OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf ·...

19
OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ANALISIS METFORMIN HCl DENGAN METODE KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT) SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S. Farm) Disusun oleh : ANISA MIRRAH HAFIZHAT 1308010127 PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO PURWOKERTO 2017

Transcript of OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf ·...

Page 1: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK

ANALISIS METFORMIN HCl DENGAN METODE KROMATOGRAFI

CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat

untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S. Farm)

Disusun oleh :

ANISA MIRRAH HAFIZHAT

1308010127

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

PURWOKERTO

2017

Page 2: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

i

OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK

ANALISIS METFORMIN HCl DENGAN METODE KROMATOGRAFI

CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat

untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S. Farm)

Disusun oleh :

ANISA MIRRAH HAFIZHAT

1308010127

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

PURWOKERTO

2017

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 3: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

ii

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 4: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

iii

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 5: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

iv

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 6: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

v

PERSEMBAHAN

Atas anugerah terindah dari Allah SWT yang tidak ternilai hingga terciptalah

sebuah karya sederhana yang ingin penulis persembahkan kepada :

Kedua orangtua ku, Ibu Iin dan Ayah Tirtayana, yang telah memberikan dukungan, kasih sayang, semangat serta do’a yang selalu dipanjatkan

untukku

Adikku Mughni Nurul Huda dan Fitry Rahmawaty yang telah memberikan semangat dan keceriaan canda tawa serta do’a yang selalu dipanjatkan

untukku

Partner Seperjuangan KCKT Agnes P yang telah memberikan bantuan, dukungan, semangat, bimbingan serta arahan dari mulai awal penelitian

hingga selesai, semoga kita sukses selalu

Tim Praktikum Terheboh (Dian, Nindya, Zitta, Lupi, Amel, Ridwan) yang telah memberikan semangat, dukungan dan keceriaan canda tawa, semoga kita

sukses selalu

Daffa SQUAD (Rianty, Witar, Neno, Ani, Yanah, Atika, Aisyah, Ummah) yang telah membantu, memberikan semangat, dukungan, do’a serta keceriaan

canda tawa, semoga kita sukses selalu

Teman-teman Farmasi 2013 Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah memberikan banyak arti, kenangan, keceriaan canda tawa dan

pelajaran selama menimba ilmu, semoga kita semua sukses selalu

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 7: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

vi

MOTTO

“Barangsiapa bertawakal kepada Allah, niscaya Allah akan memberikan

mencukupkan (keperluan)nya, sesungguhnya Allah melaksanakan urusan (yang dikehendaki)-Nya.”

(QS. Ath-Thalaq: 3).

“Waktu itu bagaikan pedang, jika kamu tidak memanfaatkannya menggunakan untuk memotong, ia akan memotongmu (menggilasmu)”

(H.R. Muslim)

“Jangan mundur karena masalah sepele, karena semua masalah pasti ada jalannya dan Allah selalu bersama di dalam hati kita”

(Anisa)

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 8: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

vii

KATA PENGANTAR

Bismillahirohmanirohim Alhamdulillahirobbil’alamin, segala puji bagi

Allah SWT. Karena dengan petunjuk dan pertolonganNya penulis dapat

menyelesaikan skripsi yang berjudul optimasi fase gerak, laju alir dan suhu kolom

untuk analisis metformin HCl dengan metode kromatografi cair kinerja tinggi

(KCKT) sebagai salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas

Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

Penulis menyadari dalam penyusunan skripsi ini masih banyak

kekurangan, oleh sebab itu kritik dan saran yang membangun penulis harapkan

untuk perbaikan di masa yang akan datang. Penulis mengucapkan banyak terima

kasih atas segala bantuan, bimbingan, serta kerjasama dengan berbagai pihak yang

terkait dalam penyusunan skripsi ini, karena terselesaikannya skripsi ini tidak

terlepas dari bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis mengucapkan

terimakasih kepada:

1) Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H.,M.H., selaku Rektor Universitas

Muhammadiyah Purwokerto

2) Dr. Agus Siswanto, M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi yang telah

memimpin keseluruhan proses mengajar ditempat penulis menuntut ilmu.

Selaku pembimbing satu yang dengan sabar dan perhatian membimbing

penulis serta memberikan koreksi dan masukkan yang sangat berguna

bagi kesempurnaan skripsi ini.

3) Dr. Pri Iswati Utami, M.Si., Apt selaku pembimbing dua yang dengan

sabar dan perhatian membimbing penulis serta memberikan koreksi dan

masukkan yang sangat berguna bagi kesempurnaan skripsi ini.

