SOP FULL
-
Upload
martina-farirah-noi -
Category
Documents
-
view
2.436 -
download
14
description
Transcript of SOP FULL
1
2
Wawasan
Kementerian kesihatan Malaysia
Malaysia akan menjadi sebuah negara terdiri daripada individu,keluarga dan masyarakat yang
sihat melalui kesihatan yang adil dan saksama, cekap, mampu disedia dan
diperolehi,berteknologi sesuai, serasi pelenggan dan bersesuaian dengan persekitaran. Sistem
ini juga akan mengutamakan kualiti, inovasi, promosi kesihatan, hormat kepada individu dan
penyertaan masyarakat ke arah peningkatan mutu kehidupan.
Misi
Kementerian Kesihatan Malaysia
Mewujudkan penglibatan dan penyertaan masyarakat untuk kesihatan bagi merangsang dan
memudahkan rakyat untuk :
Mencapai sepenuhnya kemampuan kesihatan mereka
Menghargai kesihatan sebagai asset yang bernilai
Mengambil langkah positif meningkatkan lagi dan mengekalkan status kesihatan bagi
menikmati kehidupan yang lebih bermutu.
Objektif
Kementerian Kesihatan Malaysia
Untuk membantu seseorang individu itu mencapai dan mengekalkan suatu taraf
kesihatan bagi membolehkannya menjalankan kehidupan ekonomi dan sosial yang
produktif dan dengan memberikan tumpuan kepada golongan yang kurang bernasib
baik. Menyediakan perkhidmatan kesihatan asas untuk rakyat bagi mewujudkan
kehidupan yang sihat dan bersih.
Wawasan
3
Jabatan Kesihatan Wilayah Persekutuan Labuan
Kami akan menjadi pusat penggalakkan kesihatan dan perawatan perubatan yang
utama melalui sistem penjagaan dan pencegahan yang adil dan saksama, cekap dan
tersedia dalam teknologi yang serasi pelanggan mempratikkan sistem yang
mengutamakan kualiti dan hormat kepada kemuliaan insan ke arah peningkatan mutu
kehidupan.
Misi
Jabatan Kesihatan Wilayah Persekutuan Labuan
Merangsang dan memudahakan rakyat mengekalkan status kesihatan mereka untuk
menikmati kehidupan yang lebih bermutu dan produktif dari segi sosio-ekonomi mereka.
Objektif
Jabatan Kesihatan Wilayah Persekutuan Labuan
Menyokong objektif kementerian kesihatan Malaysia dengan menyediakan
perkhidmatan berbentuk penggalakkan, pencegahan, perawatan dan pemulihan yang
cekap, berkesan dan serasi pelanggan.
Wawasan
Hospital Wilayah Persekutuan Labuan
Hospital Labuan akan menjadi perawatan perubatan yang utama melalui sistem
perubatan dan kesihatan yang adil dan saksam, cekap dan tersedia dengan teknologi
yang serasi pelanggan mempraktikkan system yang mengutamakan kualiti dan hormat
kepada kemuliaan insan ke arah peningkatan mutu kehidupan.
Misi
4
Hospital Wilayah Persekutuan Labuan
Merangsang dan memudahkan rakyat mengekalkan status kesihatan mereka untuk
menikmati kehidupan yang lebih bermutu dan produktif dari segi sosio-ekonomi mereka.
Objektif
Hospital Wilayah Persekutuan Labuan
Menyediakan kemudahan rawatan perubatan yang cekap, cepat dan berkesan serta
berfokuskan pelanggan supaya pelanggan dapat pulih dengan segera dan dapat
menjalankan aktiviti kehidupan seharian dengan sempurna.
Visi
Unit Makmal
Menyediakan perkhidmatan Patologi yang cekap, tepat dan berinovasi berlandaskan
system kualiti yang memenuhi kepuasan pelanggan.
Misi
Unit Makmal
Perkhidmatan Patologi akan menjadi satu perkhidmatan yang cemerlang menggunakan
teknologi yang sesuai, terkini dengan anggota yang berilmu, berjiwa murni, peka
terhadap keperluan pelanggan berteraskan budaya kualiti dan kerja berpasukan serta
profesionalisme demi kecemerlangan rawatan pesakit.
5
PENGENALAN HOSPITAL
Hospital Labuan mula dibina pada 10 Oktober 1991. Ianya terletak di Pulau Labuan
berhampiran dengan Negeri Sabah dengan keluasan 12.047 hektar persegi dan keluasan tapak
bangunan kira-kira 31,969 meter persegi. Ciri-ciri binaan tidak seperti hospital-hospital lain
kerana bangunannya berkonsep nukleus seperti rajah 1.0. Kedudukannya adalah 6 km dari
pusat bandar Wilayah Persekutuan Labuan dan lokasinya betul-betul ditengah Pulau Labuan.
6
Mula beroperasi pada 10 Jun 1995 dan telah dirasmikan oleh Bekas Perdana Menteri Tun Dr.
Mahathir bin Mohamad pada 29 Ogos 1996 dengan mempunyai kapasiti 109 katil. Hospital
Labuan merupakan hospital dengan pakar iaitu Pakar Perubatan, Pakar Bedah Am dan Pakar
Bius. Pakar-pakar untuk disiplin seperti ENT,Paediatrik, Psikiatrik dan sebagainya adalah dari
Hospital Queen Elizabeth, Hospital Likas atau Hospital Mesra Bukit Padang, Kota Kinabalu,
Sabah. Kesemua pakar menjalankan klinik di Klinik Pakar. (Klinik Pakar 1,2,3 dan 4).
7
SEJARAH AWAL PENUBUHAN INDUSTRI
Latarbelakang
Labuan adalah sebuah pulau yang indah terletak di Malaysia Timur dibawah pentadbiran
Wilayah Persekutuan. Kedudukannya berhampiran Negeri Sabah kira-kira 17 kilometer dari
daerah Menumbok, tempat perhubungan yang paling hampir serta berhampiran dengan Negara
Brunei Darussalam di sebelah barat laut Mempunyai keluasan 87.52 km persegi. Keadaan
permukaan buminya adalah rata tetapi sedikit sebanyak berbukit-bukit di sebelah utara dan
barat serta mempunyai pantai yang landai. Jarak bibir pantai Labuan dengan tanah besar
Borneo.
Sejarah Hospital Lama
Dalam tahun 1940-an Labuan masih lagi dibawah pemerintahan "The Straits Settlement".
Purata bilangan penduduknya hanya seramai kira-kira 8,000 orang sahaja. Pada mulanya
perkhidmatan perubatan cuma mempunyai empat buah khemah iaitu Kampung kerupang,
Kampung Layang-layangan, Hospital Lama dan Kampung Lajau yang mana di masa tersebut
kategori rawatannya adalah lebih merupakan bersifat ketenteraan. Perkhidmatan digelar
sebagai" North borneo Nursing Services"(NBNS).
Hospital lama kemudiannya didirikan selepas Perang Dunia Kedua iaitu dalam tahun 1946 oleh
kontraktor yang bernama Chin Kontraktor dengan jumlah katil (9Bed Strength) sebanyak 60
buah sahaja. Jumlah kakitangannya pula di antara 40 hingga 45 orang sahaja.
Rumah Sakit Labuan – 1947
8
Kategori kakitangan pada waktu itu diantaranya adalah terdiri daripada Pegawai Perubatan,
ketua Jururawat, Ketua Pembantu Hospital, pembantu Hospital Kanan Pembantu Hospital,
Jururawat Perbidanan,Tukang masak, Pemandu dan Atendan.
Mulai dari tarikh tersebut, Pentadbiran Hospital Lama mengalami berbagai-bagai perubahan
pengurusan di antaranya ialah British Borneo Corporation, British Military Administration dan
Colonial North Borneo sehinggalah diserahkan kepada pusat pentadbiran pusat selepas
kemerdekaan.
Sebilangan Kakitangan Hospital Labuan
Pegawai Perubatan "Pre-War" yang berakhir pada masa itu ialah Dr.On Kok Voo, Bahagian
Jururawat pula ialah Ketua Jururawat Yolander Sia, manakala Ketua Pembantu Perubatanialah
Dr.Abu Bakar diikuti oleh Mr.Lim See Loh dan Mr. Tan Kim Lee.
Latar Belakang
Unit Makmal & Tabung Darah
Unit makmal terbahagi kepada enam seksyen utama iaitu :
Patologi Kimia
9
Hematologi
Mikrobiologi Am
Tibi
Parasitologi
Kaunter
Setiap seksyen diselia oleh seorang Pegawai Sains (kecuali seksyen Hematologi dan
Parasitologi).
Seksyen Patologi Kimia Berfungsi menjalankan semua ujian-ujian kimia rutin seperti Liver
Function Test (LFT) dan ujian khas seperti ujian hormone dan tumor marker. Seksyen
Hematologi juga terbahagi kepada dua fungsi utama iaitu ujian rutin seperti Full Blood Count
(FBC) dan ujian tidak rutin seperti Peripheral Blood Film (PBF).
Seksyen Mikrobiologi merupakan seksyen terbesar di Makmal kerana mempunyai pelbagai sub-
pengkhususan yang berbeza. Mikrobiologi Am menjalankan Culture and Sensitivity Test (C&S)
bagi berbagai-bagai jenis smapel klinikal. Seksyen TB dan Parasitologi digabungkan buat masa
ini sebagai Mikroskopi dan mengkhusus kepada ujian-ujian Acid-fast Bacteria (AFB), parasit
darah terutamanya Malaria dan parasit usus. Hasil daripada polisi perkongsian hasil
kerja,Mikrobiologi juga dipertanggungjawabkan untuk menjalankan ujian-ujian klinikal STAT
seperti Urine FEME,Stool OB,Urine Pregnant Test dan sebagainya.
Seksyen kaunter merupakan satu usaha penambahbaikkan kepada perkhidmatan kaunter
Makmal sejak tahun 2009. Sebelum tahun 2009, kaunter Makmal hanya menyediakan
perkhidmatan pengambilan sampel pesakit luar. Dengan adanya kaunter dalaman, proses
penerimaan sampel pesakit dan pengedaran laporan makmal dapat dijalankan dengan lebih
sistemik.
Unit Tabung Darah yang menyediakan Perkhidmatan Transfusi merupakan unit yang baru
ditubuhkan di Hospital Labuan. Sungguhpun begitu,Perkhidmatan Transfusi telah lama wujud di
Hospital Labuan dimana ia ditawarkan melalui Seksyen Tabung Darah dibawah Unit Makmal.
Selaras dengan arahan penstrukutran semula (keputusan Mesyuarat JPPKK Bil 1/1997 dan
Kertas Dasar Mesyuarat Perancangan dan Pembangunan Kementerian kesihatan Bil 6/1997),
Unit Tabung Darah telah ditubuhkan pada tahun 2010. Walaubagaimanapun,Unit Tabung
Darah tidak terpisah sepenuhnya daripada Unit Makmal.
10
Perkhidmatan Transfusi diselaraskan diperingkat Hospital melalui Jawatankuasa Transfusi
darah. Jawatankuasa bertanggungjawab memastikan amalan transfuse yang selamat dan
bersesuaian di Hospital Labuan. Jawatankuasa diberi kuasa menetapkan polisi dan amalan
transfuse di Hospital Labuan.
Pengurusan dan operasi harian Unit Tabung Darah dijalankan oleh anggota Unit dan diketuai
oleh seorang Pegawai Y/M. Unit Tabung Darah terbahagi lagi kepada 3 seksyen utama iaitu
Seksyen Perolehan, Seksyen Saringan Dan Seksyen Bekalan.
Seksyen Perolehan Darah menjalankan 2 fungsi utama iaitu rekrutmen dan pengurusan
penderna. Seksyen ini bertanggungjawab memastikan bekalan darah yang mencukupi untuk
keperluan Hospital disamping menjaga keselamatan dan kebajikan penderma.
Seksyen Saringan turut dikenali sebagai Transfusion Microbiology Laboratory (TML). TML
bertanggungjawab menyaring semua darah penderma untuk memastikan bekalan daah bebas
bebas daripada penyakit berjangkit bawaan darah iaitu HIV, Hepatitis B, Hepatitis C dan Sifilis.
TML Hospital Labuan merupakan satu-satunya pusat saringan darah untuk Wilayah Persekutan
Labuan.
Seksyen Bekalan menjalankan operasi utama Perkhidmatan Transfusi iaitu pembekalan darah
dan komponen darah yang telah disaring untuk kegunaan wad pesakit dalam Hospital. Bekalan
darah yang disediakan termasuklah Whole Blood,Packed RBC,Platelet Concentrate (Whole
Blood / Apheresis). Fresh Frozen Plasma dan Cryoprecipitate.
11
MAKMAL TABUNG DARAH
12
PENGENALAN
Makmal tabung merupakan makmal yang terlibat dalam menguruskan beg darah bagi tujuan penyimpanan dan pengeluaran stok darah untuk pesakit.
Unit Tabung Darah yang menyediakan Perkhidmatan Transfusi merupakan unit yang
baru ditubuhkan di Hospital Labuan. Sungguhpun begitu,Perkhidmatan Transfusi telah lama
wujud di Hospital Labuan dimana ia ditawarkan melalui Seksyen Tabung Darah dibawah Unit
Makmal. Selaras dengan arahan penstrukutran semula (keputusan Mesyuarat JPPKK Bil
1/1997 dan Kertas Dasar Mesyuarat Perancangan dan Pembangunan Kementerian kesihatan
Bil 6/1997), Unit Tabung Darah telah ditubuhkan pada tahun 2010. Walaubagaimanapun,Unit
Tabung Darah tidak terpisah sepenuhnya daripada Unit Makmal.
Perkhidmatan Transfusi diselaraskan diperingkat Hospital melalui Jawatankuasa Transfusi
darah. Jawatankuasa bertanggungjawab memastikan amalan transfuse yang selamat dan
bersesuaian di Hospital Labuan. Jawatankuasa diberi kuasa menetapkan polisi dan amalan
transfuse di Hospital Labuan.
Pengurusan dan operasi harian Unit Tabung Darah dijalankan oleh anggota Unit dan diketuai
oleh seorang Pegawai Y/M. Unit Tabung Darah terbahagi lagi kepada 3 seksyen utama iaitu
Seksyen Perolehan, Seksyen Saringan Dan Seksyen Bekalan.
Seksyen Perolehan Darah menjalankan 2 fungsi utama iaitu rekrutmen dan pengurusan
penderna. Seksyen ini bertanggungjawab memastikan bekalan darah yang mencukupi untuk
keperluan Hospital disamping menjaga keselamatan dan kebajikan penderma.
Seksyen Saringan turut dikenali sebagai Transfusion Microbiology Laboratory (TML). TML
bertanggungjawab menyaring semua darah penderma untuk memastikan bekalan daah bebas
bebas daripada penyakit berjangkit bawaan darah iaitu HIV, Hepatitis B, Hepatitis C dan Sifilis.
TML Hospital Labuan merupakan satu-satunya pusat saringan darah untuk Wilayah Persekutan
Labuan.
Seksyen Bekalan menjalankan operasi utama Perkhidmatan Transfusi iaitu pembekalan darah
dan komponen darah yang telah disaring untuk kegunaan wad pesakit dalam Hospital. Bekalan
darah yang disediakan termasuklah Whole Blood,Packed RBC,Platelet Concentrate (Whole
Blood / Apheresis). Fresh Frozen Plasma dan Cryoprecipitate.
13
CARTA ORGANISASI
MAKMAL BLOOD BANK
14
Raiman LobunganJTMP U36
Siti Noor Aisyah Md Hussin Pegawai Sains C41
Abdul Azis Ag. Basar
JTMP U29
Rosnani PeliminJTMP U29
PENAKSIRAN HEMOGLOBIN
Penaksiran Hemoglobin Menggunakan Kuprum Sulfat
Peralatan yang diperlukan:
A. Radas : lanset pakai buang, swab alkohol, mikropipet, tips
B. Reagen : larutan kuprum sulfat
Objektif:
Menganggar paras hemoglobin penderma secara semikuantitatif, iaitu melebihi 12.5 g/dl atau
kurang dari 12.5 g/dl.
Prosedur:
1. Jari manis penderma dibersihkan dengan swab alkohol dan jari manis penderma dicucuk
dengan menggunakan lancet pakai buang.
2. Titisan darah pertama yang keluar dari jari yang dicucuk dilap.
3. Dengan menggunakan mikropipet dan tips, 50μL darah kapilari penderma diambil dan
darah tersebut dimasukkan ke dalam bekas berisi larutan kuprum sulfat.
4. Titisan darah yang dimasukkan ke dalam larutan kuprum sulfat diperhatikan.
Keputusan:
Sekiranya titisan darah penderma tenggelam di dasar bekas larutan kuprum sulfat dalam masa
kurang dari 10 saat, paras hemoglobin dianggarkan melebihi 12.5 g/dl. Namun sekiranya titisan
darah timbul atau berada di pertengahan larutan, maka paras hemoglobin dianggarkan kurang
dari 12.5 g/dl.
PENYEDIAAN AMPAIAN SEL A, B DAN O UNTUK PENGUMPULAN ABO SERUM
Penyediaan Ampaian Sel A, B, Dan O Untuk Pengumpulan ABO Serum
Peralatan atau bahan yang diperlukan:
A. Radas : serofuge, tabung uji 10x75mm, pipet pasteur
15
B. Reagen : sel A, B dan O yang diketahui, salin normal
Objektif:
Memastikan penyediaan ampaian sel A, B dan O boleh dipercayai dan mengurangkan
kesilapan.
Prosedur:
1. Pilih sel A, B dan O yang diketahui di mana tiada hemolisis atau kekeruhan pada
supernatan melalui pemerhatian secara kasar dan negatif bagi semua penyaringan
virologi.
2. Tiga tabung uji dilabel sebagai A, B dan O dan 1 ml sel padat ditambah.
3. Sel dicuci dalam setiap tiub dengan salin normal sebanyak tiga kali. Cara mencuci sel
adalah dengan sebatikan sel padat dengan salin normal dan diempar pada kelajuan 3000
selama 50 saat.
4. Tiga tabung uji baru dilabelkan dan labelkan dengan A, B dan O dan tambahkan setitik sel
darah padat dengan 19 titik salin normal untuk menghasilkan ampaian sel 5%.
MENGUJI ANTISERA ABO & RH (D) DENGAN ‘KNOWN CELLS’
Menguji antisera ABO & Rh (D) dengan ‘Known Cells’
Bahan dan Radas
1. Jubin
2. Kayu aplikator
3. Tiub
4. Pipet
5. pengempar
16
Reagen
1. Darah ‘Known Cells’
2. Antisera A
3. Antisera B
4. Antisera AB
5. Antigen D
Prinsip ujian
Prosedur ini telah dicadangkan bagi kegunaan reagen tersebut yang bertujuan untuk mengesan
agglutinasi langsung yang terhasil daripada sel darah merah dimana sel ini membawa antigen
yang spesifik dan juga kehadiran antibodi yang spesifik.
Kaedah ujian(Teknik Jubin)
1. Sediakan darah( known cells ) yang telah dikenalpasti kumpulan darahnya.
2. Titiskan 1 titik darah ‘known cells’ keatas jubin mengikut ruangan kumpulan iaitu A, B,
AB dan Anti-D.
3. Keluarkan antisera A, B, AB dan Anti-D.
4. Titiskan 1 titik bagi setiap antisera dan antigen D pada ruangan kumpulan tersebut.
5. Calitkan darah tersebut menggunakan kayu aplikator serta goyangkan jubin.
6. Perhatikan agglutinasi yang terhasil.
7. Catatkan pemerhatian.
Kaedah ujian(Teknik Tiub)
1. Sediakan darah(known cells) yang telah dikenalpasti kumpulan darahnya.
2. Sediakan 3 tiub yang berlabel darah A,B,AB dan anti-D.
3. Titiskan 1 titik darah ke dalam tiub yang berlabel dengan menggunakan pipet.
17
4. Keluarkan antisera A, B AB dan Antigen D.
5. Titiskan 1 titik antisera kedalam tiub tersebut dengan menggunakan pipet.
6. Empar pada 3000rpm dalam masa 15 saat.
7. Perhatikan angglutinasi yang terhasil.
8. Catatkan pemerhatian.
Interpretasi ujian
Antisera
Kump.
Darah
Antisera A Antisera B Antisera AB Antigen D
A + - - +
B - + - +
O - - - +
AB + + + +
PENGUMPULAN ABO PENUH DAN RHESUS-D MENGGUNAKAN KAEDAH JUBIN
Pengumpulan ABO Penuh Dan Rhesus-D Menggunakan Kaedah Jubin
Peralatan yang diperlukan:
A. Radas : jubin, kayu aplikator, pipet pasteur
B. Reagen : anti-A, anti-B, anti-AB, anti-D, sel A, sel B, sel O
Prinsip:
18
Bagi pengumpulan ABO dan Rhesus D langsung, kehadiran aglutinasi sel darah merah dengan
antisera yang diketahui menentukan kehadiran antigen yang melekat pada permukaan sel
darah merah. Sekiranya terdapat aglutinasi pada sel darah yang diuji ini menunjukkan
kehadiran antigen tertentu dan menentukan kumpulan ABO dan Rhesus D sel darah tersebut,
sama ada A+, B+, AB+ atau O+. Kehadiran aglutinasi ini dikesan dengan menggunakan kaedah
jubin.
Manakala bagi pengumpulan ABO tidak langsung pula, tindak balas serum pesakit dengan
reagen sel yang diketahui akan menghasilkan aglutinasi yang akan menentukan kehadiran
antibodi di dalam serum. Ini kerana badan manusia menghasilkan antibodi terhadap antigen
yang tidak dimiliki oleh individu. Oleh itu kumpulan darah ABO ditentukan berdasarkan
kehadiran antibodi yang menunjukkan jenis antigen yang tiada dalam badan manusia.
Objektif:
Menentukan kumpulan darah ABO dan Rhesus D bagi sampel darah pesakit.
Prosedur:
1. Bahagian jubin yang telah dilabelkan dengan ANTI-A, ANTI-B, ANTI-AB, CELL A, CELL
B, CELL O dan ANTI- D digunakan.
2. Satu titik antisera (anti-A, anti-B, anti-AB dan anti-D) dititiskan ke atas jubin mengikut
labelnya.
3. Satu titik ampaian sel (sel A, sel B dan sel O) dititiskan ke atas jubin berdasarkan label.
4. Satu titik darah pesakit dititiskan bagi pengumpulan ABO langsung dan Rhesus D, dan
satu titis serum pesakit (pastikan sel darah dan serum adalah dari pesakit yang sama)
dititiskan bagi pengumpulan ABO tidak langsung.
5. Campuran sel dan antisera serta campuran serum dan reagen sel disebatikan dengan
kayu aplikator sehingga membentuk syiling 5 sen.
6. Aglutinasi yang terbentuk diperhatikan dan direkodkan.
Keputusan:
Kehadiran aglutinasi : positif
Tiada aglutinasi : negatif
19
Keputusan pengumpulan ABO dan Rhesus D (pengumpulan langsung sahaja) adalah
berdasarkan jadual berikut :
Anti A Anti B Anti AB Anti-D Sel A Sel B Sel O Kumpulan
darah
+ 0 + + 0 + 0 A+
0 + + + + 0 0 B+
0 0 0 + + + 0 O+
+ + + + 0 0 0 AB+
PENGUMPULAN ABO DAN RHESUS-D PENUH DENGAN KAEDAH TIUB
Pengumpulan ABO Dan Rhesus-D Kaedah Tiub
Peralatan yang diperlukan:
A. Radas : serofuge, tiub kaca (10 x 75mm), pipet pasteur, bikar, rak tabung uji.
B. Reagen : anti-A, anti-B, anti-D, sel A, B dan O yang diketahui, salin normal.
Spesimen:
Sampel darah yang telah beku atau darah yang disimpan dalam tiub EDTA.
