H

b. Berat endapan G . . . . .H

Ia@ab 2

a. F aseton G /&?1&& J F filtrat G /&?1&& J %0/ m G 81,9 ml G 8% m

b. $assa (endapan > 4a@an petri > kertas aluminium foil) G gram

massa endapan (e 1)

massa e 1G massa(endapan > gelas) < massa gelas kosong

G ... gram < ... gram

G ... gram.

I P+,,s,-

#ada per4obaan ini mengenai isolasi bromelin dari nanas bertuuan untuk

mengisolasi en'im bromelin dari buah nanas. "alah satu teknik isolasi en'im bromelin

adalah dengan menggunakan aseton. #roses yang dilakukan dalam per4obaan ini adalah

pertama yang dilakukan adalah menghaluskan nanas sampai lembut dengan blender.

"edsangkan yang diambil dari nanas ini adalah daging buah dan batang nanasnya.

Karena pada bagian!bagian ini banyak terdapat en'im bromelain. #ada proses ini harus

di gunakan seminimal mungkin air, karena akan mempengaruhi umlah en'im yang

diperoleh, dan harus digunakan air dingin sebab suhu tinggi dapat merusak en'im.Kemudian setelah dihaluskan dilakukan penyaringan dengan menggunakan

serbet. #enyaringan dimaksud untuk memisahkan ampas dan filtrat. iltrat ini yang

digunakan untuk proses isolasi en'im. iltrat dari penyaringan tidak dapat langsung

digunakan namun arus didiamkan selama 1 menit. Kemudian menghitung banyaknya

aseton yang diperlukan untuk mendapatkan en'im bromelin dari filtrat nanas. +amun

pada per4obaan ini hanya dilakukan pembuatan sari dari bonggol nanas. "etelah

ditambahkan dengan aseton, filtrat yang di diamkan kemudian ditambahkan dengan

aseton hasil perhitungan. Kemudian 4ampuran didiamkan dalam keadaan tertutup

dengan alumunium foil agar tidak terkontaminasi 'at!'at lain dalam proses pengendapan

en'im bromelin. "etelah terdapat endapan yang kemudian dipisahkan dari larutannya.

"etelah ditimbang diperoleh *ndapan yang terbentuk ber@arna kuning. *ndapan inilah

yang disebut en'im bromelin. 3ktiDitas en'im bromelin dipengaruhi oleh beberapa

inhibitornya seperti -E# (diisopropilfosfoflouridat). 5leh karena itu bromelin adalah

suatu protease sulfihidril (!") yang sudah menadi tidak aktif disebabkan karena

terbentuknya ikatan disulfida antara en'im!en'im.



II Ks$;/,-

1. *n'im bromelin banyak terdapat pada buah nanas baik pada daging maupun

bonggol buah nanas.

%. "alah satu teknik isolasi en'im bromeain adalah dengan menggunakan aseton.

/. #ada buah nanas ter dapat en'im bromelin yang ditunukan oleh adanya endapan

ber@arna kuning

.

D,<.,r P/s.,4,3rfian,%&1&. Daging Nanas. (5nline)

http2??@@@.s4ribd.4om?do4?9/90&?daging nanas -iakses pada tanggal %/

Ianuari %&16.

"fahkri,%&1&. Klasifikasi Protease. (5nline)

[email protected]?%&11?1%? protease!reD.do4 -iakses pada tanggal

%/ Ianuari %&16.

"upriyanti dan #oediadi, %&&9. Dasar – Dasar Biokimia. E < #ress. Iakarta

LAMPIRAN

G,+,r H,s$ Is*,s$ Br*$- ;,%, D,$- B/, N,-,s

http://www.scribd.com/doc/54939750/dagingnanas

http://sfakhri.files.wordpress.com/2011/12/protease-rev.doc




http://www.scribd.com/doc/54939750/dagingnanas


LAPORAN TETAP MUMTIKA EMPAT.doc

Documents

Transcript of LAPORAN TETAP MUMTIKA EMPAT.doc