4) Dr. Asmiyenti Djaliasrin Djalil, M. Si dan Arif Budiman, MPH., Apt

selaku penguji yang telah memberikan saran dan masukan yang sangat

berguna bagi kesempurnaan skripsi ini.

5) Rochmadi Budi S, A.Md selaku laboran Biologi Farmasi yang telah

berbagi ilmu, memberikan motivasi dan arahan dalam menyelesaikan

penelitian ini.

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 9: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

viii

6) Segenap staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah

Purwokerto yang memberikan ilmu dan pengarahan dari awal perkuliahan

sampai selesainya skripsi.

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 10: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

ix

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 11: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

x

RIWAYAT HIDUP

Nama : Anisa Mirrah Hafizhat

Tepat, Tanggal Lahir : Bandung, 31 Agustus 1995

Nama Orang Tua : Tirtayana (Ayah)

Iin (Ibu)

Pendidikan

2001-2006 SD N 3 Banjar

2007-2009 SMP N 1 Banjar

2010-2012 SMA N 1 Banjar

2013-2017 Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Purwokerto

Pengalaman

2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar

2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

2014 Asisten praktikum Kimia Analisis

2015 Asisten praktikum Farmasi Fisika II

2015 Experience and Cultural Exchange at Faculty of Pharmaceutical

Sciences, Khon Kaen University, Thailand

2016 Asisten praktikum Fitokimia

2016 Asisten praktikum Analisis Farmasi

2017 Asisten Biofarmasetika

2017 Asisten Farmakoterapi II

2017 Asisten Analisis Makanan dan Kosmetik

Penghargaan

2015 Penerima Beasiswa PPA DIKTI

2016 Penerima dana hibah PKM-P DIKTI (Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak

Daun Pegagan Terhadap Bakteri Escherichia coli, Staphylococcus

aureus dan Salmonella typhi)

Organisasi

2014-2015 BEM Fakultas Farmasi Kabinet Matahari (Sekretaris)

2015-2016 DEMA Fakultas Farmasi (Sekretaris)

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 12: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i

HALAMAN PERSETUJUAN ....................................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................ iii

HALAMAN PERNYATAAN ...................................................................... iv

PERSEMBAHAN .......................................................................................... v

MOTTO.......................................................................................................... vi

KATA PENGANTAR ................................................................................... vii

RIWAYAT HIDUP ........................................................................................ ix

DAFTAR ISI .................................................................................................. x

DAFTAR TABEL .......................................................................................... xii

DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... xiii

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xiv

ABSTRAK ..................................................................................................... xvi

ABSTRACT ..................................................................................................... xvii

BAB I. PENDAHULUAN ............................................................................ 1

A. Latar Belakang ................................................................................... 1

B. Perumusan Masalah ............................................................................ 2

C. Tujuan Penelitian ................................................................................ 3

D. Manfaat Penelitian .............................................................................. 3

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA ................................................................. 4

A. Penelitian Terdahulu .......................................................................... 4

B. Landasan Teori ................................................................................... 4

1. Metformin HCl ............................................................................. 4

2. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ............................................... 5

a. Teori Dasar Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ..................... 5

b. Kegunaan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ........................ 6

c. Komponen Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ....................... 7

d. Fase Diam pada Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ............... 11

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 13: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

xii

e. Fase Gerak pada Kromatografi Cair Kinerja Tinggi .............. 11

f. Elusi Gradien dan Isokratik .................................................... 11

g. Jenis Pemisahan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi .............. 11

h. Proses Kromatografi Cair Kinerja Tinggi .............................. 12

i. Kelebihan dan Keterbatasan KCKT ....................................... 12

j. Parameter Kromatografi ......................................................... 13

k. Metode Kuantifikasi ............................................................... 16

C. Kerangka Konsep ............................................................................... 18

BAB III. METODE PENELITIAN ............................................................ 19

A. Jenis dan Rancangan Penelitian ......................................................... 19

B. Variabel Penelitian ............................................................................. 19

C. Waktu dan Tempat Penelitian ............................................................ 19

D. Bahan dan Alat ................................................................................... 19

E. Tahap Penelitian ................................................................................. 20

F. Analisis Data ...................................................................................... 23

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN..................................................... 24

A. Kondisi Kromatografi ........................................................................ 24

1. Penentuan Waktu Retensi Analit ................................................. 27

2. Optimasi Fase Gerak .................................................................... 28

a. Optimasi Fase Gerak Dapar fosfat pH 7 dan Asetonitril ....... 29

b. Optimasi Fase Gerak Dapar fosfat pH 4,5 dan Asetonitril .... 30

3. Optimasi Laju Alir ....................................................................... 32

4. Optimasi Suhu Kolom .................................................................. 34

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................... 38

A. Kesimpulan ........................................................................................ 38

B. Saran ................................................................................................... 38

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 39

LAMPIRAN .................................................................................................. 41

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 14: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

xiii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 3.1 Tabel Optimasi Perbandingan Komposisi dan pH Fase Gerak ...... 22