Prinsip:
Aglutinasi langsung sel darah merah dengan reagen tertentu menentukan kehadiran antigen
tertentu. secara umumnya, tiada aglutinasi menunjukkan ketidakhadiran antigen tersebut.
Kumpulan ABO dan rhesus D ditentukan dari corak reaksi dengan reagen yang diuji (anti-A,
anti-B dan anti-AB serta anti-D). Serum kebanyakan individu berusia lebih dari enam bulan
menghasilkan antibodi terhadap antigen ABO yang tidak dimiliki oleh individu berkenaan.
Pengumpulan serum, menggunakan sel A1, B dan O digunakan untuk mengesahkan keputusan
pengumpulan ABO sel.
Skop ujian:
20
Prosedur ini digunakan untuk semua protokol ujian yang memerlukan pengumpulan ABO dan
rhesus D.
Keadaan berjaga-jaga:
1. Tindak balas negatif palsu atau lemah di luar jangkaan mungkin berlaku apabila sampel
darah dengan subkumpulan A atau B ataupun sel kord merah daripada bayi baru lahir.
Tindak balas seperti ini juga boleh berlaku dengan sel yang telah disimpan dalam jangka
masa lama.
2. Pemboleh ubah ujian seperti teknik yang tidak betul, pengemparan atau pengemparan
yang salah, alat radas kaca yang tidak dibersihkan dengan betul dan bahan
terkontaminasi boleh mengakibatkan keputusan negative palsu atau positif palsu.
3. Anomaliti serological boleh berlaku seterusnya menyebabkan tindak balas di luar
jangkaan atau kepincangan pengumpulan ABO langsung dan tidak langsung.
Prosedur:
A. Pengumpulan ABO dan Rhesus D langsung
1. Ampaian sel 3 hingga 5% disediakan dalam salin normal.
2. Satu titik anti-A, anti-B, anti-AB dan anti-D ditambah ke tiub yang telah dilabelkan.
3. Setitik ampaian sel ditambah ke dalam tiub dan disebatikan.
4. Dimparkan pada kelajuan 3000 rpm selama 15 saat. Setiap tiub digoncang untuk
diperiksa aglutinasi. Agglutinasi diredkan dan keputusan dilaporkan.
B. Pengumpulan ABO serum/tidak langsung
1. Setitik serum atau plasma dimasukkan ke dalam tiub yang telah dilabelkan.
2. Setitik ampaian 2% sel A1, B dan O ditambah ke dalam tiub berdasarkan label.
3. Disebatikan dan diempar pada 3400 rpm selama 15 saat. Setiap tiub untuk digoncang
dan diperiksa aglutinasi. Agglutinasi digredkan dan keputusan dilapor.
Keputusan:
Kehadiran aglutinasi : positif
Tiada aglutinasi : negatif
Keputusan pengumpulan ABO dan Rhesus D (pengumpulan langsung sahaja) adalah
berdasarkan jadual berikut :
21
Anti A Anti B Anti AB Anti-D Sel A Sel B Sel O Kumpulan
darah
+ 0 + + 0 + 0 A+
0 + + + + 0 0 B+
0 0 0 + + + 0 O+
+ + + + 0 0 0 AB+
PENYEDIAAN COOMB’S CONTROL CELL (CCC)
Penyediaan Coomb’s Control Cell (CCC)
Peralatan yang diperlukan :
A. Radas : Tiub, Pipet, Inkubator, Pengempar
B. Reagen : Normal Saline, AHG
Spesimen :
Sel darah merah O yang kuat
Prinsip :
Sel darah merah yang tersensitasi dengan serum globulin adalah digunakan sebagai kontrol
positif untuk menguji fungsi AHG. Ia mengandungi IgG yang mana akan bertindak balas dengan
22
AHG(mengandungi Anti-IgG). Anti-IgG di dalam AHG akan mengikat molekul IgG seterusnya
membentuk agglutinasi.
Prosedur :
1. Tandakan 1 tabung uji (10x75mm) ‘CCC’ dan masukkan 19 titik larutan salin.
2. Masukkan 1 titik Anti-D (cairan 1/20) dan sebatikan.
3. Tambahkan 4 titik SDM padat dari kumpulan O Rh(D) positif ke dalam tabung uji dan
sebatikan dengan sempurna.
4. Eramkan tabung uji pada suhu 37°C selama 15 – 30 minit.
5. Basuh sel-sel 3 – 4 kali dengan larutan salin. Pastikan setiap pembasuhan dilakukan
dengan sempurna.
6. Buangkan semua larutan saline dengan sempurna pada pembasuhan yang terakhir.
7. Sediakan cairan 1/10 ‘CCC’ dengan memasukkan 36 titik larutan salin ke dalam tabung uji.
(Sebanyak 4 titik SDM padat telah dimasukkan ke dalam tabung uji ini semasa permulaan
ujian).
8. Uji ‘CCC’ yang disediakan dengan reagen AHG. Ia seharusnya memberikan reaksi
agglutinasi positif 2+.
9. ‘Coomb’s Control Cell’ ini boleh digunakan untuk beberapa hari jika ia disimpan pada 4°C.
(Jika sel-sel diampaikan di dalam larutan ‘Alserver’s ia boleh disimpan hampir sebulan pada
suhu 4°C.)
Interpretasi ujian
A. 4+ = agglutinasi yang sangat banyak
B. 3+ = agglutinasi yang banyak
C. 2+ = agglutinasi sederhana banyak
D. 1+ = agglutinasi sedekit
E. 0+ = tiada pembentukan agglutinasi
23
UJIAN KESERASIAN DARAH (CROSSMATCHING)
Ujian Keserasian Darah
Pengenalan:
Ujian keserasian darah terbahagi kepada dua jenis berdasarkan prinsipnya, iaitu :
1. Ujian keserasian darah major : serum pesakit diuji dengan sel darah penderma bagi
menentukan keserasiannya. Ujian keserasian major merupakan jenis ujian keserasian
darah yang dijalankan di Unit Tabung Darah Hospital Queen Elizabeth.
2. Ujian keserasian darah minor : sel darah pesakit diuji dengan serum penderma bagi
menentukan keserasiannya.
Peralatan yang diperlukan:
1. Radas : tabung uji, pipet pasteur, pengempar, mesin pengeraman 37NC
2. Reagen : LISS, AHG, saline normal, CCC (Coomb’s Control Cell)
Prinsip:
Ujian keserasian darah dilakukan berdasarkan prinsip aglutinasi. Serum pesakit ditambah
kepada sel darah penderma. LISS (low ionic strength solution) ditambah untuk mempercepat
tindak balas antigen-antibodi. Selepas pengeraman antibodi yang tidak terikat akan disingkirkan
melalui proses pencucian sel dan reagen AHG (anti human globulin) ditambah. Kehadiran
hemolisis atau aglutinasi menunjukkan kehadiran antibodi terhadap antigen tertentu pada sel
darah merah penderma.
Prosedur:
1. Data pesakit pada borang permohonan bersama-sama spesimen yang dihantar diperiksa
bagi mengesan sebarang kepincangan maklumat. Serum pesakit dipisahkan ke dalam
tabung uji berlainan dan dilabelkan dengan nama dan nombor kad pengenalan pesakit
beserta tarikh ujian dijalankan.
2. Pek darah dikeluarkan dari kumpulan ABO yang sama dengan pesakit mengikut bilangan
yang diminta dari peti simpanan darah.
24
3. Tabung uji disediakan mengikut bilangan yang dikehendaki (2 tiub bagi setiap unit darah
untuk kegunaan ampaian sel dan ujian keserasian darah) dan dilabelkan.
4. segmen dari tiub pek darah dipotong dan ampaian sel darah penderma 2 hingga 5%
disediakan.
5. Dua titk serum pesakit ditambah ke dalam setiap tabung uji (satu tabung uji bagi setiap
pek darah yang diminta).
6. Pengumpulan ABO dan Rhesus D (teknik langsung) menggunakan anti-A, anti-B, anti-AB
dan anti-D dijalankan.
7. Setitik ampaian sel darah penderma 2 hingga 5% ditambah ke dalam tiub yang
mengandungi serum pesakit.
8. Sel darah penderma diuji dengan anti-A dan anti-B (pengumpulan semula darah
penderma).
9. Campuran serum pesakit-sel darah penderma disebatikan dan diemparkan pada kelajuan
3000 selama 15 saat.
10. Tabung uji diperiksa secara makroskopik untuk mengesan kehadiran aglutinasi dengan
menggoncangkan tabung uji perlahan-lahan. Tindak balas positif boleh digredkan dari 4+
sehingga 1+. Rekodkan “0” untuk tindak balas sekiranya tiada aglutinasi dikesan.
11. Dua titik LISS ditambah. Disebatikan dan dieram pada suhu 37 NC selama 15 hingga 30
minit.
12. Selepas pengeraman, tabung uji diempar pada kelajuan 3000 rpm selama 15 saat.
13. Kehadiran aglutinasi atau hemolisis diperiksa secara makroskopik.
14. Sekiranya keputusan adalah negatif, sel dicuci sebanyak tiga kali dengan saline normal.
Saline normal dibuang selengkapnya selepas cucian ketiga.
15. Dua titik AHG ditambah pada setiap tabung uji.
16. Disebatikan dan diemparkan pada kelajuan 3000 rpm selama 15 saat.
17. Kehadiran aglutinasi diperiksa secara makroskopik dengan menggoncangkan tabung uji
perlahan-lahan. Ketiadaan aglutinasi diinterpretasikan sebagai “serasi” dan kehadiran
aglutinasi sebagai “tidak serasi”.
18. Semua keputusan (suhu bilik, 37 NC dan AHG) direkod pada borang permohonan.
19. Sekiranya ujian keserasian darah menunjukkan ketidakserasian antara darah pesakit
dengan darah penderma sebelum darah dikeluarkan, permohonan darah tersebut
dibatalkan dan dapatkan beg darah lain untuk diuji keserasiannya.
20. Nombor beg darah, tarikh dan masa ditulis pada borang permohonan.
21. Data dimasukkan ke dalam sistem komputer dan label dicetak untuk transfusi darah.
25
22. Label tersebut dilekat pada beg darah yang diminta.
23. Beg darah yang telah diuji keserasiannya dengan darah pesakit disimpan ke dalam peti
sejuk.
Keputusan:
1. Sekiranya tiada tindak balas (aglutinasi atau hemolisis) antara darah pesakit dan darah
penderma, darah penderma adalah serasi untuk pesakit berkenaan dan boleh digunakan
bagi tujuan pemindahan darah.
2. Namun jika terdapat tindak balas (aglutinasi atau hemolisis) antara darah pesakit dan
darah penderma, ini bermakna darah penderma adalah tidak serasi dan darah penderma
lain hendaklah diuji keserasiannya dengan pesakit berkenaan.
UJIAN KESERASIAN DARAH ( GEL CARD)
Ujian keserasian darah(Gel Card)
Peralatan yan diperlukan:
Pipet, gel card, tiub kaca
Spesimen :
Serum pesakit, ampaian sel darah merah 5% dari penderma
Kaedah ujian
1. Terima sampel daripada kaunter
2. Pastikan nama pada tiub dan borang pesanan adalah sama. Jika tidak sama, hantar
kembali ke kaunter
3. Rekodkan maklumat pesakit ke dalam buku daftar harian ujian keserasian &
pembekalan darah/komponen darah.
26
4. Emparkan sampel pada kelajuan 3500 rpm selama 5 minit
5. Tentukan kumpulan darah pesakit. (Rujuk proses kerja ujian kumpulan darah ABO dan
Rhesus)
6. Sediakan ampaian sel 5 % sel darah merah penderma yang mempunyai kumpulan
darah ABO dan Rhesus yang sama dengan pesakit.
7. Labelkan mikrotiub (Gel Card) dengan nama pesakit dan no beg darah
8. Masukkan 50 ul ampaian sel darah merah penderma di langkah 5, kepada mikrotiub di
langkah 6.
9. Tambahkan 25 ul serum pesakit ke mikrotiub di langkah 7. Sebatikan.
10. Eramkan mikrotiub selama 15 minit pada suhu 37°C dalam incubator 37SI
11. Kemudian, emparkan mikrotiub di langkah 9, selama 10 minit pada 1030 rpm
menggunakan ID Centrifuge 6S
12. Semak keputusan (rujuk pengendalian ujian unit tabung darah & kawalan kualiti). Jika
keputusan meragukan, ulangi ujian.
13. Rekodkan keputusan pada borang ujian keserasian dan buku daftar harian ujian
keserasian & pembekalan darah/komponen darah.
14. Hantarkan borang ujian keserasian ke kaunter
Interpretasi ujian
Interpratasi
4+ to 1+ Reaktif(incompatible)
Neg Tidak reaktif(Compatible)
UJIAN COOMB’S (Ab Screening)
Ujian Coomb’s-Direct
27
Peralatan yan diperlukan:
A. Radas : pengempar, tabung uji, pipet
B. Reagen : 0.9 natrium klorida (NaCl), AHG, CCC
Spesimen :
1. Sel darah merah
Prinsip:
Reagen antihuman globulin polispesifik (AHG) digunakan untuk pengesanan aloantibodi rutin,
ujian keserasian dan ujian antiglobulin langsung (Direct Antiglobulin Test, DAT). HAG
polispesifik mengandungi antibody terhadap IgG manusia dan komplemen C3d dan turut
bertindak balas terhadap molekul IgA dan IgM. Keputusan DAT positif menunjukkan bahawa sel
darah merah tersensitasi secara in vivo dengan immunoglobulin atau komplemen.
Kaedah ujian
1. Masukkan o.5ml cell(EDTA) ke dalam tiub dan emparkan pada kelajuan 2000rpm dalam
masa 15saat.
2. Basuhkan 3-4 kali dengan larutan saline.
3. Sediakan 2-3% suspensi sel.
4. Masukkan 1 titik 2-3% sel yang telah dibasuh ke dalam tiub.
5. Masukkan 1 titik AHG dan sebatikan.
6. Empar pada kelajuan 1000rpm dalam masa 60 saat.
7. Baca secara makroskopik dan mikroskopik.
8. Tambahkan reagen CCC
9. Emparkan pada kelajuan 2000rpm dalam masa 60 saat.
10. Baca secara makroskopik dan mikroskopik.
11. Catatkan keputusan samada negative atau positif.
28
Interpretasi ujian
Negatif – Agglutinasi
Positif – Tidak beragglutinasi
Ujian Coomb’s-Indirect
Peralatan yan diperlukan:
A. Radas : pengempar, tabung uji,pipet
B. Reagen : 0.9 natrium klorida (NaCl), AHG, CCC, Screening Cell
Spesimen :
Serum pesakit.
Kaedah ujian
1. Terima sampel daripada kaunter
2. Pastikan nama pada tiub dan borang pesanan adalah sama. Jika tidak sama, hantar
kembali ke kaunter
3. Daftarkan maklumat pesakit dan permohonan ujian di buku daftar harian ujian
AHG/GSH/Ab identification.
4. Labelkan 3 tiub dengan SI, SII, SIII ( bergantung bilangan Screening Cell yang
digunakan)
5. Masukkan 2 titik serum yang hendak diuji ke dalam setiap tiub ujian di langkah 4 ( SI,
SII, SIII)
6. Tambahkan 2 titik Screening Cell bagi setiap tiub di langkah 5. Sebatikan.
7. Emparkan tiub di langkah 6, pada kelajuan 1000 rpm selama 15 saat.
29
8. Periksa sampel daripada langkah 7, secara makroskopik & mikroskopik.
9. Semak keputusan (rujuk pengendalian ujian unit tabung darah & kawalan kualiti). Jika
keputusan meragukan, ulangi ujian.
10. Masukan 2 titik LISS ke tiub di langkah 8.
11. Eramkan selama 15 minit pada suhu 37°C
12. Kemudian, emparkan pada kelajuan 1000 rpm selama 15 saat
13. Periksa sampel daripada langkah 12, secara makroskopik & mikroskopik.
14. Semak keputusan (rujuk pengendalian ujian unit tabung darah & kawalan kualiti). Jika
keputusan meragukan, ulangi ujian.
15. Lakukan cucian berulang ke tiub di langkah 13, sebanyak 3 kali dengan saline.
16. Seterusnya, tambahkan 2 titik AHG . Sebatikan
17. Emparkan pada kelajuan 1000 rpm selama 15 saat
18. Periksa sampel daripada langkah 17, secara makroskopik & mikroskopik.
19. Semak keputusan (rujuk pengendalian ujian unit tabung darah & kawalan kualiti). Jika
keputusan meragukan, ulangi ujian.
20. Jika keputusan negatif, tambahkan 1 titik Coombs Control Cell (CCC) dan keputusan
mesti positif.
21. Rekodkan keputusan pada borang dan buku daftar harian ujian AHG/GSH/Ab
identification.
22. Hantarkan keputusan bersama borang ke kaunter
Interpretasi ujian
Negatif – Agglutinasi
Positif – Tidak beragglutinasi
UJIAN D =
Ujian D =
30
Pengenalan :
Ujian D R adalah untuk pengesanan antigen D yang lemah pada darah pesakit. Antigen rhesus
utama boleh hadir dalam pelbagai kombinasi dimana ia terdiri daripada 417 asid amino yang
merentasi membrane sel darah merah sebanyak 12x. Lekuk kecil berada atas membran
selebihnya terbenam dalam kript membran sel.
Peralatan yang digunakan :
A. Radas : Tabung uji, pipet, mesin pengempar dan inkubator
B. Reagen : Normal salin, AHG dan CCC
Spesimen :
Sel dara merah
Prosedur :
1. Cuci sel sebanyak 3 kali dengan saline dan sediakan 5% suspensi.
2. Tambah 2 titik Anti-D dan 1 titik suspensi 5% ke dalam tabung uji yang dilabelkan
3. Emparkan tiub tersebut dan perhatikan agglutinasi.
4. Eram pada suhu 37°C selama 15 minit.
5. Keluarkan tabung uji dan cuci sel sebanyak 3 kali.
6. Tambahkan 2 titik AHG.
7. Empar pada 1000rpm selama 1 minit.
8. Periksa sekiranya terdapat agglutinasi secara makroskopik.
9. Sekiranya negatif, tambahkan 1 titis CCC untuk mengesahkan ujian dan reagen AHG
31
adalah berkeadaan baik.
Interpretasi keputusan :
Terdapat agglutinasi – Darah adalah rhesus positif, terdapat kehadiran antigen D yang kuat.
Tiada agglutinasi – Darah adalah rhesus negatif, tidak terdapat kehadiran antigen D yang
lemah.
PENYEDIAAN KOMPONEN-KOMPONEN DARAH
Penyediaan Komponen-komponen Darah
Peralatan yang digunakan:
A. Radas : Beg darah, mesin pengempar beg darah
B. Reagen : CPD, CPDA
Spesimen :
Darah penuh.
Packed cell
1. Biarkan darah penuh mendap pada 4°C atau emparkan pada 4100 rpm/5°C selama 5 minit.
32
2. Plasma dipindahkan pada beg kedua (packed cell dan plasma diasingkan)
3. Packed cell boleh disimpan pada 2-6°C selama 21 hari.
Platelete concentrate & Freeze Frozen Plasma
1. Blood pack digunakan (triple bag/satellite bag)
2. Biarkan darah penuh mendap pada 4°C atau emparkan pada 4100 rpm/5°C selama 5 minit.
3. Plasma dipindahkan pada beg kedua (packed cell dan plasma diasingkan).
4. Plasma diempar pada 4100 rpm selama 5 minit.
5. Supernatan plasma akan dibekukan dan dijadikan sebagai freeze frozen plasma.
6. Mendapan (kira-kira 50ml plasma) akan dibiarkan pada suhu bilik di atas ‘slow rotater’ bagi
mengelakkan platelet berkelompok.
7. Tempoh penyimpanan adalah selama 5-7 hari.
Cryoprecipitate
1. Whole blood diempar pada 4000 rpm selama10 minit dengan suhu 8°C.
2. Pindahkan 2/3 plasma ke beg kedua.
3. Tutup tiub dan asingkan Packed Cell (simpan pada 2.- 6°C)
4. Dalam 2 jam selepas SDM dipisahkan, plasma dibekukan pada -30°C
5. Biarkan kandungan cair pada 2 – 6°C selama 16 – 18 jam.
6. Emparkan dengan suhu 2 - 4°C pada 4100rpm selama 5 minit.
7. Terbalikkan beg dan biarkan supernatant mengalir masuk ke beg ketiga (Cryoprecipitate)
dalam 10 – 15 ml plasma.
8. Simpan pada -18°C selama 12 bulan atau pada -30°C untuk mengekalkan faktor VIII.
33
34
MAKMAL HEMATOLOGI
MAKMAL HEMATOLOGI
PENGENALAN
Makmal Hematologi di Hospital Nukleus Labuan menjalankan beberapa jenis ujian iaitu
ujian Full Blood Count (FBC), ujian Prothrombin Time (PT), ujian Partial Thrombopastin Time
35
(PTT), ujian Eritrosit Sedimen Retikulosit (ESR), ujian Pencelupan Vital Supra (RETIC COUNT,
ujian penyedian Filem Darah Nipis (FDN), dan ujian G6PD. Ujian FBC dijalankan bagi
mengesan jumlah sel darah merah dan sel darah putih serta platelet samada dalam julat normal
ataupun abnormal. ujian PT, PTT dijalankan bagi mengesan untuk memastikan samada pesakit
tersebut mempunyai haemostasis yang normal ataupun abnormal. Disamping itu, terdapat
beberapa ujian lain yang dilakukan di dalam Makmal Hematologi salah satunya adalah ujian
G6PD. Ujian G6PD dilakukan biasanya pada bayi yang baru lahir. Terdapat juga ujian D–Dimer
yang dilakukan dalam Makmal Hematologi, iaitu merupakan ujian khas dan hanya dilakukan
oleh kaki tangan makmal sahaja. Dalam Makmal ini mempunyai dua kaunter penerimaan
spesimen iaitu kaunter luar terutamanya untuk pesakit luar seperti KP1 (Klinik Pakar 1), KP2
(Klinik Pakar 2) dan KP3 (Klinik Pakar 3). Manakala kaunter dalam penerimaan spesimen dari
semua wad yang berada dalam Hospital ini dan penerimaan spesimen dari OPD (Out Patent
Department).
MAKMAL HEMATOLOGI
36
Raja Saidatul NadiaPSKH (Kimia Hayat) C41
Tajuk Ujian : Ujian Full Blood Count (FBC).
FBC adalah sel-sel yang beredar dalam aliran darah pada amnya terbahagi kepada tiga jenis
iaitu sel-sel-sel darah putih (Leukosit), sel-sel darah merah (Eritrosit), dan platelet (Trombosit).
37
Christina NuriJTMP U29
Pengiraan yang yang tinggi atau rendah mungkin menunjukkan kehadiran pelbagai bentuk
penyakit, dan seterusnya pengiraan jumlah darah adalah yang paling kerap dilakukan dalam
bidang perubatabn, kerana pengiraan jumlah darah ini dapat menggambarkan keseluruhan
status kesihatan am pesakit.
Bahan dan radas:
I. Mesin analyzer CELL – DYN Ruby
Reagen :
I. WBC lyse
II. HGB lyse
III. Diluent/sheath
Sampel :
I. Sel darah merah
Prinsip :
SEL – DYN Ruby merupakan sistem penganalisa dalam makmal hematologi yang mempunyai
pelbagai parameter automatik yang direka khas untuk mendiagnos sel secara klinikal di dalam
makmal yang digunakan secara in vitro. Instrumen ini menggunakan teknologi MAPSS (Multi –
Angle Polarized Scatter Separation) untuk mendiagnos, menganalisis, mengira dan
membezakan sel – sel (sel darah putih, sel darah merah dan platelet) pada sampel darah
pesakit. Selain itu, instrumen ini menggunakan laser dan memancarkan cahaya optik untuk
menganalis tanpa memerlukan refleks kepada mod ujian yang lain. Tahap hemoglobin akan
ditentukan dengan kaedah kolorimetri dan pembilangan sel – sel adalah tertakluk kepada saiz
dan ukuran setiap sel darah pesakit.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah bersesuaian dengan pemohonan ujian.
II. Sampel yang diterima mestilah mempunyai label dan maklumat pesakit yang lengkap
pada borang dan tiub sampel.
38
III. Borang dan sampel yang tidak lengkap akan ditolak dan pemberitahuan akan dilakukan
kepada wad atau klinik berkenaan.
IV. Sampel yang mengandungi label dan borang yang lengkap akan diambil dan
pendaftaran pesakit serta pemohonan ujian pesakit akan dilakukan.
V. Bagi ujian FBC, tiub yang digunakan adalah tiub EDTA bewarna ungu.
Prosedur :
I. Sampel yang diterima akan disebatikan dengan menggunakan mesin ‘mixer’ sebelum
ujian dijalankan.
II. Nama dan kad pengenalan pesakit akan ditaip pada skrin mesin.
III. Letakan tiub yang mengandungi spesimen darah menyentuh ‘ probe’.
IV. Tekan panel dibelakang ‘ probe ‘ untuk memulakan sedutan spesimen.
V. Biarkan spesimen disedut sehingga ‘probe’ naik keatas yang menandakan proses
sedutan telah tamat.
VI. Letakan spesimen di rak yang disediakan.
VII. Spesimen tadi akan melalui proses pencairan dan pengiraan sel- sel darah putih, sel
darah merah dan platelet.
VIII. Setelah pengiraan selesai keputusan akan keluar di skrin dan direkod dalam borang
permintaan ujian.
IX. Keputusan akan dikaji, sekiranya memuaskan laporan akan direkod dan dikeluarkan.
Tetapi jika keputusan tidak memuaskan, ujian akan diulangi.
Interpretasi ujian :
Julat Normal
Total White Blood Cell ( TWBC)
Dewasa 4.00 – 11.0 x 10 9/L
Bayi 10.00 – 26.0 x 10 9/ L
Kanak – kanak 1tahun
Haemoglobin ( HB%)
Lelaki 13.5 – 18.0 g/dl
39
Perempuan 11.5 – 16.5 g/ dl
Bayi ( darah tali pusat ) 13.6 – 19.6 g/dl
Bayi kurang 3 bulan 9.5 – 12. 5 g/dl
Budak 1 tahun 11.0 – 13.0 g/dl
Budak 10 – 12 tahun 11.5 – 14.8 g/dl
Packed cell Volume ( PVC ) 37.7 – 53.7
Total Red Blood Cell ( TRBC ) 4.06 – 4.69
Mean Cell Volume ( MCV ) 81.1 – 96.0
Mean Cell Haemoglobin ( MCH) 27.0 – 31.2 picogram
Mean Cell Haemoglobin Concentration ( MCHC ) 31.8 – 35.4
Neutrofil (NEU) 39.3 – 73.7 %
Lymposyte (LYM) 18.0 – 48.3 %
Monosyte (MONO) 4.40 – 12.7 %
Eosinofilik (EOS) 0.600 – 7.30 %
Basofilik (BASO) 0.00 – 1.70 %
Tajuk Ujian : Ujian Prothombine Time (PT)
Ujian PT dijalankan bersama- sama dengan ujian PTT bagi mengesan pesakit tersebut telah
mengalami pendarahan atau lebam yang tidak dapat dijelaskan,tromboemlism,keadaan akut
seperti pembekuan sebagai faktor yang digunakan pada kadar normal yang atau dengan
40
keadaan yang kronik seperti penyakit hati. Apabila seseorang mempunyai kes trombotik atau
keguguran labih dari satu kali,PTT merupakan sebahagian daripada penilaian untuk
antikoagulan pecah atau antikardiolipin antibodi.
Bahan dan Alat Radas :
I. Kuvet
II. Bering
III. Mikropipet
IV. Finnipipette
Reagen :
I. Neoplastine
Sampel :
II. Serum
Prinsip :
Prinsip ujian ini terdiri daripada penggunaan Tromboplastin kalsium untuk mengukur masa
pembekuan plasma atau serum pesakit dan untuk membandingkan dengan julat normal.
Secara keseluruhannya, aktiviti pembekuan faktor II (protrombin), faktor V (proaccelerin), faktor
VII (proconvertin), faktor X (stuart faktor) dan faktor I (fibrinogen).
Kaedah Ujian :
I. Sampel yang diterima mengandungi label dan borang yang di isi dengan lengkap.
II. Pemohonan ujian yang diminta mestilah bersesuaian dengan sampel yang diterima.
III. Bagi ujian PT dan PTT, sampel yang diterima mestilah didalam tiub yang bewarna biru
kerana tiub ini mengandungi antikoagulan sodium sitrat.
IV. Setelah itu, sampel yang diterima mestilah diempar terlebih dahulu untuk memisahkan
sel darah merah dengan serum.
V. Sampel disimpan pada rak berdekatan dengan mesin incubate PT dan PTT.
VI. Pendaftaran dan pemohonan ujian akan dilakukan bagi sampel dan borang yang
lengkap.
41
VII. Manakala bagi sampel atau borang yang tidak lengkap akan ditolak dan pemberitahuan
akan dilakukan pada wad atau klinik yang berkenaan.
Prosedur :
I. Masukkan baring di dalam kuvet dan di simpan pada incubate.
II. 50ul plasma atau serum di masukkan ke dalam kuvet tadi.
III. Tekan ‘1’ ‘test mode’ dan tekan ( ).
IV. Tekan ‘1’ untuk ujian PT dan tekan ( ).
V. Tekan ‘1’ untuk kedudukan kuvet pada incubate dan tekan ( ) sebanyak dua kali.
VI. Incubate dilakukan selama 60 saat.
VII. Kuvet tadi di pindahkan setelah berbunyi dan finnpipette – positif ‘4’, Neoplastine Cl plus
‘100ul’ di masukkan kedalam kuvet tadi.
VIII. Tekan ( ) untuk incubate.
IX. Tunggu sehingga result keluar dan rekod.
Interpretasi ujian :
Julat Normal
Prothrombin Time 11.5 – 14.5 sec
Tajuk Ujian : Ujian Partial Thrombopastin Time (PTT)
Ujian Partial Thrombopastin Time (PTT) adalah ujian darah yang dijalankan pada beberapa
masa diambil untuk darah membeku. Ia boleh membantu mengesan jika pesakit mempunyai
masalah pendarahan atau pembekuan.
Bahan dan Alat Radas :
I. Kuvet
II. Bering
III. Mikropipet
IV. Finnipipette
42
Reagen :
I. CK Prest
II. CaCl2
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Ujian Partial Thrombopastin Time melibatkan recalcification plasma dalam kehadiran jumlah
cephalin yang standad (pengantian platelet) dan faktor XII pengaktif (kaolin). Ujian PTT
melibatkan laluan pembekuan intrinsik (faktor XII, XI, IX, VIII, X, V, II dan I) kecuali platelet.
Kaedah Ujian :
I. Sampel yang diterima mengandungi label dan borang yang di isi dengan lengkap.
II. Pemohonan ujian yang diminta mestilah bersesuaian dengan sampel yang diterima.
III. Bagi ujian PT dan PTT, sampel yang diterima mestilah didalam tiub yang bewarna biru
kerana tiub ini mengandungi antikoagulan sodium sitrat.
IV. Setelah itu, sampel yang diterima mestilah diempar terlebih dahulu untuk memisahkan
sel darah merah dengan serum.
V. Sampel disimpan pada rak berdekatan dengan mesin incubate PT dan PTT.
VI. Pendaftaran dan pemohonan ujian akan dilakukan bagi sampel dan borang yang
lengkap.
VII. Manakala bagi sampel atau borang yang tidak lengkap akan ditolak dan pemberitahuan
akan dilakukan pada wad atau klinik yang berkenaan.
Prosedur :
I. Masukkan baring di dalam kuvet dan di simpan pada incubate.
II. 50ul plasma atau serum di masukkan ke dalam kuvet tadi.
III. Masukkan CK prest ‘50ul’ pada kuvet tadi.
IV. Tekan ‘1’ “test mode” dan tekan ( ).
V. Tekan ‘2’ untuk ujian APTT dan tekan ( ).
VI. Tekan ‘1’ untuk kedudukan kuvet pada incubate dan tekan ( ) sebanyak dua kali.
VII. Incubate dilakukan selama 180 saat.
43
VIII. Kuvet tadi di pindahkan apabila berbunyi dan finnpipette – positif ‘2’, CaCl2 0.025 ‘50ul’
di masukkan ke dalam kuvet tadi.
IX. Tekan ( ) untuk incubate.
X. Tunggu sehingga result keluar dan rekod.
Interpretasi ujian :
Julat Normal
Partial Thromboplastine Time 28.0 – 45.0 sec
Tajuk Ujian : Eritrosit Sedimen Rate (ESR), Kadar Pemendapan Eritrosit.
ESR berdiri untuk kadar pemendapan eritrosit. Ia juga dikenali sebagai ‘kadar sed’. Ia adalah
ujian yagn secara tidak langsung mengukur berapa banyak keradangan ada di dalam badan.
Bahan dan Alat Radas :
I. Tiub Westergent
II. Mesin ESR
Sampel :
I. Sel Darah Merah
Prinsip :
Kadar pemendapan eritrosit (ESR), ialah kadar di mana sel – sel darah merah mendap
dalam tempoh 1 jam. Ia adalah ujian hematologi umum dan untuk menjalankan ujian, darah
anticougulate diletakkan dalam tiub yang tegak, yang dikenali sebagai tiub Westergent dan
kadar pemendapan sel – sel darah marah diukur dan dilaporkan dalam mm/h. Sejak di
perkenalkan penganalis automatik ke dalam makmal klinikal, ujian ESR telah dilakukan secara
automatik.
Kaedah Ujian :
I. Tekan ‘ON’.
44
II. Masukkan empat ‘SENSOR TEST CUVETTES’.
III. Tekan ( ) tiga kali sehingga ‘SENSOR TEST’ kelihatan.
IV. Tekan (RUN) sehingga ‘SENSOR TEST RUN’ kelihatan.
V. Tunggu sehingga ‘SENSOR TEST OK’.
VI. Tekan ( ) untuk sambungkan ujian.
Prosedur :
I. Pindahkan sampel darah ke dalam kuvate.
II. Masukkan kuvate ke dalam ‘MINI VES’.
III. Tekan ( ) sehingga ‘WESTERGENT 1H’kelihatan.
IV. Tekan (RUN).
V. Tekan ( ) untuk tengok result.
Interpretasi ujian :
Julat Normal
Kaedah Westergen (ESR) : mm/hr
Lelaki : 0.15 mm/hr
Perempuan : 0.20 mm/hr
Tajuk Ujian : Ujian Pencelupan Vital Supra (Reticulocyte Count).
Ujian pengiraan jumlah retikulosit adalah ujian yang dijalankan apabila RBC yang menurun atau
hemoglobin menurun dan hematokrit bagi mengesan fungsi sumsum tulang. Jika pengesanan
yang kurang pasti,kaedah ini boleh memastikan lagi jika pesakit tersebut mempunyai
keabnormalan pada sumsum tulang nya. Ujian ini juga dapat dijalankan andainya pesakit
disyaki mempunyai gejala atau simptom seperti pucat,keletihan,kelemahan,sesak nafas atau
najis berdarah. Pengiraan retikulosit dilakukan bersama-sama dengan mengira 1 RBC,
hematokrit, hemoglobin untuk memantau bagi fungsi sumsum dan tindakbalas kepada rawatan.
Bahan dan Alat Radas :
45
I. Tabung uji
II. Maker
III. Mikropipet
IV. Incubater
V. Slaid
VI. Sisip kaca
VII. Mikroskop
Reagen :
I. Larutan ‘Supra-Vitral’
Sampel :
I. Sel Darah Merah
Prinsip :
Reticulocyte adalah sel – sel darah merah muda yang mengandungi baki ‘basophilic
ribonucleoprotin’ dalam struktur nukleusnya. Bahan ‘Basophilic’ ini akan bergantung dengan
pewarna seperti Brilliant Cresyl Blue atau New Methylene Blue untuk membentuk mendapan
biru yang berbintik – bintik atau berantai – rantai.
Kaedah Ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah bersesuaian dengan pemohonan ujian.
II. Sampel mestilah mempunyai label dan maklumat pesakit yang lengkap pada borang
dan tiub sampel.
III. Borang dan sampel yang tidak lengkap akan ditolak dan pemberitahuan akan dilakukan
kepada wad atau klinik berkenaan.
IV. Sampel yang mengandungi label dan borang yang lengkap akan diambil dan
pendaftaran dan pemohonan ujian pesakit akan dilakukan.
V. Bagi ujian Reticulocyte, tiub yang digunakan adalah tiub EDTA bewarna ungu.
Prosedur :
46
I. 1 tabung uji diambil dan dilabelkan nama pesakit atau nombor bagi pemohonan ujian
yang banyak.
II. 50ml sampel darah dan 50ml reagen retic akan di pipetkan kedalam tabung uji tadi.
III. Sebatikan tabung uji yang berisi sampel dan reagen tadi.
IV. Masukkan kedalam incubater selama 30 minit.
V. Buat smear, smear yang dibuat mestilah mengandungi ciri – ciri yang betul (mempunyai
kepala, badan dan ekor).
VI. Keringkan pada udara.
VII. Lihat bawah mikroskop.
VIII. Hasil keputusan akhir diambil dan direkodkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal
Dewasa : 0.2-2 %
Bayi : 2.5-6 %
Tajuk Ujian : Ujian Penyediaan Filem Darah Nipis (PBF).
Filem darah nipis biasanya dilakukan untuk menilai populasi sel darah apabila FBC mempunyai
perbezaan yang dilakukan dengan pembilang sel darah secara automatic,menunjukkan
kehadiran sel-sel abnormal atau belum matang. Ia juga boleh dilakukan apabila pesakit disyaki
terdapat gangguan atau penyakit yang menjejaskan pengeluaran sel darah seperti anemia
1,berkurangan atau pengeluaran abnormal sel di dalam sumsum tulang serta pemusnahan sel
peningkatan.
Bahan dan radas :
I. Slaid
II. Sisip kaca
III. Mikropipet
47
IV. Mikroskop
Sampel :
I. Darah
Reagen :
I. Alkohol
Prinsip :
PBF (Peripheral Blood Film) atau film daran nipis yang diwarnakan dengan pewarna
tertentu dan diperiksan dibawah mikroskop. SDM normal digambarkan sebagai normochromic
(warna yang normal) dan norocytic (saiz yang normal). Nilai MCV seolah – olah memberi
pertunjuk kepada saiz SDM. Nilai MCV yang rendah selalu berhubungkait dengan saiz SDM
yang lebih kecil daripada normal (microcytosis) sebaliknya nilai MCV yang tinggi berhubungkait
dengan saiz SDM yang lebih besar (macrocytosis). SDP (Sel Darah Putuh) digamberkan
sebagai ‘morphologically normal’ pada individu yang sihat. Kehadiran sel – sel atypical
lymphocytes, atypical mononuclear dan toxic granulation selalunya berhubungkait dengan
infeksi. Impression yang diberikan adalah berdasarkan smear darah dan keputusan ujian darah
yang lain.
Kaedah :
I. Sampel yang diterima mestilah bersesuaian dengan pemohonan ujian.
II. Sampel mestilah mempunyai label dan maklumat pesakit yang lengkap pada borang
dan tiub sampel.
III. Borang dan sampel yang tidak lengkap akan ditolak dan pemberitahuan akan dilakukan
kepada wad atau klinik berkenaan.
IV. Sampel yang mengandungi label dan borang yang lengkap akan diambil dan
pendaftaran dan pemohonan ujian pesakit akan dilakukan.
V. Bagi ujian Filem Darah Nipis, tiub yang digunakan adalah tiub EDTA bewarna ungu.
Prosedur :
I. Sampel yang mengandungi label dan borang yang di isi dengan lengkap akan di ambil.
II. Slaid dan sisip kaca di ambil dan sampel darah pesakit di ambil.
48
III. Dengan menggunakan mikropipet, sampel darah di ambil dan dititiskan ke atas slaid.
IV. Sisip kaca digunakan untuk membuat filem darah nipis.
V. Filem darah nipis yang baik menggandungi kepala, badan dan ekor.
VI. Smear di keringkan pada udara dan di fiksasi menggunakan alkohol.
VII. Biarkan smear kering pada udara sebelum dilihat dibawah mikroskop.
VIII. Keputusan yang dilihat akan diambil dan direkodkan ke dalam keputusan pesakit.
Interpretasi ujian :
Julat normal
Peripheral Blood Film : 7.5 µm.
Tajuk Ujian : Ujian Glucose- 6 – phosphate – Dehydrogenase (G6PD).
Ujian G6PD adalah yang dijalankan terhadap kanak-kanak yang mengalami jaundis berterusan
sebagai bayi yang baru lahir yang tidak boleh dijelaskan oleh sebab lain. Ia juga boleh
dilakukan terhadap pesakit yang telah mempunyai lebih dari satu kes yang tidak dapat
dipastikan anemia hemolitik. Pengulangan ujian G6PD adalah dilakukan mungkin sekali sekala
bagi mengesahkan penemuan awal atau jika keputsan adalah normal dalam sebuah kes
hemolisis.
Bahan dan Alat Radas :
I. Tabung uji
II. Penebuk kertas
III. Kertas G6PD
IV. Mikropipet
V. Maker
VI. Jam
Reagen :
I. Glucose – 6 – Phosphate Dehydrogenase (G6PD)
49
Sampel :
I. Darah
Prinsip :
Haemolysate dieramkan bersama dengan glucose – 6 – phosphate sebagai substrate
dan triphosphopyridine nuclestide (TPN) sebagai co – enzyme bersama-sama dengan Brilliant
Cresyle Blue Dye. Pengurangan hydrogen daripada glucose – 6 – phosphate dari hasil adanya
G6PD di dalam campuran tindakbalas dan melibatkan pengurangan TPN kepada TPNH. Dye
yang dicampurkan di kurangkan kepada sebatian yang tidak berwarna yang sama anggaran
banyaknya dengan TPNH yang didapati. Ketiadaan atau kekurangan enzyme akan melibatkan
timbulnya warna itu.
Kaedah Ujian :
I. Sampel yang diterima mengandungi label dan borang yang di isi dengan lengkap.
II. Pemohonan ujian yang diminta mestilah bersesuaian dengan sampel yang diterima.
III. Bagi ujian G6PD, biasanya sampel diterima pada kertas kecil yang mempunyai darah
pesakit dan di kelipkan sekali dengan borang pesakit.
IV. Pendaftaran dan pemohonan ujian akan dilakukan bagi sampel dan borang yang
lengkap.
V. Manakala bagi sampel atau borang yang tidak lengkap akan ditolak dan pemberitahuan
akan dilakukan pada wad atau klinik yang berkenaan.
Prosedur :
I. 1 Tabung uji di ambil dan di labelkan bersesuaian dengan nama pesakit atau nombor
bagi sampel yang banyak.
II. Kertas yang mengandungi sampel darah pesakit di ambil dan ditebuk dan diletakkan di
dalam tabung uji tadi.
III. Reagen G6PD akan diletakkan kedalam tabung uji tadi sebanyak 50ml menggunakan
mikropipet.
IV. Jam akan digunakan untuk menetapkan masa selama 15 minit.
50
V. Kertas G6PD diambil dan sampel tadi diletakkan ke atas kertas itu dan di keringkan.
VI. Masukkan kertas itu kedalam kotak khas untuk ujian G6PD ‘sinaran UV’ dan tekan suiz
‘ON’ serta lihat keputusannya.
VII. Hasil akhir keputusan akan di rekodkan.
Interpretasi ujian :
I. G6PD NORMAL
II. G6PD DEFICIENT
III. G6PD INTERMEDIATE
LEISHMAN
Pewarnaan Leishman
Prinsip:
Pewarnaan Leisman merupakan campuran Methylene Blue dan Eosin. Larutan pewarna
Leishman mewarnakan filem darah dengan kandungan alkohol metilnya. Sebagai pewarna
neutral dalam medium beralkohol, pewarna Leishman hanya menunjukkan tindak balas
pewarnaan setelah ditambah larutan penimbal.
Tujuan:
Untuk menghasilkan tindak balas warna pada sel-sel darah yang terbahagi kepada tiga
komponen utama : nukleus, sitoplasma dan granul.
Prosedur:
1. Letakkan filem darah nipis di atas rak, banjirkan slaid dengan pewarna Leishman dan
biarkan selama 30 saat hingga 1 minit.
2. Tambahkan 2 ml larutan penimbal pH 6.8 dan biarka selama 10 minit.
3. Bersihkan slaid filem darah dengan air mengalir untuk membersihkan sisa metalik pada
filem darah.
51
4. Biarkan filem darah nipis kering.
Keputusan:
Komponen sel Warna
Nukleus Ungu-merah jambu
Sitoplasma limfosit Biru ke kelabu kebiruan
Granul neutrofil Merah jambu keunguan
Granul eosinofil Oren kemerahan
Granul basofil Ungu gelap
Platelet Keunguan
Eritrosit Kemerahan
52
MAKMAL SEROLOGI
MAKMAL SEROLOGI
PENGENALAN
53
Di dalam makmal serologi di Hospital Nukleus Labuan, ujian yang dilakukan adalah
seperti ujian saringan HIV, HCV, denggi dan beberapa ujian lagi. Makmal serologi ini berkait
rapat dengan makmal blood bank kerana di makma inilah ujian lanjutan bagi beg pendermaan
darah dilakukan iaitu ujian penyaringan. Darah yang diterima daripada kempen derma darah
akan disaring mengikut ujian seperti Ujian HIV, HCV dan bermacam lagi.
CARTA ORGANISASI MAKMAL SEROLOGI
54
MAKMAL SEROLOGI
Tajuk Ujian : Ujian Saringan Anti-HIV
55
Siti Noor Aisyah Bt. Md. HussinPSMP C41
Ivy Emily John JinalJTMP U29
Ujian saringan Anti-HIV adalah kit enzim imunoasai untuk mengesan antigen p24 HIV dan
antibodi HIV-1(kumpulan M dan O) serta serum atau plasma pesakit dalam HIV-2. Kit ini boleh
digunakan untuk kedua-dua saringan antigen HIV dan HIV antibodi.
Bahan & Radas :
Penyediaan reagen.
NOTA : Sebelum guna, biarkan keadaan reagen berada pada suhu bilik (18-30°c).
1. Penyediaaan reagen untuk digunakan.
Reagen 1 (R1) : Mikroplat
Dalam beg foil yang tertutup, setiap plat mengandungi 12 petak kolum yang dibalut. Gunting
atau potong beg tersebut dengan menggunakan pisau berukuran 0.5 hingga 1 cm di atas
pengedap. Buka beg dan keluarkan rangka. Letakkan petak kolum plat yang tidak digunakan
semula ke dalam beg. Tutup beg dengan berhati-hati serta letakkan semula penyimpanan pada
+2-8°c.
Reagen 3 (R3) : Kawalan negatif
Reagen 4 (R4) : Kawalan positif Ab HIV
Reagen 5 (R5) : Kawalan positif Ag HIV
Reagen 6 (R6) : Konjugat 1
Reagen 10 (R10) : Larutan terakhir
2. Menyusun semula reagen
56
Membasuh larutan (20X perhatian) : Reagen 2 (R2)
Cairkan 1:20 dalam air suling untuk mendapatkannya dan sediakan sebelum digunakan untuk
membasuh larutan. Sediakan 800 ml untuk 1 plat bagi 12 petak kolum.