Tabel 3.1 Kondisi Pengukuran KCKT ........................................................... 22

Tabel 4.1 Hasil Konsentrasi Metformin HCl 10, 50 dan 100 μg/ml ............. 28

Tabel 4.2 Hasil Optimasi Perbandingan Komposisi Dapar Fosfat pH 7

dengan asetonitril..................................................................... 29

Tabel 4.3 Hasil Optimasi Fase Gerak pH 4,5, Laju Alir dan Suhu Kolom ... 35

Tabel 4.4 Nilai N dan HETP dari Berbagai Optimasi Laju Alir .................... 35

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 15: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

xiv

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Struktur Metformin HCl ............................................................. 5

Gambar 2.2 Diagram Blok KCKT ................................................................. 7

Gambar 2.3. Cara mengukur tR, σt, Wh/2, Wb ............................................. 14

Gambar 2.4. Menghitung besarnya TF pada kromatogram ........................... 15

Gambar 2.5. Kerangka Konsep ...................................................................... 18

Gambar 4.1. Gugus Kromofor dan Auksokrom Metformin HCl ................... 26

Gambar 4.2. Spektrum Metformin HCl ........................................................ 26

Gambar 4.3. Kromatogram fase gerak ......................................................... 27

Gambar 4.4. Kromatogram metformin HCl konsentrasi 10, 50, dan

100 μg/ml dengan fase gerak dapar fosfat dan asetonitril ........ 27

Gambar 4.5. Kromatogram metformin HCl dengan perbandingan fase

gerak dapar fosfat pH 7 dan asetonitril (80:20); (70:30);

(60:40); dan (50:50) v/v dengan laju alir 1 mL/menit dan

suhu 40 oC. .......................................................................... 29

Gambar 4.6. Kromatogram metformin HCl dengan perbandingan fase

gerak dapar fosfat pH 4,5 dan asetonitril (95:5); (90:10);

dan (85:15) v/v dengan laju alir 1 mL/menit dan suhu

40 oC.................................................................................... 31

Gambar 4.7. Kromatogram metformin HCl dengan perbandingan fase

gerak dapar fosfat pH 4,5 dan asetonitril (85:15) v/v

dengan laju alir 0,5; 1; dan 1,5 mL/menit dan suhu 40oC. ... 33

Gambar 4.8. Kromatogram metformin HCl dengan perbandingan fase

gerak dapar fosfat pH 4,5 dan asetonitril (85:15) v/v

dengan laju alir 0,5 mL/menit dan suhu 25C, 35, 40 oC. ..... 34

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 16: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Kromatogram larutan metformin HCl konsentrasi 10 μg/ml

dengan fase gerak dapar fosfat dan asetonitril. ......................... 42

Lampiran 2. Kromatogram larutan metformin HCl konsentrasi 50 μg/ml

dengan fase gerak dapar fosfat dan asetonitril .......................... 42

Lampiran 3. Kromatogram larutan metformin HCl konsentrasi 100 μg/ml

dengan fase gerak dapar fosfat dan asetonitril .......................... 43

Lampiran 4. Kromatogram metformin HCl perbandingan fase gerak dapar

fosfat pH 7 dan asetonitril (80:20), laju alir 1 mL/menit dan

suhu 40 oC ........................................................................... 43

Lampiran 5. Kromatogram metformin HCl perbandingan fase gerak dapar

fosfat pH 7 dan asetonitril (70:30), laju alir 1 mL/menit dan

suhu 40 oC ........................................................................... 44

Lampiran 6. Kromatogram metformin HCl perbandingan fase gerak dapar

fosfat pH 7 dan asetonitril (60:40), laju alir 1 mL/menit dan

suhu 40 oC ........................................................................... 44

Lampiran 7. Kromatogram metformin HCl perbandingan fase gerak dapar

fosfat pH 7 dan asetonitril (50:50), laju alir 1 mL/menit dan

suhu 40 oC ........................................................................... 45

Lampiran 8. Kromatogram metformin HCl perbandingan fase gerak dapar

fosfat pH 4,5 dan asetonitril (95:5), laju alir 1 mL/menit dan

suhu 40 oC ........................................................................... 45