Larutan kerja konjugat 2 : Reagen 7a (R7a) + Reagen 7b (R7b)
Goncangkan botol konjugat lyophilised konjugat 2 (R7a) secara perlahan-perlahan bagi
mengelakkan terdapat kehadiran bahan asing yang ada pada penutup getah. Berhati-hati
memindahkan penutup bagi kandungan botol pencair konjugat (R7b) kepada pencair Konjugat
Lyophilised (R7a). Gantikan penutup dan biarkan selama 10 minit,goncangkan perlahan-lahan
serta songsangkan semasa ke semasa untuk memudahkan penyelenggaraan.
Larutan perkembangan enzim : Reagen 8 (R8) + Reagen (R9)
Cairkan 1:11 kromogen (R9) dalam substrat penampan (R8) (Bekas : 1 ml reagen R9 + 10 ml
reagen R8). Kestabilan adalah selama 6 jam dalam keadaan gelap serta sekali sahaja
disediakan.
Prinsip :
Ujian saringan HIV Ag-Ab adalah enzim imunoasai berasaskan prinsip jenis ‘sandwich’ untuk
mengesan antigen HIV dan untuk pelbagai antibodi berkaitan dengan virus HIV-1 serta HIV-2
dalam serum atau plasma pesakit.
Fasa pepejal dilapis dengan:
1. Monoklonal terhadap antibodi p24 antigen HIV-1.
2. Antigen dtulenkan: gp160 protein rekombinan, peptida sintetik menyerupai sepenuhnya
(seperti dikodkan oleh virus yang tidak sedia ada).
1. HIV-1 kumpulan O-spesifik epitop dan peptida yang menyerupai immunodominan
kandungan HIV 2.
Konjugat berdasarkan penggunaan:
57
Biotinilated antibodi poliklonal Ag HIV (Konjugat 1)
Streptavidin dan antigen HIV- Konjugat peroksidase (gp41 dan gp36 peptides menyerupai
kandungan glikoprotein epitop immunodominan HIV- 1 dan HIV.
1. Kandungan glikoprotein dan peptida sintetik yang menyerupai kumpulan O- spesifik HIV
2. epitop digunakan untuk fasa pepejal) (Konjugat 2)
Langkah-langkah prosedur tindak balas termasuklah:
3. Konjugat 1 (biotinilat antibodi poliklonal p24 Ag HIV- 1) ditambah ke dalam petak kolum
mikroplat.
4. Sampel serum dan kontrol asai akan dipipet ke dalam petak kolum.
1. Jika hadir,antigen HIV akan mengikat dengan antibodi monoklonal yang terikat
pada fasa pepejal dan konjugat 1.
2. Jika ada antibodi HIV- 1 atau HIV- 2 mengikat pada antigen dan berubah kepada
fasa pepejal konjugat 1.
3. Pemendapan konjugat 1 dan sampel akan berubah warna daripada kuning hijau
kepada biru.
4. Selepas pengeraman pada suhu 37°c dan dibasuh, ditambahkan dengan konjugat 2:
1. Streptividin bertindak balas bersama biotinilated Ab-Ag-Ab kompleks.
2. Peroksidase dilabel,antigen HIV- 1 dan HIV-2 ditulenkan mengikat dalam bentuk
antibodi IgG,IgM atau IgA untuk pada fasa pepejal.
5. Selepas pengeraman pada suhu 18-30°c,pecahan konjugat 2 diasingkan dengan teknik
membasuh. Selepas pengeraman dalam kehadiran substrat pada suhu bilik (18-
13°c),kehadiran kompleks konjugat akan menunjukkan perubahan warna.
6. Tindak balas akan berhenti dan serapan akan dibaca oleh spektrofotometer pada
450/620-700 nm.Penyerapan diukur pada sampel untuk menentukan kehadiran samada
ada atau tidak Ag HIV atau HIV- 1 dan antibodi HIV- 2.
Kaedah Ujian :
58
1. Terima sampel daripada kaunter
2. Pastikan nama pada tiub dan borang pesanan adalah sama. Jika tidak sama, hantar
kembali ke kaunter
3. Daftarkan maklumat pesakit dan permohonan ujian di LabNet.
4. Emparkan sampel pada kelajuan 3500 rpm selama 5 minit
5. Keluarkan kit ujian dan biarkan pada suhu bilik.
6. Pastikan tarikh luput dan strip ujian berada dalam keadaan yang baik dalam kit ujian.
7. Bahagikan 'microplate' kepada 3 bahagian dengan 4 'wells' setiap bahagian dengan
menggunakan 'marker'.
8. Labelkan 'wells' mengikut spesimen yang hendak diuji.
9. Titiskan 3 titik (75 µl) 'serum diluent' ke 'well' yang pertama, 1 titik (25 µl) ke 'well' yang
kedua, 1 titik (25 µl) ke 'well' yang ketiga dan 1 titik (25 µl) ke 'well' yang keempat dengan
menggunakan penitik.
10. Pipetkan 25 µl serum pesakit ke 'well' yang pertamadi langkah 9.
1. Lakukan pencairan bersiri dan pipet keluar 25 µl daripada 'well' yang keempat.
2. Titiskan 1 titik (25 µl) 'unsensitized particles' ke 'well' yang kedua, 1 titik (25 µl) 'HIV-1
sensitized particles' ke 'well' yang ketiga dan 1 titik (25 µl) 'HIV-2 sensitized particles' ke
'well' yang keempat.
3. Sebatikan campuran dengan diletakkan pada 'mixer' pada 1000 rpm selama 5 saat.
4. Eramkan pada suhu bilik selama 2 jam.
5. Semak keputusan. (rujuk fail pengendalian ujian serologi & kawalan kualiti). Jika
keputusan meragukan, ulangi ujian.
6. Rekodkan keputusan di LabNet, buku rekod ujian serologi , borang ujian Anti HIV 1/2
dan borang Per. Pat 301.
7. Sahkan keputusan.
59
8. Hantar keputusan bersama borang Per. Pat. 301 ke kaunter.
Interpretasi Ujian :
Sampel dengan kehadiran nilai kurang daripada nilai yang ditolak pada mulanya dianggap
negatif oleh ujian saringan Ag-Ab ULTRA HIV.
Keputusan hanya nilai dibawah yang ditolak (C.O – 10% < OD <
C.O).Walaubagaimanapun,perlu ditafsirkan dengan berhati-hati (ini adalah untuk
pengulanganujian dalam 2 salinan sampel yang sepadan jika sistem dan prosedur makmal
dapat melakukannya). Sampel dengan kehadiran nilai sama dengan atau lebih besar daripada
nilai yang ditolak dianggap positif oleh ujian saringan Ag-Ab ULTRA HIV. Ia perlu diuji dalam 2
salinan sebelum interpretasi keputusan akhir. Jika selepas sampel diuji, kehadiran nilai 2
salinan kurang daripada nilai yang ditolak,keputusan awal adalah tidak berulang dan sampel
disahkan negatif oleh ujian saringan Ag-Ab ULTRA HIV.
Tindak balas yang tidak diulang sering disebabkan oleh:
1. Mikroplat tidak dibasuh dengan baik.
2. Terkontaminasi oleh sampel serum atau plasma negatif dengan antibodi titre tinggi.
3. Terkontaminasi larutan subsrat oleh agen pengoksidaan ( peluntur,ion logam dan lain-
lain).
4. Terkontaminasi pemberhentian larutan.
Jika selepas pengulang ujian,kehadiran 1 salinan sama dengan atau lebih besar daripada nilai
yang ditolak,keputusan yang pertama diulang dan sampel disahkan positif oleh ujian saringan
Ag-Ab ULTRA HIV,tertakluk kepada had prosedur.
Tajuk ujian : Ujian Saringan HBs Ag ULTRA
60
Ujian saringan Ag HBs ULTRA merupakan satu enzim imunoasai dengan menggunakan teknik
jenis ‘sandwich’ untuk mengesan kehadiran antigen Hepatittis virus B (Ag HBs) dalam serum
atau plasma.
Bahan & Radas :
Penyediaan reagen.
NOTA : Sebelum guna, biarkan keadaan reagen berada pada suhu bilik (18-30°c).
1. Penyediaan reagen untuk digunakan.
Reagen 1 (R1) : Mikroplat
Dalam beg foil yang tertutup, setiap plat mengandungi 12 petak kolum yang dibalut.
Gunting atau potong beg tersebut dengan menggunakan pisau berukuran 0.5 hingga 1 cm
di atas pengedap. Buka beg dan keluarkan rangka. Letakkan petak kolum plat yang tidak
digunakan semula ke dalam beg. Tutup beg dengan berhati-hati serta letakkan semula
penyimpanan pada +2-8°c.
Reagen 3 (R3) : Kawalan negatif
Reagen 4 (R4) : Kawalan positif
Reagen 10 (R10) : Larutan terakhir
2. Menyusun semula reagen
Membasuh larutan (20X perhatian) : Reagen 2 (R2)
Cairkan 1:20 dalam air suling untuk mendapatkannya dan sediakan sebelum digunakan
untuk membasuh larutan. Sediakan 800 ml untuk 1 plat bagi 12 petak kolum.
Larutan kerja konjugat (R6 + R7)
61
Goncangkan botol konjugat lyophilised konjugat (R7) secara perlahan-perlahan bagi
mengelakkan terdapat kehadiran bahan asing yang ada pada penutup getah. Berhati-hati
memindahkan penutup bagi kandungan botol pencair konjugat (R6) kepada pencair
Konjugat Lyophilised (R7). Gantikan penutup dan biarkan selama 10 minit,goncangkan
perlahan-lahan serta songsangkan semasa ke semasa untuk memudahkan
penyelenggaraan.
Larutan perkembangan enzim : Reagen 8 (R8) + Reagen (R9)
Cairkan 1:11 kromogen (R9) dalam substrat penampan (R8) (Bekas : 1 ml reagen R9 + 10
ml reagen R8). Kestabilan adalah selama 6 jam dalam keadaan gelap serta sekali sahaja
disediakan.
Prinsip :
Ujian saringan HBs Ag adalah enzim imunoasai berdasarkan prinsip jenis ‘sandwich’ iaitu
menggunakan antibodi monoklonal dan antibodi poliklonal yang dipilih untuk kebolehan
mereka mengikat kepada subjenis pelbagai HBs Ag. Diiktiraf oleh Pertubuhan Kesihtan
Sedunia (WHO) dan perkara yang paling HBV strain yang variasi.
HBs Ag fasa pepejal dilapisi dengan antibodi monoklonal.
Konjugat HBs Ag berdasarkan antibodi monoklonal yang digunakan daripada tikus dan
antibodi poliklonal daripada kambing terhadap HBs Ag. Antibodi ini terikat untuk
peroksidase.
Kaedah :
1. Penerimaan sampel daripada Unit Tabung Darah (UTD)
2. Pastikan nombor beg darah pada tiub dan borang rekod mobile adalah sama. Jika tidak
sama, hantar kembali ke UTD.
3. Isikan borang saringan ujian.
4. Emparkan sampel pada kelajuan 3500 rpm selama 5 minit
5. Keluarkan kit ujian dan biarkan pada suhu bilik.
6. Pastikan tarikh luput dan strip ujian berada dalam keadaan yang baik dalam kit ujian.
7. Pipetkan 100 µl 'control' atau 'sample' ke strip ujian.
62
8. Seterusnya, tambahkan 50 µl 'conjugate (R6 + R7)' ke strip ujian di langkah 7.
9. Eramkan selama 1 jam 30 minit pada suhu 37 °C di dalam 'incubator'.
10. Selepas pengeraman, cuci strip ujian (rujuk prosedur penggunaan washer PW40).
11. Selepas cucian, tambahkan 100 µl 'TMB substrate(10 ml R8 + 1 ml R9)'.
12. Eramkan selama 30 minit pada suhu bilik (18°C-30°C) di tempat gelap.
13. Selepas pengeraman, tambahkan 100 µl 'stopping solution'.
14. Baca keputusan ujian pada panjang gelombang 450/620-700 nm (rujuk prosedur
penggunaan mesin PR3100).
15. Sahkan keputusan
16. Simpan keputusan ujian saringan dalam fail ujian saringan penderma darah.
Langkah-langkah prosedur tindak balas termasuklah:
1. Pengagihan kawalan sera dan sampel dilakukan ke dalam petak kolum mikroplat.
Pengagihan ini boleh mnejadi kawalan visual: Pewarnaan ini adalah lebih jelas
berbanding petak kolum yang kosong antara petak kolum yang ada sampel.
Pengagihan ini juga boleh menjadi kawalan automatik untuk membaca pada 490/620-
700 nm (pilihan).
2. Pengagihan konjugat berwarna merah ke dalam petak kolum.
Pengagihan ini boleh mnejadi kawalan visual: Selepas penambahan larutan
konjugat,warna pada petak kolum akan berwarna merah. Kawalan secara automatik ini
mungkin untuk bacaan spektrofotometer pada 490/620-700 nm (pilihan). Pemendapan
sampel ini juga boleh menjadi kawalan pada langkah ini untuk memanipulasikan
bacaan automatik pada 490/620-700 nm.
3. Selepas pengeraman pada 37°c semasa satu jam dan separuh konjugat dipindah
secara membasuh.
4. Pengagihan larutan substrat bewarna.
Pengagihan ini boleh mnejadi kawalan visual: Pewarnaan ini adalah lebih jelas
berbanding petak kolum yang kosong dan petak kolum larutan substart merah jambu.
Pengagihan ini juga boleh menjadi kawalan automatik untuk bacaan pada 490 nm
(pilihan).
63
5. Selepas 30 minit pengeraman dalam kehadiran substrat yang gelap dan suhu bilik (18-
30°c),kehadiran kompleks konjugat menunjukkan perubahan warna.
6. Pengagihan larutan terakhir.
Pengagihan ini boleh mnejadi kawalan visual: Larutan substrat pada mulanya bewarna
merah jambu akan berubah kepada jernih untuk petak kolum sampel yang tidak reaktif
dan berubah dari biru kepada kuning untuk petak kolum sampel yang posoitif.
7. Bacaan untuk ketumpatan optikal pada 490/620-700 nm dan interpretasi keputusan.
Interpretasi Ujian :
HBs Ag ULTRA. Keputusan dibawah hanya ditolak nilai (nisbah sampel antara 0.9 hingga 1).
Walaubagaimanapun, interpretasi keputusan hendaklah dilakukan dengan berhati-hati.
Pengulangan ujian dalam 2 salinan sampel yang sepadan adalah lebih baik jika sistem dan
prosedur makmal dapat melakukannya. Selepas sampel diulang semula,nilai nisbah 2 salinan
sampel kurang daripada 1,keputusan yang pertama tidak akan diulang dan sampel disahkan
negatif oleh ujian saringan HBs Ag ULTRA. Untuk reaktif awal atau sampel meragukan (0.9 <
nisbah <1),jika selepas pengulangan nilai nisbah sekurang-kurangnya satu daripada 2 salinan
adalah sama atau lebih besar daripada 1,keputusan yang pertama tidak akan diulang dan
sampel disahkan positif oleh ujian saringan HBs Ag ULTRA,tertakluk kepada had prosedur.
Tajuk ujian : Ujian Saringan HCV Ag-Ab ULTRA
Ujian saringan HCV ag-Ab ULTRA adalah enzim imunoasai untuk mengesan infeksi HCV
berdasarkan pengesanan kapsid antigen dan antibodi yang berkaitan dengan infeksi oleh virus
Hepatitis C di dalam serum atau plasma pesakit.
Bahan dan Radas :
64
Sebelum menggunakan reagen kit ujian saringan HCV Ag-Ab ULTRA,pastikan reagen dalam
kedaan baik pada suhu bilik selama 30 minit.
1. Penyediaan reagen untuk diguna.
Mikroplat (R1)
Dalam beg foil yang tertutup, setiap plat mengandungi 12 petak kolum yang dibalut. Gunting
atau potong beg tersebut dengan menggunakan pisau berukuran 0.5 hingga 1 cm di atas
pengedap. Buka beg dan keluarkan rangka. Letakkan petak kolum plat yang tidak digunakan
semula ke dalam beg. Tutup beg dengan berhati-hati serta letakkan semula penyimpanan pada
+2-8°c.
Konjugat 1 : Sediakan untuk digunakan (R6)
Songsangkan untuk mensebatikan sebelum diguna.
Konjugat 2 : sediakan untuk digunakan (R7)
2. Reagen yang digunakan semula
Konsentrasi larutan pembasuh untuk mencairkan R2 1:20 dalam air suling. Sediakan 800 ml
untuk 1 plat 12 petak kolum.
Larutan substrat untuk dicairkan (R8 + R9)
Reagen (R9) dicairkan menggunakan reagen R8 (contoh : 1 ml reagen R9 dalam 10 ml reagen
8ml). 10 ml mesti cukup untuk 1 hingga 12 petak kolum bagi mensebatikan.
Kawalan positif antigen (R5a + Rb)
Tuangkan kandungan R5 yang dicairkan ke dalam botol Ag R5 liopilised. Senaraikan botol dan
biarkan 10 minit dan goncang perlahan-lahan secara songsang dari semasa ke semasa untuk
memudahkan sebatian.
Prinsip :
65
Mikroplat fasa pepejal ujian saringan HCV Ag-Ab berlapis dengan :
1. Antibodi monoklonal terhadap kapsid protein virus Hepatitis C.
2. 2 produk protein rekombinan oleh E.coli daripada bahagian NS3 : genotip 1 dan 3a.
3. 1 antigen rekombinan daripada bukan struktural bahagian NS4.
4. Peptida bermutasi daripada bahagian strukutral kapsid genom virus hepatitis C.
Konjugat digunakan untuk :
1. Konjugat 1 (R6) : Antibodi monoklonal biotinilet tikus terhadap kapsid Hepatitis C.
Monoklonal ini tidak ada reaksi terhadap peptida bermutasi hepatitis C yang berlapis
pada mikroplat.
2. Konjugat 2 (R7) : Antibodi berlabel peroksidase tikus kepada IgG manusia dan
peroksidase berlabel streptividin.
3. Prestasi ujian termasuk langkah-langkah reaksi berikut :
4. Konjugat 1 dan sampel ditambahkan dengan kawalan sera untuk di uji pada petak
kolum. Jika antibodi HCV hadir,mereka akan terikat sebagai antigen tetap pada fasa
pepejal dan jika antigen kapsid hepatitis C hadir,antigen ini akan terikat oleh antibodi
monoklonal berlapis pada mikroplat oleh antibodi monoklonal biotinilet terhadap antigen
kapsid hepatitis C (konjugat 1).
5. Selepas pengeraman pada suhu 37°c selama 90 minit dan kaedah
pembasuhan,antibodi peroksidase berlabel IgG manusia dan peroksidase streptividin
(konjugat 2) ditambahkan. Konjugat streptividin peroksidase dengan antibodi
monoklonal biotinilet bertindak balas terhadap antigen hepatits C jika hadir. Konjugat
Anti-IgG manusia bertindak balas kepada peroksidase dan antibodi anti HCV jika hadir.
6. Selepas 30 minit pengeraman pada 37°c,enzim konjugat diasingkan melalui kaedah
pembasuhan dan menunjukkan kompleks antigen-antibodi oleh penambahan substrat.
7. Selepas 30 minit tindak balas akan berhenti,nilai serapannya dibaca dengan
menggunakan spektrofotometer pada 450/620-700nm. Serapan sampel diukur untuk
membolehkan mengesan kehadiran atau tidak hadir antibodi dan kapsid antigen HCV.
66
Warna intensiti berkadar pada kuantitti antibodi atau antigen HCV yang terikat pada fasa
pepejal.
Kaedah :
1. Penerimaan sampel daripada Unit Tabung Darah (UTD)
2. Pastikan nombor beg darah pada tiub dan borang rekod mobile adalah sama. Jika tidak
sama, hantar kembali ke UTD.
3. Isikan borang saringan ujian.
4. Emparkan sampel pada kelajuan 3500 rpm selama 5 minit
5. Keluarkan kit ujian dan biarkan pada suhu bilik.
6. Pastikan tarikh luput dan strip ujian berada dalam keadaan yang baik dalam kit ujian.
7. Pipetkan 100 µl 'conjugate 1 (R6)' ke strip ujian.
8. Seterusnya, tambahkan 50 µl 'control' atau 'sample' ke strip ujian di langkah 7.
9. Eramkan selama 90 minit pada suhu 37 °C di dalam 'incubator'.
10. Selepas pengeraman, cuci strip ujian (rujuk prosedur penggunaan washer PW40).
11. Selepas cucian, tambahkan 100 µl 'conjugate 2 (R7)'.
12. Eramkan selama 30 minit pada suhu 37 °C.
13. Selepas pengeraman, cuci strip ujian (rujuk prosedur penggunaan washer PW40).
14. Selepas cucian, tambahkan 80 µl 'TMB substrate(10 ml R8 + 1 ml R9)'.
15. Eramkan selama 30 minit pada suhu bilik (18°C-30°C) di tempat gelap.
16. Selepas pengeraman, tambahkan 100 µl 'stopping solution'.
17. Baca keputusan ujian pada panjang gelombang 450/620-700 nm (rujuk prosedur
penggunaan mesin PR3100).
18. Sahkan keputusan.
19. Simpan keputusan ujian saringan dalam fail ujian saringan penderma darah.
Interpretasi keputusan :
Sampel dengan ketumpatan optik kurang daripada nilai yang ditolak dianggap negatif oleh
ujian anti-HCV Ag-Ab. Keputusan nilai yang ditolak dibawah hanya (C.O -10% < OD < C.O)
walaubagaimanapun,interpretasi dilakukan dengan berhati-hati (ini kerana adalah lebih baik
67
untuk pengulangan ujian dalam dua salinan sampel yang sepadan apabila sistem serta
prosedur makmal membenarkan. Manakala sampel dengan ketumpatan optik tinggi
daripada,atau sama dengan nilai yang ditolak dianggap pada mulanya positif dan diuji dalam
dua salinan sebelum tafsiran terakhir.
Selepas diuji semula,sampel dianggap positif oleh ujian anti-HCV Ag-Ab jika pengukuran
kedua atau ketiga adalah positif. Tinggi daripada,atau sama dengan nilai yang ditolak,sampel
dianggap negatif jika nilai kedua-dua kurang daripada nilai yang ditolak.
Tajuk ujian : Ujian SD denggi IgG / IgM (BIOLINE)
Ujian cepat SD Bioline Denggi IgG/IgM bentuk pepejal imunokromatografik asai untuk
cepat,kualitatif dan pembezaan mengesan antibodi IgG/IgM kepada virus denggi dalam serum
manusia,plasma atau darah penuh. Ujian ini bertujuan untuk membantu secara profesional
dalam diagnosis andaian antara infeksi denggi primer atau sekunder. Ujian ini hanya
memberikan keputusan pada awal ujian. Oleh itu,penyelesaian untuk virus,antigen dikesan
dalam tissu tetap,RT-PCR dan ujian serologi seperti ujian hemagglutinasi-perencatan,kaedah
diagnosis lebih spesifik hanya digunakan dalam mengesahkan bagi infeksi virus denggi.
Bahan dan radas :
1. Pemungutan sampel.
2. Serum,plasma atau sampel darah penuh mesti digunakan dengan ujian ini.
Darah penuh.
(Pengambilan melalui salur vena).
1. Ambil darah penuh dan simpan dalam tiub (mengandungi tiub berantikoagulan seperti
heparin,EDTA dan sodium sitrat) melalui salur vena.
2. Jika spesimen darah tidak diuji segera,spesimen disimpan di dalam peti sejuk pada
suhu 2-8°C.
68
3. Apabila disimpan pada suhu 2-8°C,spesimen darah penuh boleh digunakan dalam masa
3 hari.
4. Untuk masa penyimpanan lebih daripada 3 hari,pembekuan adalah digalakkan.
Spesimen dibiarkan pada suhu bilik sebelum hendak digunakan.
5. Penggunaan spesimen darah menyimpan dalam jangka masa panjang lebih daripada 3
hari boleh menyebabkan reaksi tidak spesifik.
(Pemungutan menggunakan jarum lanset).
1. Bersihkan kawasan yang hendak ditusuk dengan lanset dengan swab kapas beralkohol.
2. Picit pada hujung jari dan tusukkan dengan lanset steril yang disediakan.
3. Ambil 10µl pipet kapilari yang disediakan,celupkan pada hujungdalm setitik darah
kemudian tekan darah pada pipet kapilari kepada garisan hitam.
serum atau plasma.
(Serum) pengambilan darah penuh dimasukkan ke dalam tiub (TIDAK mengandungi
antikoagulan seperti heparin,EDTA dan sodium sitrat) melalui salur vena,biarkan
selama 30 minit untuk koagulasi darah kemudian emparkan darah untuk
mendapatkan spesimen supernatan serum.
(Plasma) pengambilan darah penuh dimasukkan ke dalam tiub (mengandungi tiub
berantikoagulan seperti heparin,EDTA dan sodium sitrat) melalui salur vena
kemudian empar darah untuk mendapatkan spesimen plasma.
1. Jika spesimen serum atau plasma tidak diuji segera,spesimen boleh diletakkan dalam
peti sejuk pada suhu 2-8°C. Untuk penyimpanan jangka masa panjang lebih daripada 2
minggu,pembekuan digalakkan. Spesimen dibiarkan pada suhu bilik sebelum
digunakan.
69
2. Spesimen serum atau plasma mengandungi mendakan mungkin boleh tidak konsisten
pada hasil ujian.
Prinsip :
Ujian cepat SD Denggi IgG/IgM adalah direka secara serentak mengesan dan membezakan
antibodi IgG dan IgM pada virus denggi dalam serum manusia,plasma atau darah penuh. Ujian
ini juga boleh mengesan semua 4 jenis denggi dengan menggunakan rekombinan protein
denggi. Ujian SD BIOLINE Denggi IgG/IgM terdiri daripada 3 anti garisan,”G” (garisan Ujian
denggi IgG),”M” (garisan Ujian denggi IgM),dan “C”(garisan kawalan) pada atas permukaan
membran. Keputusan boleh dilihat melalui semua ketiga-tiga garisan sebelum memohon mana-
man sampel. “Garisan kawalan” ini digunakan untuk kaedah kontrol. Garisan kawalan selalunya
muncul jika kaedah prosedur ini dilakuan betul dan reagen ujian garisan kawalan berfungsi. “G”
berwarna ungu dan garisan “M” akan dapat dilihat keputusannya jika antibodi IgG dan IgM
dalam sampel cukup untuk virus denggi. Jika antibodi IgG dan IgM tidak hadir di dalam sampel
untuk virus denggi,tidak ada perubahan warna yang akan berlaku dalam “G” atau “M”. Apabila
spesimen ditambahkan ke dalam kolum sampel,anti-denggi IgG dan IgM dalam spesimen akan
bertindak balas dengan rekombinan koloid-protein konjugat emas virus denggi dan bentuk
kompleks antigen-antibodi. Kompleks bertukar panjang dan peranti ujian oleh tindakan capilari.
Anti IgG atau anti IgM manusia akan menjadi relevan dalam dua garisan ujian serta
menghasilkan garisan berwarna.
Kaedah :
1. Terima sampel daripada kaunter
2. Pastikan nama pada tiub dan borang pesanan adalah sama. Jika tidak sama, hantar
kembali ke kaunter
3. Daftarkan maklumat pesakit dan permohonan ujian di LabNet.
4. Emparkan sampel pada kelajuan 3500 rpm selama 5 minit
5. Keluarkan kit ujian dan biarkan pada suhu bilik.
6. Pastikan tarikh luput dan strip ujian berada dalam keadaan yang baik dalam kit ujian.
7. Tambahkan 10 µl serum/plasma ke ruang sampel bertanda "S" di kit ujian.
8. Titiskan 3-4 titik 'diluent' ke ruang bulat di kit ujian.
9. Tafsirkan keputusan ujian dalam 15-20 minit
10. Semak keputusan (rujuk fail pengendalian ujian serologi & kawalan kualiti). Jika
keputusan meragukan, ulangi ujian
70
11. Rekodkan keputusan di LabNet, buku rekod ujian serologi dan borang Per. Pat 301.
12. Sahkan keputusan.
13. Hantarkan keputusan bersama borang Per. Pat. 301 ke kaunter.
Interpretasi ujian :
Negatif (Tidak ada infeksi denggi).
Satu garisan merah jambu “C”.
Positif
1. IgM positif (Infeksi denggi primer).
Dua garisan merah jambu “C” dan “M”.
Jika positif walaupun pada “M” ia adalah lemah.
2. IgG positif (Infeksi denggi sekunder).
Dua garisan merah jambu “C” dan “G”.
Jika positif walaupun pada “G” ia adalah lemah.
3. IgG dan IgM positif (Infeksi denggi primer akhir atau sekunder awal).
Tiga garisan “C”,”M” dan “G”.
Tidak sah.
1. Tidak ada garisan “C” untuk keputsan.
2. Sampel digalakkan untuk diulang dan diuji semula.
71
Tajuk ujian : Ujian RPR Kit.
Antigen karbon RPR digunakan dalam ujian bukan treponemal untuk kualitatif dan separuh
kualitatif mengesan siphilis menggunakan serum (dipanaskan atau tidak dipanaskan) dan
plasma.
Bahan dan radas :
Komposisi kit.
Kandungan piawai kit mungkin berbeza-beza bergantung dengan format yang dibekalkan.
Antigen (2 ml untuk 100 ujian kit,10 ml untuk 500 ujian kit)
Reagen ini sedia untuk digunakan dan dibekalkan dalam 2 ml/10 ml botol yang dihadkan. Masa
hanya dibenarkan untuk antigen mencecah suhu bilik sebelum ujian dan perlu digoncang untuk
memastikan kehomogenan.
Positif/negatif kawalan sera.
Kawalan yang dibekalkan boleh disemak secara berkala untuk kesahihan.
Kawalan yang dibekalkan sedia untuk digunakan.
Penbahagian botol (3ml) dan jarum.
Rekaan kompenen untuk pembahagian ujian antigen RPR. Untuk kegunaan,kepilkan jarum
pada hujung botol dan lakarkan serta GONCANGKAN antigen ke dalam botol. Keluarkan setitis
atau dua titis antigen bagi menyingkirkan kebarangkalian yang tidak mencukupi dalam sampel
kerana kehadiran udara dalam jarum. Ia adalah sangat penting untuk mengekalkan botol dan
jarum dalam kedudukan menegak apabila pendispensan antigen. Pada akhir ujian,jarum yang
telah digunakan mestilah dibuang,dibilas dengan air suling dan dbiarkan kering. Jarum
pendispensan tidak perlu dihapuskan kerana ia boleh mengeluarkan lapisan silikon yang
menyebabkan terdapat sestengah antigen mengikut jarum yang boleh mengakibatkan pada
antigen yang dihantar tidak mencukupi.
72
Kad ujian
Kad ujian ini digunakan dengan suspensi antigen RPR terutamanya penyediaan kad berlapis
plastik. Bulatan kad ujian ini mestilah tidak pernah tersentuh dengan jari,kerana ini mungkin
boleh menyebabkan keputusan ujian tidak sah. Ujian ini hanya boleh digunakan sekali sahaja
dan kad ujian mestilah dibuang.
Pipet stirrers (100 atau 500)
Titis demi titisan serum atau plasma dipindahkan pada permukaan kad ujian dan satu titis
bersamaan kira-kira 50µl. Dalam kualitatif ujian,titisan baru mesti digunakan untuk spesimen
ujian.
Prinsip :
Sifilis adalah penyakit kelamin yang disebabkan oleh mikorganisma spiroket Treponema
pallidum. Organisma ini tidak boleh dikultur pada media tiruan,diagnosis sifilis bergantung pada
kolerasi data klinikal dengan mengesan antibodi spesifik oleh ujian serologi. Ujian VDRL
antigen “Bukan Treponemal” dimana bermaksud antibodi mengesan bukan spesifik T.
Pallidum,walaupun kehadiran kuat menunjukkan infeksi oleh organisma. Langkah-langkah
antibodi (IgG dan IgM) dihasilkan dalam respon material lipoidal yang dibebaskan daripada sel-
sel perumah yang rosak serta lipoprotein seperti material yang dilepaskan oleh spiroket.
Selepas rawatan berjaya antibodi titre akan cepat jatuh.
Ujian penyaringan serologi bagi sifilis menggunakan kardiolipin dan lesitin iaitu antigen
merupakan sampel untuk melakukan tetapi untuk menjalankan boleh membawa sebahagian
kecil keputusan positif palsu kerana seperti yang dinyatakan di atas,ujian menggunakan “Bukan
Treponema” antigen. VDRL Antigen Partikel Karbon yang telah ditukarkan VDRL Antigen
mengandungi mikro-partikular karbon1. Ini adalah rekaan yang digunakan dalam ujian
pengelompokan untuk sero-diagnosis sifilis. Patikel karbon membantu bacaan keputusan
makrokospik. Keputusan reaktif lemah lebih mudah dan senang dikenal untuk corak bukan
reaktif dimana kehadiran makroskopik yang licin dan walaupun antigen ini sesuai untuk kedua-
dua ujian slaid manual serta Ujian Reagen Automasi2.
73
Kaedah :
1. Terima sampel daripada kaunter
2. Pastikan nama pada tiub dan borang pesanan adalah sama. Jika tidak sama, hantar
kembali ke kaunter
3. Daftarkan maklumat pesakit dan permohonan ujian di LabNet.
4. Emparkan sampel pada kelajuan 3500 rpm selama 5 minit
5. Keluarkan kit ujian dan biarkan pada suhu bilik.
6. Pastikan tarikh luput dan strip ujian berada dalam keadaan yang baik dalam kit ujian.
7. Tambahkan 1 titik (gunakan 'dropper') RPR Carbon Antigen pada 50 µl serum/plasma di
kad ujian
8. Putarkan sampel pada kelajuan 100 rpm selama 8 minit
9. Semak keputusan(rujuk fail pengendalian ujian serologi & kawalan kualiti). Jika
keputusan meragukan, ulangi ujian
10. Rekodkan keputusan di LabNet, buku rekod ujian serologi dan borang Per. Pat 301.
11. Sahkan keputusan.
12. Hantarkan keputusan bersama borang Per. Pat 301 ke kaunter.
Interpretasi keputusan :
Pada masa 8 minit pusingan terakhir keputusan positif akan menunjukkan ciri-ciri beragglutinasi
bermula dari sedikit (reaktif lemah) kepada kuat (reaktif kuat). Keputusan reaktif sangat lemah
ciri-cirinya adalah beragglutinasi kecil sekeliiling ujian periferi. Keputusan negatif tidak dapat
menunjukkan reaksi dan menunjukkan kehadiran makroskopik licin. Spesimen positif ujian
mestilah menjadi subjek kepada kajian serologi (seperti TPHA,FTA,dan ABS) setelah prosedur
kajian serologi banyak,diagnosis bagi sifilis mestilah tidak menjadi berubah kepada keputusan
satu reaktif. Untuk kaedah separuh kuantitatif,bacaan keputusan muktamad ujian akhir adalah
positif. Jika larutan ujian meningkat (1:32) ia masih menunjukkan reaktiviti kuat,pelarutan untuk
kali kedua hendaklah diteruskan sehinggalah titik akhir titre dapat ditentukan.
74
Tajuk ujian :ujian TPPA Kit.
Ujian TPPA digunakan untuk mengesahkan jangkitan sifilis setelah didapati positif bagi bakteria
sifilis dengan kaedah lain. Ujian ini mengesan antibodi untuk bakteria yang menyebabkan sifilis
dan boleh digunakan untuk mengesan sifilis disemua peringkat,kecuali pada 3 hingga 4 minggu
pertama.
Bahan dan radas :
Sel ujian : Eritrosit burung dilapisi dengan antigen T.pallidum diawet.
Sel kawalan : Eritrosit burung yang tidak dilapisi dengan antigen yang diawet.
Serum kawaln positif : (Larutkan 1:20). Gunakan secara berhati-hati. Ini akan memberi titre
iaitu bersamaan 1/640:/2560 dalam ujian kuantitatif.
Serum kawalan bukan reaktif: (Larutkan 1:20). Gunakan secara berhati-hati.
Masukkan kit.
Semua reagen yang dibekalkan sedia untu digunakan.
Prinsip :
Ujian treponemal adalah ujian Kromosom Treponema Pallidum zarah (TPPA),(ujian
pengesahan) untuk mengesan serologi antibodi kepada pelbagai spesies dan subspesies
Treponema patogenik,agen penyebab sifilis,puru,pintal,bejel,sifilis endemik. Ujian ini adalah
satu prosedur kromosom pasif yang berasaskan atas menunjukkan pengagglutinasian zarah gel
yang peka dengan antigen T.Pallidum oleh antibodi yang ditemui dalam serum pesakit (1-3).
Ujian ini dicadangkan sebagai ujian pengesahan untuk menggantikan asai mikroagglutinasi bagi
antibodi T.Pallidum (MHA-TP).
75
Kaedah :
1. Terima sampel daripada kaunter
2. Pastikan nama pada tiub dan borang permohonan adalah sama. Jika tidak sama, hantar
kembali ke kaunter
3. Daftarkan maklumat pesakit dan permohonan ujian di LabNet.
4. Emparkan sampel pada kelajuan 3500 rpm selama 5 minit
5. Keluarkan kit ujian dan biarkan pada suhu bilik.
6. Pastikan tarikh luput dan strip ujian berada dalam keadaan yang baik dalam kit ujian.
7. Bahagikan 'microplate' kepada 3 bahagian dengan 4 'wells' setiap bahagian dengan
menggunakan 'marker'.
8. Labelkan 'wells' mengikut spesimen yang hendak diuji.
9. Titiskan 4 titik (100 µl) 'serum diluent' ke 'well' yang pertama, 1 titik (25 µl) ke 'well' yang
kedua, 1 titik (25 µl) ke 'well' yang ketiga dan 1 titik (25 µl) ke 'well' yang keempat
dengan menggunakan penitik.
10. Pipetkan 25 µl serum pesakit ke 'well' yang pertamadi langkah 9.
11. Lakukan pencairan bersiri dan pipet keluar 25 µl daripada 'well' yang keempat.
12. Titiskan 1 titik (25 µl) 'unsensitized particles' ke 'well' yang ketiga dan 1 titik (25 µl)
'sensitized particles' ke 'well' yang keempat.
13. Sebatikan campuran dengan diletakkan pada 'mixer' pada 1000 rpm selama 5 saat.
14. Eramkan pada suhu bilik selama 2 jam.
15. Semak keputusan. (rujuk fail pengendalian ujian serologi & kawalan kualiti). Jika
keputusan meragukan, ulangi ujian
16. Rekodkan keputusan di LabNet, buku rekod ujian serologi , borang ujian TPPA dan
borang Per. Pat 301.
17. Sahkan keputusan.
18. Hantarkan keputusan bersama borang Per. Pat. 301 ke kaunter.
76
Interpretasi keputusan :
Interpretasi kekerapan agglutinasi.
Kekerapan partikel Bacaaan Interpretasi
Partikel konsentrasi dalam bentuk seperti ‘button’
pada tengah bekas dengan sekeliling tepi yang
lembut atau licin. _ Tidak reaktif
Partikel konsentrasi dalam bentuk cecincin padat
dengan ‘lubang’ dalam sangat kecil pada tengah
bekas dengan sekeliling tepi yang lembut atau licin. _ Tidak reaktif
Partikel konsentrasi dalam bentuk cecincin padat
dengan ‘lubang’ pada tengah dan licin disekeliling
tepi. ± Tiada
kesimpulan
Partikel cecincin besar dengan bentuk multi kasar
diluar tepi dan agglutinasi periperal,dikelilingi oleh
bulatan merah kecil. 1+ Reaktif
Partikel agglutinasi merebak keluar menyeluruh
menyelaputi bawah bekas,dikelilingi oleh bulatan
merah kecil. 2+ Reaktif
Partikel yang licin menutupi atau menyelaputi kurang
daripada seluruh bawah bekas dan mungkin
dikelilingi oleh cecincin warna pucat. 3+ Reaktif
Partikel yang licin menyelaputi seluruh bawah bekas.
4+ Reaktif
77
MAKMAL
IMUNOKIMIA
78
PENGENALAN
Makmal immunoassay di dalam unit patologi ini biasanya digunakan untuk menentukan
fungsi tiroid dan ujian-ujian biokimia yang selain daripada yang di lakukan di dalam makmal
biokimia. Ianya kerana ujian ini memerlukan mesin yang mampu beroperasi terhadap zarah-
zarah yang kecil daripada ujian biokimia yang biasa. Oleh itu, mesin yang lebih spesifik
digunakan bagi menjalankan ujian ini.
Apa yang dimaksudkan ialah ujian pengesanan hormon yang dilakukan untuk
menentukan samada pesakit berada dalam keadaan normal atau tidak
Oleh kerana ujian ini jarang menerima sampel setiap hari, ianya dilakukan secara berkala iaitu
pada hari Isnin, Rabu dan Jumaat sahaja.
Antaranya ujian-ujian yang dilakukan dalam makmal ini ialah ujian AFP, CEA, ESTROGEN,
FERRITIN, FT4, FSH, BHCG, LH, PRL, PROGESTERONE, TOTAL PSA, dan TSH
79
MAKMAL IMMUNOASSAY
80
Jalpa LojuinJTMP U32
Raja Saidatul NadiaPSKH (Kimia Hayat) C41
Freda JustinJTMP U29
Hjh. NoriahJTMP U32
Siti Norlia SaihinJTMP U29
TAJUK UJIAN :
Ujian pengesan tahap AFP, CEA, ESTROGEN, FERRITIN, FT4, FSH, BHCG, LH, PRL, PROGESTERONE, TOTAL PSA, dan TSH
PROSEDUR MAKMAL
1. Terima dan semak borang permintaan ujian. Pastikan sampel dan borang yang diterima memenuhi kriteria. Tolak permohonan ujian jika sampel tidak memenuhi kriteria.
2. Rekodkan pendaftaran pada sistem LabNet.3. Empar sampel pada 4000rpm selama 5 minit4. ‘Order Sample’ pada mesin dilakukan seperti tatacara berikut
a. Pergi ke ‘Workplace’ dan pilih ‘Test Selection’b. Masukkan nombor rak, nombor posisi dan sampel IDc. Sila pilih ujian yang dipohon dan klik ‘Save’d. Masukkan sampel di bahagian ‘Rack Sampler’ dan klik perkataan ‘Start’e. Tunggu sehingga bacaan keputusan dipaparkan
5. Periksa keputusan ujian dan jika didapati keputusannya melebihi julat normal, ulang semula ujian dengan pencairan yang ditetapkan(seperti ujian BHCG, TPSA, Ferritin, dan CEA)
6. Cetak keputusan pada borang7. Rekodkan keputusan pada sistem LabNet dan buku rekod8. Semak keputusan ujian9. Pastikan ujain dijalankan dengan bacaan kawalan kualiti terbaik10. Pastikan keputusan ujian yang dihasilkan dapat menepati diagnosis yang diberikan
doktor11. Rujuk semula doktor yang memohon ujian jika diagnosis yang diberi meragukan dan
tidak menyokong keputusan ujian yang diperolehi12. Ulang semula ujian jika perlu13. Sahkan keputusan dengan menurunkan tandatangan dan cop rasmi pegawai yang
bertanggungjawab.
81
PRINSIP UJIAN
UJIAN TSH
- Thyroid-stimulating hormone (juga dikenali sebagai TSH atau thyrotropin) yang merupakan hormon yang menyebabkan kelenjar tiroid untuk merembeskan thyroxine(T4) dan triiodothyronine(T3). Dimana ianya akan menstimulasikan metabolism hampir setiap tisu yang terdapat di dalam badan.
Sumber patolog5TSH
level
Level
hormon
tiroid
Penyakit yang disebabkan oleh keadaan
Hypothalamus/pituitary Tinggi Tinggi Adenoma atau thyroid hormone resistance
Hypothalamus/pituitary Rendah Rendah Hypopituitarism
Thyroid Rendah Tinggi Hyperthyroidism atau Graves' disease
Thyroid Tinggi Rendah
Congenital
hypothyroidism (cretinism), hypothyroidism atau Hashimoto's
thyroiditis
UJIAN AFP
- Alpha-Fetal Protein, merupakan aprotein yang terdapat dalam badan manusia yang dikodkan
oleh gen AFP. AFP juga merupakan major plasma protein yang dihasilkan di kantung yolka dan
hati ketika pembesaran fetal.
UJIAN CEA
- Carcinoembryonic antigen (CEA) merupakan glikoprotein yang terlibat dalam pelekatan sel. Ianya biasa dihasilkan semasa tumbesaran fetal, akan tetapi penghasilannya akan berhenti sebelum kelahiran bayi.
82
UJIAN IRON FERRITIN
- Ferritin merupakan protein intrasellular yang menyimpan iron dan melepaskannya dalam keadaan terkawal. Jumlah ferritin yang disimpan adalah bersamaan dengan jumlah iron yang disimpan. Protein ini dihasilkan oleh semua organisma hidup.
UJIAN PROLACTIN
- Merupakan sejenis hormon peptida yang berfungsi sebagai sitokin dan memainkan peranan penting dalam tindak balas imun.
UJIAN PROGESTERONE
- Merupakan hormon steroid yang terlibat dalam kitaran haid, pregnansi dan pembentukan embryo bayi manusia dan juga spesies-spesies lain.
UJIAN ESTROGEN
- Merupakan hormon seksual yang terlibat dalam menghasilkan sel-sel gamet di dalam sistem reproduktif. Berikut merupakan tahap estrogen :
-
I
UJIAN TOTAL PSA
83
Reference ranges for serum estradiol
Patient type Lower limit Upper limit Unit
Adult male
50 200 pmol/L
14 55 pg/mL
Adult female ( follicular phase , day 5)
7095% PI (standard )
50095% PI
pmol/L
11090% PI (used in diagram )
22090% PI
19 (95% PI) 140 (95% PI)
pg/mL
30 (90% PI) 60 (90% PI)
Adult female ( preovulatory peak)
400 1500 pmol/L
110 410 pg/mL
Adult female( luteal phase )
70 600 pmol/L
19 160 pg/mL
Adult female - free(not protein bound)
0.5 9 pg/mL
1.7 33 pmol/L
Post-menopausal female
N/A < 130 pmol/L
N/A < 35 pg/mL
- Merupakan glikoprotein didalam badan manusia yang dikodkan oleh gen kallikrein-3 (KLK3). KLK3 ialah salah satu bahagian kallikrein yang berkait dengan peptidase yang dirembeskan oleh sel epithelial di dalam kelenjar prostat.