Lampiran 9. Kromatogram metformin HCl perbandingan fase gerak dapar

fosfat pH 4,5 dan asetonitril (90:10), laju alir 1 mL/menit dan

suhu 40 oC ........................................................................... 46

Lampiran 10. Kromatogram metformin HCl perbandingan fase gerak dapar

fosfat pH 4,5 dan asetonitril (85:15), laju alir 1 mL/menit dan

suhu 40oC ............................................................................ 46

Lampiran 11. Kromatogram metformin HCl perbandingan fase gerak dapar

fosfat pH 4,5 dan asetonitril (85:15), laju alir 0,5 mL/menit dan

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 17: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

xvi

suhu 40 oC ........................................................................... 47

Lampiran 12. Kromatogram metformin HCl perbandingan fase gerak dapar

fosfat pH 4,5 dan asetonitril (85:15), laju alir 1,5 mL/menit dan

suhu 40 oC ........................................................................... 47

Lampiran 13. Kromatogram metformin HCl perbandingan fase gerak dapar

fosfat pH 4,5 dan asetonitril (85:15), laju alir 0,5 mL/menit dan

suhu 25 oC ........................................................................... 48

Lampiran 14. Kromatogram metformin HCl perbandingan fase gerak dapar

fosfat pH 4,5 dan asetonitril (85:15), laju alir 0,5 mL/menit dan

suhu 35 oC ........................................................................... 48

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 18: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

xvii

OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK

ANALISIS METFORMIN HCl DENGAN METODE KROMATOGRAFI

CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)

Anisa Mirrah Hafizhat1, Agus Siswanto

2, Pri Iswati Utami

3

ABSTRAK

Metformin HCl merupakan obat antidiabetik golongan biguanida yang

berkhasiat memperbaiki sensitivitas insulin. Metode yang dapat digunakan untuk

analisis metformin HCl yaitu Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) dengan

detektor ultraviolet-visibel pada panjang gelombang 233 nm. Untuk mendapatkan

kondisi metformin HCl yang optimal maka perlu dilakukan optimasi metode

KCKT yang digunakan. Optimasi yang dilakukan yaitu perbandingan

komposisi fase gerak dan laju alir serta optimasi suhu kolom. Fase diam yang

digunakan adalah kolom C-18 (Octadesyl silane) Puroshper® STAR (150x4,6

mm) ukuran partikel 5 µm. Fase gerak yang dioptimasi berupa campuran dapar

fosfat 0,02 M pH 7 dan 0,1 M pH 4,5 dengan asetonitril. Hasil penelitian

menunjukkan bahwa pemisahan metformin HCl optimum diperoleh dengan fase

gerak campuran dapar fosfat 0,1 M pH 4,5 dan asetonitril (85:15, v/v) elusi secara

gradien dengan laju alir 0,5 mL/menit dan suhu kolom 40 0C.

Kata kunci: KCKT, Metformin HCl, Fase Gerak, Laju Alir, Suhu Kolom

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

Page 19: OPTIMASI FASE GERAK, LAJU ALIR DAN SUHU KOLOM UNTUK ...repository.ump.ac.id/2935/1/COVER.pdf · 2014 Asisten praktikum Kimia Farmasi Dasar . 2014 Asisten praktikum Kimia Organik II

xviii

OPTIMIZATION OF MOBILE PHASE, FLOW RATE AND COLUMN

TEMPERATURE FOR ANALYSIS OF METFORMIN HCl WITH HIGH

PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)

Anisa Mirrah Hafizhat1, Agus Siswanto

2, Pri Iswati Utami

3

ABSTRACT

Metformin is a biguanide antihyperglycemic agent used for improve

insulin sensitivity. Analysis method using High Performance Liquid

Chromatography (HPLC) with ultraviolet-visible detector was set in 233 nm. To

get the optimum condition of analysis, it is important to optimization the HPLC

method. It is necessary to do mobile phase, flow rate and column temperature

optimization. The stationary was used column C-18 (Octadesyl silane) merck

Puroshper® STAR (150x4,6 mm) particle size 5µm. Optimization of mobile phase

composition were 0.02 M phosphate buffer pH 7 and 0.1 M pH 4.5 with

acetonitrile. The results showed that the optimum separation of metformin HCl

achieve with composition of mobile phase 0.1 M pH 4.5 and acetonitrile (85: 15,

v/v) with a gradient elution and 0.5 mL / minute flow rate and column

temperature of 40 0C.

Keywords: HPLC, Metformin HCl, Mobile Phase, Flow Rate, Column

Temperature

Optimasi Fase Gerak…, Anisa Mirrah Hafizhat, Fakultas Farmasi, UMP, 2017