ALAT RADAS
- Cobas e 411
84
MAKMAL
BIOKIMIA
PENGENALAN
Dalam makmal biokimia di Hospital Nukleus Labuan terbahagi kepada dua iaitu makmal
biokimia dan makmal immunoassay. Kaunter penerimaan spesimen di makmal ini terbahagi
kepada dua iaitu kaunter wad dan kaunter untuk pesakit luar terutamanya dari KP1 (Klinik
Pakar 1), KP2 (Klinik Pakar 2) dan KP3 (Klinik Pakar 3). Di kaunter wad, spesimen yang
diterima adalah dari semua bahagian wad yang terdapat di dalam Hospital Nukleus Labuan dan
dari OPD (Out Patent Department) serta beberapa lagi dari Klinik lain. Spesimen yang telah
diterma dari kaunter akan diasingkan mengikut bahagian – bahagian tertentu. Dalam makmal
biokimia ia menjalankan beberapa jenis ujian seperti ujian Alanine Transferase (ALT), ujian
Alkaline Phosphate (ALP), ujian Aspartate Transferase (AST), ujian Amylase, ujian Creatinine
Kinase (CK), ujian Lactate Dehydrogenase (LDH), ujian total protein, ujian Albumin, ujian
Globulin, ujian Bilirubin, ujian Kalcium, ujian Kolesterol, ujian Elektrolit (Na+, K+, Cl-), ujian
85
Glukosa, ujian Iron, ujian Fosfat, ujian Urea, ujian Urik asid,ujian Lipid Profil, ujian Liver
Function Test (LFT), ujian High Density Lipoprotein (HDL), ujian Low Density Lipoprotein (LDL),
ujian Serum Trigliserida dan ujian Magnesium. Semua ujian ini dijalankan dalam satu mesin
iaitu menggunakan mesin ARCHITECTplus c4000. Ujian HbA1C juga dijalankan dalam makmal
ini dan menggunakan mesin yang sama tetapi hanya kaki tangan makmal saja yang melakukan
ujian HbA1C kerana ia memerlukan proses kerja yang lama dan berhati – hati. Selain ujian di
atas, terdapat juga ujian Baby’s Bilirubin yang dijalankan pada mesin bilirubinometer khas bagi
baby yang baru lahir. Terdapat juga ujian Blood Gases (ABG) yang dilakukan dalam makmal
biokimia menggunakan mesin Cobas b221 yang dilakukan oleh kaki tangan makmal sahaja.
MAKMAL BIOKIMIA KLINIKAL
86
Jalpa LojuinJTMP U32
Raja Saidatul NadiaPSKH (Kimia Hayat) C41
Freda JustinJTMP U29
Hjh. NoriahJTMP U29
Siti Norlia SaihinJTMP U29
Tajuk Ujian : Ujian Alanine Transferase (ALT).
Alanine Transferase merupakan satu ujian yang mengukur jumlah enzim di dalam darah. ALT
banyak terdapat terutamanya di dalam hati,dan jumlah kecil juga boleh di dapati dalam buah
pinggang,jantung,otot serta pankreas. Sebelum ini,ALT disebut sebagai serum glutamik piruvik
transaminase (SGPT). ALT diukur untuk memastikan samada fungsi hati telah rosak atau
berpenyakit. Tahap rendah ukuran ALT biasanya diketahui di dalam darah. Tetapi,apabila
fungsi hati rosak atau berpenyakit,ia akan membebaskan ALT ke dalam aliran darah yang
menjadikan tahap ukuran bagi ALT meningkat. Kebanyakkan penigkatan dalam tahap ALT
adalah disebabkan oleh berlakunya kerosakkan pada hati. Ujian ALT yang dilakukan beserta
dengan ujian-ujian lain yang memeriksa kerosakkan hati,termasuklah Aspartat
Aminotransferase (AST),Fosfatase alkali,Laktat dehidrogenase (LDH),dan bilirubin. Tahap
kedua-dua ALT dan AST adalah ujian yang boleh dipercayai untuk kerosakn hati.
87
Bahan dan Radas :
I. Pengempar.
II. Mikropipet.
III. Mesin ARCHITECT c4000.
IV. Rek.
V. Cup ARCHITECT.
Reagen :
I. B – NADH.
II. Laktat Dehidrogenase.
III. L – Alanin.
IV. a – Ketoglutarik Asid.
Sampel :
I. Serum .
Prinsip :
ALT merupakan enzim yang dijumpai terutamanya pada sel hati dan dalam kuantiti yang sedikit
dalam buah pinggang, jantung dan otot rangka. Ia selalunya digunakan bersama – sama AST
bagi mengukur fungsi hati dan mendiagnos penyakit yang berkaitan dengan hati.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
88
Prosedur :
I. Serum pesakit di ambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup di masukkan ke dalam rek dan nombor rak diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y101’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya ALT, setelah itu tekan ‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan ke dalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit dikeluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
ALT : 0 – 55
Tajuk Ujian : Alkaline Phosphatase (ALP).
Fosfatase alkalin manusia terdiri daripada sekurang-kurangnya 5 kumpulan isoenzim
khusus,tisu yang menjadi pemangkin hidrolisis fosfat mono-ester pada pH alkali. Pelbagai
proses penyakit boleh menyebabkan pengeluaran kuantiti yang meningkatkan fosfatase alkali
ke dalam darah.
Bahan dan Radas :
89
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. 2 – Amino – 2 – methilpropanal
II. Magnesium
III. Zink Sulfat
IV. HEDTA
V. 4 – Nitrophenil Fosfat
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Alkalin Fosfatase merupakan enzim yang terdapat dalam hati, salur hempedu dan tulang. Paras
ALP yang tinggi ditemui pada kanak – kanak, penyakit hati, penyumbatan hempedu dan
kegagalan tulang.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan besertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
90
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit di ambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan ke dalam rek dan nombor rak diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y102’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya ALP, setelah itu tekan ‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
ALP : 40 – 150 U/L
Tajuk ujian : Aspartat Transferase (AST).
Aspartat transferase (AST) juga dikenali sebagai aspartat aminotransferase
(AspAT/asat/Appeals) atau serum glutamik oxaloasetik transaminase (SGOT),fosofat piridoxal
(PLP) yang bergantung kepada transaminise enzim. AST menjadi pemangkin pemindahan
berbalik kumpulan α-amino antara aspartat dan glutamat serta merupakan enzim penting dalam
metabolisme asid amino. AST terdapat di dalam hati,jantung,otak rangka,buah pinggang,otak
dan sel-sel darah merah. Biasanya diukur secara klinikal sebagia penanda untuk kesihatan hati.
91
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. B – NADH
II. Malate Dehydrogenase
III. Lactate Dehydrogenase
IV. L – Aspartate
V. a – Ketoglutarate
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
AST merupakan enzim yang boleh ditemui terutamanya pada hati, jantung dan otot
rangka. Enzim ini terhasil apabila sel – sel tercedera dan meningkat mengikut tahap
kerosakkan.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
92
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit di ambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan kedalam rek dan nombor rek diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y008’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya AST, setelah itu tekan ‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
AST : 5 – 40 U/L
Tajuk Ujian : Amilase.
Amilase merupakan satu enzim yang membantu dalam pencernaan karbohidrat. Ia dihasilkan di
dalam pankreas dan kelenjar yang menghasilkan air liur. Apabila pankreas dijangkiti atau
terdapat inflamasi,enzim amilase akan dirembes masuk ke dalam darah. Ujian ini juga boleh
dilakukan untuk mengukur tahap enzim di dalam darah serta boleh diukur dengan
menggunakan ujian urin.
93
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. 2 – Chloro – 4 – Nitrophenyl – a – D – Maltotrioside
II. Sodium Chloride
III. Calcium Acetate
IV. Potassium Thiocyanate
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Amilase merupakan enzim yang dihasilkan terutamanya oleh kelenjar air liur dan pancreas
(satu organ yang terletak di belakang perut) yang membantu dalam memecahkan karbohidrat
dan kanji yang kita makan kepada gula ringkas. Ini adalah penting kerana gula ringkas akhirnya
ditukar kepada glukosa. Ujian amilase bertujuan untuk mengukur amilase dalam darah. Amilase
biasanya hadir dalam darah dengan jumlah yang kecil. Walaubagaimanapun jumlah
peningkatan boleh dilepaskan ke dalam darah apabila pancreas mengalami kecederaan atau
disekat.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
94
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit di ambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan kedalam rek dan nombor rak diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y109’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya Amy (amylase), setelah itu tekan
‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
Amilase : 20 – 160 U/L
Tajuk Ujian : Kreatinin Kinase (CK).
Kreatinin Kinase (CK,CPK) adalah satu enzim yang dijumpai terutamanya di dalam hati dan oto-
otot rangka dan sehingga ke tahap yang lebih rendah di dalam otak. Kecederaan yang ketara
95
kepada mana-mana struktur-struktur ini akan membawa kepada peningkatan yang diukur dalam
tahap CK.
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. CK (Creatinine Kinase)
II. CPK (Creatine Phosphoskinase)
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Kreatinin merupakan bahan buangan yang dihasilkan di otot rangka dan dikumuhkan melalui
ginjal. Ia merupakan ujian yang khusus bagi fungsi ginjal dan selalunya diukur bersama – sama
urea untuk menentukan fungsi ginjal. Arasnya akan meningkat apabila terdapat kerosakan pada
tisu – tisu ginjal.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
96
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit di ambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan ke dalam rek dan nombor rak diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y010’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya CK, setelah itu tekan ‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
Kreatinin Kinase (CK) : Lelaki 30 – 200 U/L
Perempuan 29 – 168 U/
Tajuk Ujian : Laktat dehidrogenase (LDH).
Dehidrogenase laktat juga dipanggil sebagai laktik dehidrogenase,atau LDH. Merupakan enzim
yang terdapat dalam hampir semua tisu dalam tubuh. Ia memainkan peranan penting dalam
respirasi sel,proses glukosa (gula) daripada makanan yang ditukarkan kepada tenaga
digunakan untuk sel-sel kita. Walaupun LDH banyak terdapat dalam sel-sel tisu,tahap enzim
97
darah biasanya adalah rendah. Apabila tisu rosak oleh kecederaan atau penyakit,ia akan
mengeluarkan peningkatan LDH dalam darah termasuk penyakit hati,serangan
jantung,anemia,trauma otot,keretakkan tulang,barah dan jangkitan seperti meningitis,ensefalitis
serta HIV.
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. Diethanolamin
II. L - Litium Laktat
III. B – NAD
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Dehidrogenase laktat adalah enzim hidrogen pemindahan yang katales pengoksidaan L-
laktat piruvat dengan pengantaraan NAD+ sebagai hidrogen.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan permohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
98
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit diambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup di masukkan ke dalam rek dan nombor rak diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y106’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya LDH, setelah itu tekan ‘ADD
ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian:
Julat Normal :
LDH : 125 – 243 U/L
Tajuk Ujian : Protein (Albumin & Globulin).
Ujian total protein adalah mengukur jumlah dua jenis protein yang terdapat dalam bahagian
cecair darah iaitu albumin dan globulin. Protein adalah bahagian penting dalam semua sel-sel
dan tisu. Sebagai contoh,albumin membantu mencegah cecair dari dirembeskan keluar dari
saluran darah. Globulin merupakan sebahagian penting dalam sistem imun tubuh.
Bahan dan radas :
I. Pengempar
99
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. Sodium Potassium Tartrat
II. Sodium Hidrosida
III. Potassium Iodid
IV. Copper Sulfate
V. Bromcresol Purple
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Albumin dan globulin merupakan protein utama dalam darah. Albumin dibentuk di hati dan 50 –
60% secara keseluruhan protin di dalam serum. Kedua – dua albumin dan globulin berguna
untuk mengukur status pemakanan seseorang individu. Kedua – duanya juga berguna untuk
mendiagnos penyakit hati, gastrointestinal, buah pinggang, ketaknormalan protein, kanser dan
kegagalan sel darah. Peningkatan paras globulin boleh disebabkan inflamasi dan infeksi yang
kronik.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plen tiub) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
100
Prosedur :
I. Serum pesakit diambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup di masukkan kedalam rek dan nombor rak diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y100’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya pro (protein), Alb (albumin) dan Glo
(globulin), setelah itu tekan ‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
Total protein : 64 – 87 g/L
Albumin dan Globulin : 35 – 50 g/L
Tajuk Ujian : Bilirubin (Total bilirubin dan Direct Bilirubin).
Pigmen yang dihasilkan oleh hati yang akan dikeluarkan dalam hempedu yang menyebabkan
perubahan warna kuning kulit dan mata apabila ia terkumpul di dalam organ-organ. Tahap
bilirubin boleh diukur oleh ujian darah dan paling kerap tinggi pada pesakit yang menghidap
penyakit hati atau tersumbat aliran hempedu.
101
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. Surfaktan
II. HCI
III. 2, 4 – dikloroanilin
IV. Sodium Nitrit
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Bilirubin merupakan pigmen kekuningan dalam hempedu. Ianya dibentuk hasil daripada
pemecahan haemoglobin dalam sel darah merah dan diubah secara kimia oleh hati seterusnya
dirembes sebagai hempedu. Peningkatan paras bilirubin boleh diakibatkan oleh hati, hempedu
atau kegagalan SDM dan secara klinikal mengakibatkan jaundice.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
102
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit di ambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan kedalam rek dan nombor rek diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y009’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya TBIL (total bilirubin) dan DBIL (direct
bilirubin), setelah itu tekan ‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
Total Bilirubin : 3.4 – 20.5 umol/L
Direct Bilirubin : 0 – 8.6 umol/L
Tajuk Ujian : Bilirubin bayi (Baby’s bilirubin).
103
Satu ujian bilirubin mengukur jumlah bilirubin dalam sampel darah. Bilirubin adalah bahan yang
berwarna kuning keperangan yang dijumpai dalam hempedu. Ia dihasilkan apabila hati
rosak,sel-sel darah merah yang lama. Bilirubin kemudian dikeluarkan daripada badan melalui
feses (najis) dan memberikan feses warna coklat yang biasa.
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ‘REICHERT UNISTAT’ BILIRUBINOMETER’
IV. Kuvet
Reagen :
I. Kontrol mesin ‘352’
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Bilirubin meter diagnostik dilakukan secara in vitro digunakan untuk menentukan jumlah
kepekatan bilirubin pada bayi yang baru lahir dengan ciri – ciri optik.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
104
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Buka penutup dan masukkan kontrol mesin ‘352’.
II. Tekan ‘START’
III. Tunggu sehingga bacaan keluar pada skrin ‘352’, sekiranya bacaan yang keluar tidak
sama, keluarkan kontrol mesin dan ulang semula sehinggalah bacaan kontrol mesin
sama dengan kontrol ‘352’ keluar.
IV. Ambil sampel serum bayi dan masukkan ke dalam kuvet baru menggunakan mikropipet.
V. Masukkan kuvet sampel tadi ke dalam mesin.
VI. Tekan ‘START’
VII. Tunggu sehingga bacaan keluar pada skrin mesin.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan di ambil dan direkodkan kedalam ‘LabNet’.
Interpretasi ujian:
Julat Normal :
Baby’s bilirubin : <256.5 umol/L
Tajuk Ujian : Kalsium dan Fosfatase.
Kalsium adalah mineral yang paling banyak di dalam badan. Ia adalah penting untuk
pemmbangunan dan penyelenggaraan tulang dan gigi yang kuat. Kalsium juga membantu
jantung,saraf,otot dan lain-lain system badan berfungsi dengan betul. Ia mungkin lebih dikenali
untuk membantu mencegah osteoporosis. Lasium diserap dan digunakan dengan
betul,termasuk magnesium,fosforus dan terutamanya vitamin D dan K.
105
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. Calcium Phosphatase
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Kalsium dan Phosphorus merupakan ujian yang berguna bagi mendiagnos ginjal dan
penyakit tulang (skeletal diseases). Arasnya bertentangan antara satu sama lain dan dikawal
oleh hormone paratirod.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
106
Prosedur :
I. Serum pesakit diambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan ke dalam rek dan nombor rek diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y113’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya Cac (calcium) dan po4 (phosphate),
setelah itu tekan ‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian:
Julat Normal :
Calcium : 2.10 – 2.55 mmol/L
Phosphate : 0.74 – 1.52 mmol/L
Tajuk Ujian : Kolesterol (Total)
Ujian kolestrol juga dikenali sebagai profil lipid iaitu ujian darah yang boleh mengukur jumlah
kolesterol dan trigliserida dalam darah. Satu ujian kolesterol boleh membantu menentukan
risiko aterosklerosis,penumpukan plak dalam arteri yang boleh membawa kepada arteri yang
sempit atau terhalang di dalam seluruh tubuh. Paras kolesterol yang tinggi biasanya tidak
menyebabkan tanda-tanda atau gejala tetapi adalah risiko untuk penyakit jantung yang ketara.
107
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. 4-Aminoantipirin
II. Sodium kolat
III. Kolesterol esterase
IV. Kolesterol osidase
V. Horseradish peroksidase
VI. ρ-Hidroxybenzene sulfonate
VII. Surfaktan
VIII. Buffer
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Kolesterol darah diangkut dalam bentuk protein kompleks terutamanya oleh LDL, VLDL dan
HDL –Kolesterol. Aras kolesterol darah menentukan kebarangkalian seseorang itu menghidap
‘cardiovascular diasease’ dan juga berguna untuk menilai fungsi hati dan thyroid. Total
kolesterol merupakan komponen penting struktur sel membran, hormon steroid dan garam
hempedu. Walaubagaimanapun, peningkatannya boleh mengakibatkan penimbunan pada
dinding salur darah arteri yang boleh menyebabkan penyempitan dan penyumbatan pada salur
darah (artherosclerosis).
108
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan besertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tiub) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit diambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup di masukkan kedalam rek dan nombor rak diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y019’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya Chol (kolesterol), setelah itu tekan
‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian:
Julat Normal :
Kolesterol : 0 – 5.7 mmol/L
109
Tajuk Ujian : Elektrolit (Na + ,K + ,CI)
Elektrolit adalah bahan yang menjadi ion dalam larutan dan memperoleh keupayaan untuk
mengalir elektrik. Elektrolit hadir di dalam tubuh manusia,dan kesimbangan elektrolit di dalam
badan kita adalah penting untuk fungsi normal sel-sel dan organ-organ kita. Elektrolit biasanya
diukur melalui ujian darah termasuk natrium,kalium,klorida,dan bikarbonat. Fungsi dan nilai julat
normal bagi elektrolit-elektrolit ini adalah seperti yang dinyatakan dibawah.
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. Sodium
II. Potassium
III. Klorida
IV. Buffer
V. Clearning fluid
VI. Sodium Azide
VII. Lyophilized cleaning solution
VIII. Prozymo 10
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
110
Aras elektrolit darah mempengaruhi penyerapan dan keseimbangan air dalam tubuh. Berbagai-
bagai keadaan klinikal yang dapat mempengaruhi arasnya dalam tubuh seperti penyakit buah
pinggang, cirit-birit (diarrhoea), kegagalan gastrointestinal, ubat-ubat tertentu contohnya dadah
hipertensi, infeksi yang teruk atau kecederaan dan juga sesetengah ketaknormalan horman.
Elektrolit merupakan komponen yang penting dalam cecair tubuh dan keseimbangannya
membolehkan berbagai sel dan organ berfungsi dengan normal.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan besertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit
Prosedur :
I. Serum pesakit diambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan ke dalam rek dan nombor rek diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y111’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya Na (sodium), K (potassium) dan Cl
(creatinine), setelah itu tekan ‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
111
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
Sodium : 138 – 145 mmol/L
Potassium : 3.5 – 5.1 mmol/L
Kreatinin : Lelaki 63.6 – 110.5 mmol/L
Perempuan 50.4 – 98.1 mmol/L
Tajuk Ujian : Glukosa.
Glukosa adalah sejenis gula yang mudah (monosakarida 1). Badan mengeluarkan daripada
protein,lemak dan karbohidrat dimana ia merupakan sebahagian yang terbesar,glukosa diserap
terus ke dalam darah dari usus dan menyebabkan peningkatan yang cepat dalam glukosa
darah. Glukosa juga dikenali sebagai dextrose. Glukosa dibawa melalui saluran darah untuk
member tenaga kepada semua sel-sel badan. Sel-sel tidak boleh menggunakan glukosa tanpa
bantuan insulin.
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. NAD
II. G – 6 – PDH
112
III. Heksokinase
IV. ATP – 2Na
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Aras glukos dalam darah mengesan perubahan dalam metabolisma glukosa. Kebiasaannya
digunakan untuk mengdiagnos diabetes mellitus atau bagi menilai tahap pengawalan glukosa.
Perubahan arasnya dalam darah bergantung kepada aktiviti individu dan juga jangkamasa
selepas makan. Aras glukos (dalam keadaan puasa) digunakan sebagai pengukuran baseline.
Aras postprandial (pengukuran selepas 2 jam pengambilan makanan), ujian penyaringan untuk
diabetes dan kerapkali digunakan bagi menilai keberkesanan rerapi insulin.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan besertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plen tiub) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit di ambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan ke dalam rek dan nombor rek diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
113
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y021’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya Gluc (glucose), setelah itu tekan
‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
Fasting (FBS) : 3.80 – 5.90 mmol/L
Random (RBS) : 5.0 – 10.0 mmol/L
2HPP : 6.7 – 8.0 mmol/L
Tajuk Ujian : Urea.
Urea jugs dipanggil sebagai karbamida,sebatian kimia organik dan pada dasarnya adalah sisa
yang dihasilkan oleh tubuh selepas metabolisme protein. Secara am nya,sebatian yang terhasil
apabila hati rosak protein atau asid amino dan ammonia,buah pinggang kemudian akan
memindahkan urea daripada darah air kencing. Nitrogen tambahan dibuang dari badan melalui
urea dan kerana ia adalah sangat larut maka ia merupakan satu proses yang sangat cepat.
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
114
Reagen :
I. NADH
II. α-Ketoglutaric Acid
III. urease (jack bean)
IV. GLD (Beef liver)
V. Adenosine Diphosphate
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Urea merupakan hasil akhir metabolisme protein dan asid amino. Ia mengukur fungsi ginjal dan
hidrasi. Walaubagaimanapun, ianya tidak boleh digunakan secara bersendirian bagi penentuan
fungsi ginjal (hanya untuk ujian penyaringan sahaja). Peningkatan aras urea boleh berlaku pada
individu yang mengambil diet kaya protein.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan besertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
115
Prosedur :
I. Serum pesakit diambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan kedalam rek dan nombor rek diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y011’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya urea, setelah itu tekan ‘ADD
ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
Urea : 1.7 – 8.3 mmol/L
Tajuk Ujian : Urik Asid.
Serum asid uric adalah ukuran berapa banyak asid urik yang hadir dalam darah. Ini biasanya
dinilai semasa ‘bloodwork’ rutin,dimana beberapa nilai-nilai untuk pelbagai sebatian dalam
darah ditentukan untuk member penerangan tentang keadaan kesihatan pesakit. Sebatian ini
dihasilkan sebagai hasil sampingan pemecahan sebatian yang dikenali sebagai purin. Purin
didapati dalam produk haiwan seperti daging,makanan laut,hati dan ia adalah sebahagian diet
biasa. Asid uric yang dihasilkan oleh metabolisme makanan yang dinyatakan dalam air kencing
116
melalui buah pinggang. Paras yang sangat rendah dikenali sebagai hipouriksemia serta
peringkat paras tinggi dikenali sebagai hiperuriksemia.
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. 4 – Aminoantipyrine
II. TBHB
III. Urikase
IV. Perosidase
V. TRIS Buffer
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Urik asid merupakan hasil akhir metabolisma urin pada manusia. Ianya disentisisdi hati dan
diangkut melalui darah ke ginjal untuk dituras, sebahagiannya akan diserap, dirembes dan
akhirnya di keluarkan melalui urin. Asid urik larut sedikit di dalam air dan kristal urea terbentuk
secara semulajadi dalam urin yang mempunyai kepekatan urea yang tinggi bagi membentuk
batu karang dalam ginjal (urea kidney stone). Gout merupakan sindrom klinikal bagi pesakit
yang menghidap asid urik yang tinggi dalam darah dan mengakibatkan penimbunan kristal urea
pada tisu lembut, terutamanya pada sendi mengakibatkan respon inflamasi. Arasnya dalam
serum darah juga dipengaruhi oleh jumlah asid urik yang dihasilkan dan kecekapan eksresi
117
ginjal. Pesakit yang mengalami paras asid urik yang tinggi. hendaklah mengambil diet rendah
purina. Makanan yang tinggi kandungan purina ialah organ dalaman, ligmen, anchovies,
cendawan dan yis.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit diambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan kedalam rek dan nombor rek diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y015’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya uric, setelah itu tekan ‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
118
Urik Asid : Lelaki 210 – 420 umol/L
Perempuan 150 – 350 umol/L
Tajuk Ujian : High Density Lipid (HDL).
HDL atau lipoprotein berketumpatan tinggi,biasanya dikenali sebagai ‘kolesterol yang baik’.
Tahap HDL di dalam badan sepatutnya menjadi agak tinggi dan diperolehi dengan menjalankan
ujian darah yang mudah. HDL membantu kolesterol yang berlebihan masuk semula ke dalam
hati untuk perkumuhan melalui sistem gastrousus. HDL dikenali sebagai kolesterol baik kerana
ia membantu dalam penyingkiran kolesterol yang boleh menyekat arteri dan mengurangkan
aliran darah.
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. Kolesterol Oksidase (E.Coli)
II. Peroksidase (Horseradish)
III. N,N-bis (4-sulphobutyl)-m-toluidine-sodium (DsBmT)
IV. Accelerator
V. Ascorbic oxidase (Curabita Sp.)
Sampel :
I. Serum
119
Prinsip :
HDL kolesterol juga dikenali sebagai kolesterol yang baik yang berfungsi sebagai pengangkut
bagi mengeluarkan kolesterol yang berlebihan dari sel. Nilainya boleh meningkat dengan
melakukan senaman.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan besertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plen tiub) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit di ambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup di masukkan kedalam rek dan nombor rak diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y114’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya HDL, setelah itu tekan ‘ADD
ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
120
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
HDL : 0.9 – 1.7 mmol/L
Tajuk Ujian : Low Density Lipid (LDL).
LDL adalah kolesterol lipoprotein berkepadatan rendah biasanya dikenali sebagai kolesterol
‘jahat’. Ujian LDL adalah merupakan ujian yang pertama dalam menentukan samaada seorang
individu adalah berisiko untuk penyakit jantung atau tidak dan tahap LDL kerap menjadi punca
utama dalam diet merendahkan kolesterol serta tahap LDL tinggi juga sering dikaitkan dengan
peningkatan dalam risiko penyakit jantung.
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. Diethanolamine
II. L-Lactate,Lithium salt
121
III. Sodium Azide
IV. β-NAD
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
LDL kolesterol dikenali sebagai kolesterol yang tidak baik dimana kolesterol yang berlebihan
akan diangkut oleh LDL ke dinding arteri dan mengakibatkan (artherosclerosis).
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit diambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan kedalam rek dan nombor rek diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y101’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
122
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya LDL, setelah itu tekan ‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
LDL : <2.9 ***invalid value if Trig >3.80 mmol/L
Tajuk Ujian : Triglyceride (TG).
Trigliserida adalah sejenis lemak dalam aliran darah dan tisu lemak. Lemak jenis ini boleh
menyumbang kepada pengerasan dan penyempitan arteri dan menyebabkan risiko untuk
serangan jantung serta strok adalah sangat tinggi. Penyakit yang boleh menyebabkan
trigliserida tinggi juga adalah penyakit seperti kencing manis,obesiti,kegagalan buah pinggang
untuk berfungsi dengan baik serta alkohol. Tahap kolesterol juga menjadi tinggi jika trigliserida
tinggi. Trigliserida diukur bersama-sama dengan kolesterol sebagau daripada ujian darah.
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
123
Reagen :
I. ATP
II. Mg2+
III. 4-Chlorophenol
IV. 4-Aminoantipyrine
V. Peroxidase (Horseradish)
VI. GK (Microbial)
VII. GPO (Microbial)
VIII. Lipoprotein Lipase (Microbial)
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Trigliserides merupakan fatty asid yang ditemui dalam aliran darah. Aras yang meningkat atau
tinggi boleh mengakibatkan kebarangkalian yang tinggi untuk menghidap sakit jantung.
Pancreatitis juga boleh meningkatkan aras trigliserides.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
124
I. Serum pesakit diambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan kedalam rek dan nombor rek diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y018’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contphnya Trig (triglycerides), setelah itu tekan
‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
Trigliserida : 0.5 – 2.3 mmol/L
Tajuk Ujian : Magnesium.
Ujian magnesium merupakan satu ujian yang digunakan untuk mengukur tahap magnesium
dalam darah. Tahap magnesium abnormal yang paling kerap dikesan iaitu dalam penyakit yang
menyebabkan proses penyahtinjaan keluar yang tidak baik atau magnesium yang berlebihan
oleh buah pinggang atau kerosakkan disebabkan penyerapan dalam usus. Tahap magnesium
boleh diukur sebagai sebahagian daripada penilaian keterukan masalah buah pinggang atau
diabetes yang tidak terkawal serta boleh membantu dalam diagnosis gangguan gastrousus.
125
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. TRIS Buffer
II. Arsenazo Dye
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Magnesium menggunakan kaedah pewarna arsenazo yang mengikat preferentially dengan
magnesium. Keserapan arsenazo magnesium kompleks diukur pada 572 nm dan adalah
berkadar dengan kepekatan magnesium yang hadir dalam sampel gangguan kalsium yang
dihalang oleh agen pengkelat kalsium.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan besertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plan tube) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
126
Prosedur :
I. Serum pesakit diambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup dimasukkan kedalam rek dan nombor rak diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y106’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya Mg (magnesium), setelah itu tekan
‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
Magnesium : 0.66 – 1.07 mmol/L
Tajuk Ujian : Profil Lipid.
Profil lipid merupakan satu ujian yang kerap dilakukan untuk menentukan risiko penyakit
jantung koronari. Ini adalah ujian yang telah dilkakukan untuk mengesan samada seseorang itu
berkemungkinan telah mengalami serangan jantung atau strok yang disebabkan oleh
penyumbatan saluran darah atau pengerasan arteri (atherosclerois).
Bahan dan Radas :
127
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. 4-Aminoantipirin
II. Sodium kolat
III. Kolesterol esterase
IV. Kolesterol osidase
V. Horseradish peroksidase
VI. ρ-Hidroxybenzene sulfonate
VII. Surfaktan
VIII. Buffer
IX. ATP
X. Mg2+
XI. 4-Chlorophenol
XII. 4-Aminoantipyrine
XIII. Peroxidase (Horseradish)
XIV. GK (Microbial)
XV. GPO (Microbial)
XVI. Lipoprotein Lipase (Microbial)
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Trigliserida adalah sejenis lemak yang tedapat di dalam darah. Lemak adalah yang paling
dipengaruhi oleh makanan yang diambil seperti gula, lemak atau alkohol tetapi ia juga boleh
menjadi tinggi disebabkan kerana masalah berat badan, mempunyai tiroid atau penyakit hati
128
dan keadaan genetik. Tahap trigliserida yang tinggi berkaitan dengan risiko penyakit jantung
dan pembuluh darah yang lebih tinggi.
Kolesterol adalah sejenis lemak yang ditemui dalam darah yang dihasilkan oleh badan dan juga
datang daripada makanan yang dimakan. Kolesterol yang diperlukan oleh badan untuk
mengekalkan kesihatan sel – sel badan. Jika terlalu banyak kolesterol boleh membawa kepada
penyakit arteri kornoari.
LDL adalah lipoprotein (kombinasi lemak dan protein) yang dijumpai dalam darah. Ia dikenali
sebagai kolesterol jahat kerana ia mengambil kolesterol dari darah dan dibawa kepada sel –
sel. Tahap LDL yang tinggi boleh menyebabkan risiko penyakit jantung.
HDL adalah lipoprotein (kombinasi lemak dan protein) yang ditemui dalam darah. Ia dikenali
sebagai kolesterol baik kerana ia menghapuskan kolesterol yang berlebihan dalam darah.
Tahap HDL tinggi berkaitan dengan risiko yang rendah kepada penyakit jantung.
Kaedah ujian :
I. Untuk melakukan ujian lipid profile, pesakit hendaklah berpuasa bermula jam 12 tengah
malam sehingga hari keesoknya tanpa makan atau minum kecuali air putih sebelum
pengambilan darah dilakukan.
II. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan besertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
III. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
IV. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
V. Sampel (plen tiub) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit di ambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Cup di masukkan kedalam rek dan nombor rak diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
129
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y103’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya lipid, setelah itu tekan ‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
Julat Normal :
Trigliserida : 0.5 – 2.3 mmol/L
Kolesterol : 0 – 5.7 mmol/L
HDL : 0.9 – 1.7 mmol/L
LDL : <2.9 ***invalid value if Trig >3.80 mmol/L
Tajuk Ujian : Fungsi Hati (Liver Function Test).
Ujian fungsi hati (LFT) merupakan satu kumpulan ujian darah yang mengesan keradangan dan
kerosakan pada hati. Ujian fungsi hati termasuklah ALT,AST,alkalin fosfat ,INR,albumin dan
bilirubin.
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
130
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. Sodium Potassium Tartrate
II. Sodium Hidrosida
III. Potassium Iodide
IV. Copper Sulfate
V. Bromcresol Purple
VI. Surfaktan
VII. HCI
VIII. 2, 4 – dichloroaniline
IX. Sodium Nitrit
X. Surfaktan
XI. B – NADH
XII. Laktate Dehidrogenase
XIII. L – Alanin
XIV. a – Ketoglutarik Asid
XV. 2 – Amino – 2 – methilpropanal
XVI. Magnesium
XVII. Zink Sulfat
XVIII. HEDTA
XIX. 4 – Nitropenil Fosfat
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
131
Ujian fungsi hati (LFT) merupakan satu kumpulan ujian darah yang mengesan keradangan dan
kerosakan pada hati. Ujian fungsi hati (LFT) juga termasukklah bilirubin, ALT, ALP, totol protein,
albumin dan globulin. Secara amnya LFT merujuk kepada satu kumpulan ujian darah bagi
mengukur enzim atau protein tertentu dalam darah manusia. Ujian ini digunakan untuk
membantu dalam pengesanan penyakit hati dan beberapa penyakit lain.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel (plen tiub) yang diterima akan diempar pada 4000rpm selama 5 minit.
Prosedur :
I. Serum pesakit di ambil dan dimasukkan ke dalam cup menggunakan mikropipet 350ml.
II. Kuvet di masukkan kedalam rek dan nombor rak diambil dan dituliskan pada borang
pesakit.
III. Borang pesakit diambil, dan kemasukan data pesakit dilakukan pada mesin
ARCHITECT c4000.
IV. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y119’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
V. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VI. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya LFT, setelah itu tekan ‘ADD ORDER’.
VII. Tunggu sehingga keputusan keluar.
VIII. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpretasi ujian :
132
Julat Normal :
Total Bilirubin : 3.4 – 20.5 umol/L
Direct Bilirubin : 0 – 8.6 umol/L
ALT : 0 – 55 U/L
ALP : 40 – 150 U/L
Total Protein : 64 – 87 g/L
Albumin dan Globulin : 35 – 50 g/L
Tajuk Ujian : Hemoglobin A1c (HbA1c).
Ujian Hemoglobin juga dikenali sebagai ujian HbA1c,haemoglobin glycated atau
glycohemoglobin adalah ujian darah yang penting dilakukan untuk menentukan bagaimana
diabetes dikawal. Hemoglobin adalah bahan dalam sel darah merah yang membawa oksigen ke
seluruh badan. Apabila diabetes tidak terkawal (gula dalam darah terlalu tinggi),gula akan
mengikat dalam darah dan bergabung dengan hemoglobin menjadi ‘glycated’. Jumlah purata
gula dalam darah boleh dtentukan dengan mengukur tahap hemaglobin A1c. Jika paras glukosa
tinggi,ujian hemoglobin A1c akan turut tinggi. Jumlah hemoglobin A1c akan menunjukkan
beberapa minggu selepas paras gula darah,biasanya merangkumi tempoh 120 hari.
Bahan dan Radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
VI. Jam randik.
133
Reagen :
I. HbA1c
II. THB (Total Hb)
Sampel :
I. Hemoglobin A1c darah penuh (whole blood).
Prinsip :
Hemoglobin A1c adalah satu ujian makmal yang digunakan untuk mendiagnosis pesakit dengan
diabetes mellitus. Diabetes mellitus adalah suatu keadaan yang dicrikan oleh hiperglisemia
akibat daripada ketidakupayaan untuk menggunakan glukosa darah utnuk tenaga badan.
Dalam diabetes jenis 1,pankreas tidak menghasilkan dan merembeskna insulin. Oleh yang
demikian,glukosa darah tidak dapat memasuki sel-sel. Dalam diabetes jenis 2,samada
pancreas tidak membuat insulin yang cukup atau sel-sel tidak dapat menggunakan insulin
dengan betul. Komplikasi kencing manis yang melibatkan mata,buah pinggang,saraf dan
saluran darah jantung,otak dan hujung kaki,adalah biasa untuk kedua-dua bentuk penyakit.
Tahap HbA1c adalah berkadar terus dengan kepekatan glukosa sederhana dan jangka hayat
sel darah merah dalam edaran. Oleh itu,ukuran HbA1c telah diterima untuk pengurusan klinikal
diabetes melalui pemantauan rutin. A1c akan dikesan menggunakan Bio-Rad 10,yang
merupakan penganalisis automatic sepenuhnya yang terdiri daripada modul tunggal yang
menyediakan satu kaedah bersepadu untuk penyediaan sampel,perpisahan,dan penentuan
peratus relative haemoglobin khusus (contohnya,A2,F,A1c) dalam darah keseluruhan.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
134
III. Sampel bagi ujian HbA1c ini akan dikumpul sehinggalah hari ke empat pada waktu
pejabat dan diletakkan di dalam peti sejuk serta akan ‘run’ pada tiap hari khamis sahaja.
IV. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
V. Sampel (tiub EDTA) darah penuh yang diterima akan diambil untuk ujian ini dilakukan.
Prosedur :
I. Keluarkan sampel (whole blood) dari dalam peti sejuk. Biarkan pada suhu bilik selama
10 hingga 15 minit.
II. Sediakan sample cup.
III. Pipet 400µL bahan uji hemoglobin denaturant ke dalam sample cup. Sebatikan (‘mix’)
selama 5-10 saat secara perlahan.
IV. Biarkan whole blood tersebut dalam keadaan ‘hemolyse’ selama 5 minit pada suhu bilik.
V. Ujian dijalankan.
VI. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y119’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
VII. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VIII. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya HbA1c, setelah itu tekan ‘ADD
ORDER’.
IX. Tunggu sehingga keputusan keluar.
X. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpertasi ujian :
Julat Normal :
HbA1c : 7.5 umol/L
Tajuk Ujian : Total Urin protein 24 jam.
135
Ujian jumlah urin protein dijalankan untuk mengesan protein yang berlebihan dalam urin dan
merupakan satu ujian susulan yang sebelumnya adalah positif. Ujian ini membantu dalam
menentukan fungsi buah pinggang seseorang individu. Ujian ini dijalankan untuk mengesan
sebagai sebahagian pemeriksaan dalaman fizikal atau untuk menentukan jenis penyakit atau
keadaan yang menjejaskan buah pinggang. Ujian urin jumlah 24 jam iaitu dimana kuantiti
protein diukur sebagai jumlah yang dikumuhkan lebih daripada tempoh 24 jam.
Bahan dan radas :
I. Dipstick urinalisis
II. Alat penimbang Digital
III. Botol urin (24 hours)
IV. Botol urin (yellow container)
V. Mikropipet
VI. Mesin ARCHITECT c4000
VII. Rek
VIII. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. Carbonate buffer
II. Sodium chloride
III. Benzethonium chloride
Sampel :
I. Urin protein 24 jam
Prinsip :
Ujian ini merupakan untuk pemeriksaan metabolisme dan juga ujian susulan selepas urin
dilakukan dengan dipstik urinalisis. Biasanya,protein tidak dijumpai dalam urin apabila ujian
dengan mencelup stik rutin ini. Sesetengah protein akan muncul di dalam urin jika tahap protein
dalam darah menjadi tinggi,walaupun buah pinggang masih berfungsi dengan betul. Protein
akan hadir dalam urin apabila tahap protein dalam darah adalah normal.
136
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel urin akan dipindahkan sedikit pada botol urin berwarna kuning (yellow
container). Ini adalah untuk memudahkan kerja mempipet sampel masuk ke dalam
sampel Cup.
Prosedur :
I. Botol sampel urin protein 24 jam diletakkan di atas alat penimbang untuk mendapatkan
nilai berat keseluruhan sampel tersebut.
II. Pindahkan sedikit sampel urin protein 24 jam ke dalam botol urin (yellow container).
III. Ujian dipstick dilakukan terlebih dahulu untuk mendapatkan tahap kepekatan protein
yang ada dalam urin.
IV. Kemudian,sampel dipipet masuk ke dalam (plan tube) sebanyak 400µL untuk
diemparkan selama 5 minit.
V. Sampel dipipet lagi sebanyak 300 µL dan dimasukkan ke dalam sampel cup.
VI. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y119’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
VII. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VIII. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya uPRO, setelah itu tekan ‘ADD
ORDER’.
IX. Tunggu sehingga keputusan keluar.
X. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
Interpertasi ujian :
137
Julat Normal :
Urin protein 24 jam : <30 Mg/ 24 jam
Tajuk Ujian : Urin elektrolit 24 jam.
Ujian urin elektrolit adalah untuk mengukur elektrolit urin. Kehadiran elektrolit yang banyak
adalah berpunca daripada mineral yang ada di dalam badan. Mineral tersebut adalah seperti
kalsium dan natrium dan yang paling banyak adalah magnesium dan kalium.
Bahan dan radas :
I. Urin dipstick
II. Alat penimbang
III. Botol urin elektrolit
IV. Botol urin (yellow container)
V. Mikropipet
VI. Mesin ARCHITECT c4000
VII. Rek
VIII. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. Buffer
II. Potassium
III. Sodium
IV. Natrium
V. chloride
Sampel :
I. Urin elektrolit 24 jam
138
Prinsip :
Ujian urin elektrolit adalah untuk mengukur kadar atau kehadiran bahan kimi tertentu yang
dipanggil elektrolit dalam urin. Ia biasanya mengukur tahap kalsium klorida,kalium atau natrium.
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
IV. Sampel urin akan dipindahkan sedikit pada botol urin berwarna kuning (yellow
container). Ini adalah untuk memudahkan kerja mempipet sampel masuk ke dalam
sampel Cup.
Prosedur :
I. Botol sampel urin elektrolit diletakkan di atas alat penimbang untuk mendapatkan nilai
berat keseluruhan sampel tersebut.
II. Pindahkan sedikit sampel urin protein 24 jam ke dalam botol urin (yellow container).
III. Ujian dipstick dilakukan terlebih dahulu untuk mendapatkan tahap kepekatan protein
yang ada dalam urin.
IV. Kemudian,sampel dipipet masuk ke dalam (plan tube) sebanyak 400µL untuk
diemparkan selama 5 minit.
V. Sampel dipipet lagi sebanyak 300µL dan dimasukkan ke dalam sampel cup.
VI. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y119’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
VII. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
VIII. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya Elec, setelah itu tekan ‘ADD
ORDER’.
IX. Tunggu sehingga keputusan keluar.
X. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
139
Interpertasi ujian :
Julat Normal :
Urin elektrolit : < 30Mg/mmoL
Tajuk Ujian : Total Iron Binding Capacity (TIBC).
Jumlah kapasiti besi mengikat (TIBC) adalah ujian darah yang menunjukkan jika terdapat besi
terlalu banyak atau terlalu sedikit dalam darah. Besi dibawa dalam darah yang ditukarkan
kepada trasnferrin protein. Ujian ini membantu mengukur kemampuan protein yang dinamakan
transferrin untuk menjalankan besi dalam darah.
Bahan dan radas :
I. Pengempar
II. Mikropipet
III. Mesin ARCHITECT c4000
IV. Rek
V. Cup ARCHITECT
Reagen :
I. Ferric chloride
II. Citric Acid
Sampel :
I. Serum
Prinsip :
Ferric chloride saturating solution (reagen 1) akan dicampurkan bersama dengan sampel untuk
mengikat apotrasnferin dengan besi. Absorban alumina dalam TIBC akan menyingkirkan
lebihan besi daripada serum. Serum tersebut akan dianalisis untuk mengesan jumlah besi
dengan menggunakan asai besi.
140
Kaedah ujian :
I. Sampel yang diterima mestilah mengandungi label yang lengkap dan disertakan borang
yang mempunyai maklumat pesakit yang lengkap.
II. Bagi borang atau sampel yang tidak lengkap, akan ditolak dan wad atau klinik
berkenaan akan diberitahu.
III. Sampel bagi ujian TIBC ini akan dikumpul sehinggalah hari ke empat pada waktu
pejabat dan diletakkan di dalam peti sejuk serta akan ‘run’ pada tiap hari khamis sahaja.
VI. Sampel dan borang yang lengkap akan diambil dan pemohonan ujian dan pendaftaran
pesakit akan dilakukan.
VII. Sampel (TIBC) serum yang diterima akan diambil untuk ujian ini dilakukan.
Prosedur :
XI. Keluarkan sampel (TIBC) dari dalam peti sejuk. Biarkan pada suhu bilik selama 10
hingga 15 minit.
XII. Sediakan sample cup.
XIII. Pipet 600µL bahan uji larutan TIBC ke dalam serum (plan tube) yang mengandungi
serum pesakit sebanyak 300µL. Sebatikan (‘mix’) selama 5-10 saat secara perlahan.
XIV. Tuangkan ke dalam cup khas untuk TIBC untuk penurasan dan biarkan selama 8 minit
pada suhu bilik.
XV. Ujian dijalankan.
XVI. Tekan skrin mesin ‘ORDERS’, tekan ‘PATIENT ORDER’ dan masukkan nombor rek
contonnya ‘Y119’ dan masukkan nombor kedudukan sampel contonnya ‘1’.
XVII. Masukkan nombor IC pesakit dan tekan ‘SAMPEL DETAILS’ dan masukkan nama
pesakit dan tekan ‘DONE’.
XVIII. Tekan nama ujian yang ingin dilakukan contohnya TIBC, setelah itu tekan ‘ADD
ORDER’.
XIX. Tunggu sehingga keputusan keluar.
XX. Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan kedalam ‘LabNet’ sebelum keputusan
pesakit di keluarkan.
141
Interpertasi ujian :
Julat Normal :
TIBC : 240-450 Mg /dL
Nota :
Peningkatan aras protein, albumin dan globulin serta ALT boleh menyebabkan penyakit
hati, buah pinggang, ketaknormalan protein boleh menyebabkan kanser, kegagalan sel
darah dan boleh menyebabkan inflamasi dan infeksi yang kronik.
Peningkatan paras bilirubin boleh diakibatkan oleh hati, pundi hempedu atau kegagalan
SDM dan secara klinikal mengakibatkan jaundis.
Peningkatan ALP boleh menyebabkan penyakit hati, penyumbatan hempedu dan
kegagalan tulang.
BLOOD GASES
Blood Gases dan Bicarbonate
Material yang diperuntukkan: Analyser Blood Gases Cobas b 211.
Prinsip ujian: Hemoglobin, merupakan iron yang mengandungi protein di dalam seldarah
merah, menngangkut oksigen dalam darah. Apabila tekanan partial (PO2) dalam paru-paru
adalah tinggi, hemoglobin mengambil oksigen dan membebaskannya apabila PO2 rendah.
Setiap gram hemoglobin bergabung dengan 1.34 ml oksigen. PO2 dalam tisu adalah lebih
rendah daripada yang terdapat dalam darah. Oleh itu, PO2 dalam darah berkurangan untuk
menyeimbangkan dengan PO2 dalam tisu. Hal ini menyebabkan oksigen dilepaskan daripada
hemoglobin dan melalui plasma daripada tisu lebih tinggi daripada PCO2 di dalam udara
alveolar pada paru-paru.
Kaedah: Blood Gases dan bikarbonat digunakan pada Cobas b 221 adalah ujian diagnostik
secara in vitro sebagai pembilangan kuantitatif Blood gases dan bikarbonat dalam darah
manusia.
Prosedur
142
Analiser Blood Gases Cobas b 211 yang menggunakan prinsip ion selective electrode (ISE).
Dilakukan secara automatic dan diprogramkan untuk menentukan paras PCO2, pH, HCO-3 dan
PO2 dalam specimen tunggal.
Bahan penghalang: Syringe yang mengandungi darah mestilah ditempatkan dalam bekas
yang sejuk untuk mengelakkan darah beku dan mengganggu keputusan ujian.
Nilai jangkaan:
pH: 7.37 – 7.45
PCO2: 34 – 45 mmHg (4.52 – 5.98 kPa) atau 1.02 – 1.35 mmol/L.
Bikarbonat piawai: 22.4 – 25.8 mmol/L
Bikarbonat asal: 24 – 33 mmol/L
PO2: 83 – 108 mmHg.
Modified Oral Glucose Tolerance Test (MOGTT)
Material yang diperuntukkan: Serbuk glukosa.
Prinsip ujian: Kadar penyerapan glukosa dan respon terhadap insulin adalah untuk
menentukan kebolehan glukosa bertolerasi sepertimana yang terlihat melalui paras glukosa
darah. Apabila terdapat peningkata gklukosa dalam darah, insulin akan dibebaskan dari
pankreas untuk menurunkan paras glukosa. Tindak balas tersebut boleh berkurangan bila
insulin tiada atau tidak mencukupi. Peningkatan nilai glukosa selalunya berlaku selepas
mengambil makanan yang mengandungi karbohidrat. Oleh sebab itu, tindak balas terhadap
paras karbohidrat bergantung pada pengambilan karbohidrat yang sebelumnya dan pada
bilangan yang telah diingesi. Kesan terhadap karbohidrat yang tidak diingesi adalah asas
terhadap ujian tindak balas glukosa. Ia mengesan keabnormaliti dalam metabolisme karbohidrat
dalam kes seperti glukosuria.
Kaedah: MOGTT dilakukan untuk mengukur tahap kebolehan badan bertindak balas terhadap
glukosa yang telah diukur dos yang diberikan.
Keadaan berjaga-jaga: Elakkan kontaminasi pada urin.
143
Prosedur:
1. Pesakit akan berpuasa untuk semalaman.
2. Darah dan urin pesakit akan diambil. Darah tersebut akan dilakukan ujian glukosa
darah. Urin, akan memeriksa glukosa menggunakan strip glukosa dan seterusnya
direkod.
3. Psakit akan diberikan minum air glukosa; 75g glukosa dilarutkan dalam 250 ml atau 350
ml air dan diminum.
4. Selepas satu jam, ulang prosedur nombor 2.
5. Selepas dua jam, darah dan urin diambil untuk terakhir kali dan prosedur nombor 2.
diulang.
Bahan penghalang: Masa pengambilan sampel perlulah tepat untuk memberikan keputusan
yang jitu. Ellakkan kontaminasi pada kontainer atu pada urin serta gunakan strip yang baik.
Keputusan:
Ketidakhadiran glukosa urin: Warna krim dalam masa 10 saat (negatif).
Kehadiran glukosa urin: Warna ungu dalam masa 10 saat (+, ++, +++).
UJIAN TROP-T
Ujian Trop-T
Material yang diperuntukan :
i. Mesin Cobas H 232 POC System
ii. Pasteur pipet
Spesimen :
Darah
Prinsip :
144
Jalur ujian mengandungi dua antibodi monoklonal khusus untuk jantung troponin T (cTnT) di
mana satu adalah label emas. Antibodi membentuk kompleks sandwic dengan cTnT dalam
darah. Apabila eritrosit disingkirkan, plasma melalui zon pengesanan kompleks sandwic cTnT
berlabel emas dan isyarat positif dipaparkan sebagai garis merah (garis isyarat). Lebihan
goldlabelled antibodi berkumpul di sepanjang garisan kawalan, memberi isyarat bahawa ujian
adalah sah. Keamatan garis isyarat meningkat berkadaran dengan kepekatan troponin T.
Sistem optik instrumen cobas 232 h mengesan dua baris dan mengukur keamatan garis isyarat.
Perisian bersepadu menukarkan tafsiran isyarat kepada hasil kuantitatif yang dipaparkan pada
skrin.
Prosedure :
1. Ambil spesimen menggunakan pipet sebanyak 150 mikrolit dan titiskan ke atas strip(Jalur).
2. Hidupkan instrument dengan menekan butang on selama 5 saat.
3. Masukkan ID pesakit pada paparan.
4. Masukkan strip (jalur) sebaik sahaja arahan ikon “INSERT” di paparkan.
5. Biarkan mesin selama 5 minit sebelum mengambil bacaan pada skrin.
Keputusan :
145
146
MAKMAL MIKROBIOLOGI/
KAJI KUMAN
147
MAKMAL MIKROBIOLOGI/BAKTEREOLOGI
PENGENALAN
Makmal mikrobologi/bakteriologi di Hospital Nukleus Labuan menjalankan ujian yang tidak
memerlukan keputusan yang segera seperti makmal- makmal lain kerana ujian-ujian yang
dilakukan dalam makmal ini memerlukan masa untuk mendapatkan hasil keputusan yang betul.
Antara ujian yang dilakukan di dalam makmal ini ialah pengkulturan urin,darah,sampel2 swab,
swab genital, dan stool c&s.
Bagi makmal mikrobiologi/baktereologi ini juga ada melakukan prosedur pembuatan
agar untuk tujuan pengkulturan bakteria-bakteria tertentu. Antara agar atau media yang
dilakukan adalah seperti media MH, media MacConkey,media CLED, media agar darah, agar
coklat dan agar sitrat.
148
CARTA ORGANISASI MAKMAL MIKROBIOLOGI
149
FAIZAL YUSOF
PEG.SAINS(KAJI KUMAN)C41
Masri Suhaimi
JTMP U29
Siti Rohaida Md Amen
JTMP U29
AGAR MacCONKEY
Penyediaan Agar MacConkey
Bahan yang diperlukan:
i) Gelatin
ii) Laktosa monohidrat
iii) Natrium klorida
iv) Pepton
v) Garam hempedu
vi) Neutral red
vii) Krystal violet
Prinsip
Agar MacConkey digunakan isolasi dan identifikasi Enterobacteriaeceae daripada sampel
feses, urin, dan sebagainya. Ia juga bertindak sebagai agar pemilih bagi bakteria gram negatif.
Gelatin dan pepton member sumber nitrogen, vitamin, mineral dan asid amino untuk
pertumbuhan bakteria. Natrium klorida membekalkan elektrolit untuk pengangkutan dan
kesimbangan osmotik manakala laktosa pula yang membekalkan karbon dan tenaga. Kristal
violet dan hempedu pula merupakan agen pemilih yang bertindak sebagai inhibitor kepada
bakteria gram positif. Neutral red bertindak sebagai indikator pH.
Prosedur:
1. Serbuk agar seberat 50 gram disediakan dan dimasukkan ke dalam satu liter air
suling.
2. Kemudiannya dipanaskan dan digaul sehingga sebati.
3. Agar dididihkan selama satu minit.
4. Didihan agar kemudiannya dimasukkan ke dalam botol dan disterilkan dalam
autoclave pada suhu 121°C selama 15 minit.
5. Setelah itu, botol disejukkan pada suhu 45 – 50 °C dan disebatikan.
6. Tuang kedalam piring petri yang steril dan digoncangkan sesekali untuk
mengelakkan agar mengeras.
7. Agar yang sudah siap disimpan pada suhu 8 - 15°C.
Keputusan:
150
Organisma Warna Ciri – ciri
Esherichia coli Merah ke merah jambu -Tidak mukoid
-Bulat
Klebsiella Merah -Mukoid
-Bersaiz besar
Serratia Merah ke merah jambu Mukoid
Proteus Tidak berwarna dan jernih ‘Swarming’
Salmonella Tidak berwarna dan jernih
Shigella Tidak berwarna dan jernih
atau merah pucat
AGAR HEKTOEN
Penyediaan Agar Hektoen
Bahan yang digunakan:
i) Enzim dari tisu haiwan
ii) Ekstrak yis
iii) Garam hempedu
iv) Laktosa, sukrosa, salicin
v) Natrium klorida
vi) Natrium thiosulfida
vii) Ferrik ammonium sitrat
viii)Asid fushin
ix) Agar.
Prinsip:
Agar Hektoen digunakan untuk isolasi dan membezakan Salmonella spp dan Shigella spp yang
mana kedua-dua bakteria ini menginfeksi salur gastrousus manusia. Kandungan agar hektoen
memberikan fungsi yang berbeza kepada agar. Enzim yang diekstrak dari tisu haiwan
membekalkan nitrogen, karbon, dan asid amino untuk pertumbuhan organism.
151
Manakala ekstrak yis bertindak sebagai sumber vitamin dan garam hempedu dan asid fushin
pula sebagai inhibitor kepada bakteria gram positif. Laktosa, sukrosa dan salicin adalah
karbohidrat fermenter. Natrium klorida mengekalkan kesimbangan osmotik bagi agar tersebut
dan ferrik ammonium sitrat menjadi sumber ferum dan membolehkan penghasilan hidrogen
sulfide daripada natrium thiosulfida.
Prosedur:
1. Serbuk agar seberat 50 gram disediakan dan masukkan ke dalam 1liter air
suling.
2. Kemudian dipanaskan dan digaul sehingga sebati.
3. Agar dididihkan selama satu minit.
4. Kemudian, disejukkan selama 10 minit dan disebatikan
5. Agar dituang ke dalam piring petri yang steril dansesekali digoncang untuk
mengelakkan agar menjadi solid.
6. Agar yang sudah siap disimpan pada suhu 8 - 15°C.
Keputusan:
Koloni berwarna merah ke oren: Esherichia coli
Koloni berwarna hijau: Shigella flexneri
THIOSULFATE CITRATE BILE SUCROSE SUGAR (TCBS)
Penyediaan Agar Thiosulfate Citrate Bile Sucrose Sugar (TCBS)
Bahan yang diperlukan:
i) Ekstrak yis
ii) Enzim kasein
iii) Enzim dari tisu haiwan
iv) Natrium sitrat
v) Natrium thiosulfat
vi) Oxbile
152
vii) Natrium klorida
viii) Sukrosa
ix) Ferrik sitrat.
Prinsip:
Agar TCBS digunakan sebagai agar pemilih bagi mengisolasi Vibrio cholerae. Ekstrak yis,
enzim kasein dan enzim dari tisu haiwan membekalkan nitrogen, vitamin, dan asid amino dalam
agar TCBS. Manakala natrium sitrat, natrium thiosulfat dan oxbile bertindak sebagai agen
pemilih yang membekalkan pH alkali untuk inhibitor organisma gram positif. Peningkatan pH
digunakan untuk menggalakkan pertumbuhan Vibrio cholera kerana bakteria ini sensitif kepada
asid. Sukrosa pula sebagai karbohidrat fermenter dan natrium klorida meransang pertumbuhan
organisma dan mengekalkan kesimbangan osmotik.
Prosedur:
1. Sediakan serbuk agar seberat 50 gram dan masukkan ke dalam 1liter air suling.
2. Panaskan dan gaulkan sehingga sebati.
3. Didihkan selama 1minit.
4. Biarkan selama 10 minit untuk sejukkannya dan sebatikannya.
5. Tuang kedalam piring petri yang steril.
6. Simpan agar yang sudah siap pada suhu 8 - 15°C.
Keputusan:
Koloni berwarna kuning: Vibrio alginolyticus.
Koloni berwarna kuning: Vibrio cholerae.
Koloni berwarna hijau: Vibrio paarhaemolyticus.
153
AGAR NUTRIENT
Penyediaan Agar Nutrient
Bahan yang diperlukan:
i) 23 g serbuk agar nutrient.
ii) Air suling.
iii) Botol universal satu liter.
iv) Autoclave.
v) Piring petri.
Prinsip:
Nutrient agar merupakan medium asas bagi kebanyakan mikroorganisma. Ia juga merupakan
asas pengkulturan bagi kebanyakan mikroorganisma. Ia juga merupakan asas bagi kebanyakan
media seperti agar chocolate, dan media lain yang kompleks. Nutrien agar juga boleh disimpan
di dalam tube. Kegunaan nutrient agar adalah untuk subkultur dan kekalkan patogen bukan
fastidious.
Prosedur:
1. 23 g serbuk agar nutrient dimasukkan dalam bekas steril.
2. Kemudian air suling dimasukkan sehingga mencapai paras satu liter.
3. Campuran tersebut dipanaskan dengan kacauan yang kerap.
4. Sesudah mendidih, agar dibiarkan selama satu minit.
5. Air agar dimasukkan dalam botol universal.
6. Botol tersebut diaotoclave pada suhu 121ºC selama 15 minit.
7. Botol dibiarkan sekejap, dan kemudian dituangkan ke dalam piring petri.
154
AGAR DARAH
Penyediaan Agar Darah
Bahan yang diperlukan:
i) 42.5 g Columbia Base Agar.
ii) Air suling.
iii) Botol universal.
iv) Autoclave.
v) 5% darah.
vi) Piring petri.
Prinsip:
Agar darah merupakan agar diperkaya yang digunakan untuk membesarkan sejumlah besar
organisma yang sederhana memilih. Ia juga digunakan untuk mengesan perbezaan hemolisis
bakteria.
Darah yang digunakan untuk agar daras mestilah bebas lisis dan berantikougulasi dan
difibrinasi. Ia boleh jadi darah kuda, kambing biri-biri, atau darah arnab. Citrat darah manusia
yang luput turut boleh digunakan. Citrat boleh merencat pertumbuham beta hemolitik
streptococci. Sebelum digunakan, sejukkan dalam peti sejuk semalaman.
Prosedur:
1. Sediakan 42.5 g Columbia Base Agar.
2. Air suling dicampurkan ke dalam agar sehingga mencecah paras satu liter.
3. Campuran tersebut dipindahkan ke dalam botol universal.
4. Kemudian botol tersebut diautoclave pada suhu 121ºC selama 15 minit.
5. Kemudian, botol tersebut dikeluarkan daripada autoclave dan dibiarkan pada suhu bilik
sehingga suhu 45ºC hingga 50ºC.
6. 5% darah yang steril kemudiannya dimasukkan ke dalam botol tersebut dan disebatikan.
7. Serta merta, agar dituangkan ke dalam piring petri sambil digoncang sekali-sekala untuk
mengelakkan agar mengeras.
Keputusan:
155
Streptococcus spp: α-hemolisis; bakteria sedikit pecahkan sel darah merah dan
ukuran lisis kecil.
β-hemolisis; bakteria sepenuhnya memecahkan sel darah merah.
Ukuran lisis yang besar.
Ƴ-hemolisis; tiada pemecahan sel darah merah. Tiada ukuran
lisis.
AGAR CHOCOLATE
Penyediaan Agar Chocolate
Bahan yang diperlukan:
i) 42.5 g Columbia Base Agar.
ii) Air suling.
iii) Botol universal steril.
iv) Autoclave.
v) 5% sel darah merah.
vi) Piring petri.
Prinsip:
Agar chocolate merupakan agar bukan pemilih, diperkaya media tumbesaran. Ia mengandungi
sel darah merah yang telah dilisiskan dengan memanaskan secara perlahan sehingga 56ºC.
agar ini digunakan untuk tumbesaran bakteria fastidious bakteria respirasi seperti Haemophilus
influenza. Bakteria ini memerluka faktor tumbesaran seperti nicotinamide adenosine
dinucleotide (NAD) dan hematin yang terdapat pada sel darah merah. Oleh itu cara yang baik
untuk prtumbuhan adalah menggunakan sel darah merah yang lisis.
Prosedur:
1. Sediakan 42.5 g Columbia Base Agar.
156
2. Air suling dicampurkan ke dalam agar sehingga mencecah paras satu liter.
3. Campuran tersebut dipindahkan ke dalam botol universal.
4. Kemudian botol tersebut diautoclave pada suhu 121ºC selama 15 minit.
5. Kemudian, botol tersebut dikeluarkan daripada autoclave dan dibiarkan pada suhu bilik
seketika.
6. Setelah suhu botol mencecah 56ºC, 5% darah yang steril kemudiannya dimasukkan ke
dalam botol tersebut dan disebatikan. Ini untuk melisiskan sel darah merah.
7. Serta merta, agar dituangkan ke dalam piring petri sambil digoncang sekali-sekala untuk
mengelakkan agar mengeras.
Keputusan:
Media gelap dan bersih: Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus,
Staphylococcus simulans, dan Streptococcus faecalis.
Media kekuningan: alpha-hemolytic spesis Streptococcus.
AGAR CYSTEINE-LACTOSE-ELECTROLYTE-DEFICIENT (CLED)
Penyediaan Agar CLED
Bahan yang diperlukan:
i) 36 g serbuk CLED.
ii) Botol universal steril.
iii) Air suling.
iv) Autoclave.
v) Piring petri.
Prinsip:
Agar CLED ialah medium pembeza yang bukan selektif untuk tumbesaran dan enumerasi
mikroorganisma salur urinari. Kehadiran sodium klorida merencat perebakan Proteus dan
memberikan tumbesaran pada mikroorganisma salur urinari dan ia digunakan untuk membeza
dan mengenalpasti mereka. Kehadiran pengkontaminaan bakteria seperti Diphtheroids,
157
Lactobacilli dan mikroorganisma lain sebagai pengukur darjah penjagaan yang diambil dalam
melaksanakan spesimen urin.
Ekstrak dagine lembu dan pepton kasein membekalkan nitrogen, vitamin, mineral dan asid
amino untuk tumbesarah lebihan. Laktosa merupakan bahan fermentasi karbohidrat
memberikan karbon dan tenaga. L-Cystine ditambah sebaigai pembesaran tambahan untuk
cystine pembentukan coliform secara sendiri. Membezakan fermentasi laktosa dan bukan
fermentasi laktosa diperolehi dengan menggunakan Bromothymol biru sebagai indikasi pH.
Organisma yang menapaikan laktosa akan menurunkan pH dan mengubah warna medium
daripada hijau ke kuning.
Mikroorganisma yang sebabkan infeksi dalam salur urinari secara umumnya diabaikan dan
hanya satu spesis. E. coli ialah mikroorganisma yang paling kerap di isolasi. Pembilangan
100.000 (105)/ml atau banyak merupakan indikasi signifikan infeksi salur urinari.
Prosdur:
1. 26 g serbuk agar CLED dimasukkan dalam bekas steril.
2. Kemudian air suling dimasukkan sehingga mencapai paras satu liter.
3. Campuran tersebut dipanaskan dengan kacauan yang kerap.
4. Sesudah mendidih, agar dibiarkan selama satu minit.
5. Air agar dimasukkan dalam botol universal.
6. Botol tersebut diaotoclave pada suhu 121ºC selama 15 minit.
7. Botol dibiarkan sekejap, dan kemudian dituangkan ke dalam piring petri.
Keputusan:
Mikroorganisma Pembesaran Warna medium
Fermentasi atau
bukan fermentasi
laktosa
Enterobacter
aerogenes
Baik Kuning cerah - biru Bukan fermentasi
Escherichia coli Baik Merah jambu Fermentasi
Proteus vulgaris Baik (tiada swarming) Biru – biru hijau Bukan fermentasi
Staphylacoccus
aureus
Baik Kuning cerah Bukan fermentasi
Enterococcus faecalis Baik Kunig cerah Bukan fermentasi
158
Klebseila pneumonia Baik Merah jambu Fermentasi
Kleibseila spp Baik Merah jambu Fermentasi
Citrobacter freundii Baik Merah jambu Fermentasi
AGAR TRIPLE SUGAR IRON (TSI)
Penyediaan Agar TSI
Bahan yang diperlukan:
i) 65 g serbuk TSI.
ii) Air suling.
iii) Botol universal.
iv) Autoclave.
v) Tabung uji.
Prinsip:
Pencernaan enzimatik kasein, pencernaan enzimatik tisu haiwan dan kulat diperkaya pepton
memberikan nitrogen, karbon, dan vitamin yang diperlukan untuk pembesaran organisma. TSI
mengandungi tiga karbohidrat, dekstros, laktosa, dan sukrosa. Apabila karbohidrat telah
ditapaikan, penghasilan asid akan dikesan oleh fenol merah indikasi pH. Sodium tiosulfat
dikurangkan kepada hidrogen sulfida, dan hidrogen sulfida bertindak balas dengan garam iron
membentuk iron sulfida hitam yang serupa. Ferik amonia sitrat adalah hidrogen sulfida (H2S)
indikasi. Sodium klorida berfungsi mengekalkan keseimbangan osmotik pada medium. Agar
ialah agen solidifikasi.
Prosedur:
1. 65 g serbuk agar TSI dimasukkan dalam bekas steril.
2. Kemudian air suling dimasukkan sehingga mencapai paras satu liter.
3. Campuran tersebut dipanaskan dengan kacauan yang kerap.
4. Sesudah mendidih, agar dibiarkan selama satu minit untuk larutan lengkap.
5. Air agar dimasukkan dalam botol universal.
159
6. Botol tersebut diaotoclave pada suhu 121ºC selama 15 minit.
7. Botol dibiarkan sekejap, dan kemudian dituangkan ke dalam tabung uji secara condong.
Keputusan:
Mikroorganisma
Approx.
Inoculum
(CFU)
Anggaran Keputusan
Baikpulih Slant Butt Gas H2S
Escherichia coli Berat Tumbuh A A + -
Proteus mirabilis Berat Tumbuh K A - +
Pseudomonas aeruginosa Berat Tumbuh K K - -
Salmonella typhimurium Berat Tumbuh K A +/- -
Shigella flexneri Berat Tumbuh K A - -
Kata kunci: A, asid.
K, alkali.
-, negatif.
+, positif.
+/-, pertumbuhan positif dan negatif.
Slant alkali - butt asid (merah/kuning): Fermentasi dekstros sahaja.
Slant asid - butt asid (kuning/kuning): Fermentasi dekstros, laktosa, dan atau
sukrosa.
Slant alkali-butt alkali (merah/merah): Dekstros dan laktosa tidak difermentasi.
Mediaum mekahan, pisahan atau buih: Penghasilan gas.
Butt warna kehitaman: Penghasilan hidrogen sulfida (H2S).
AGAR MORTILITY-INDOL-ORNITHIN (MIO)
160
Penyediaan agar MIO
Bahan yang diperlukan:
i) 31 g serbuk agar MIO.
ii) Air suling.
iii) Botol universal steril.
iv) Autoclave.
v) Tabung uji.
Prinsip:
Mortiliti adalah untuk memerhatikan kekeruhan dalam medium. Pada organisma yang tidak
motil, pertumbuhan boleh dilihat melalui rekahan dalam medium disebabkan oleh penghasilan
gas, tetapi akan terdapat poket yang bersih tanpa pertumbuhan.
Dikarboksilasi ornitin adalah untuk memerhati di bahagian bawah 3/4 iaitu kawasan anaerobik
pada medium untuk perubahan dalam warna pada indikasi pH; pertumbuhan mesti hadir pada
bahagian tiub ini untuk analisa keputusan yang betul; warna kelabu, biru atau ungu merupakan
reaksi positif untuk ornitin dikarboksilasi iaitu pembentukan produk alkali yang sangat tinggi,
peneutralan asid yan melampau dihasilkan daripada penapaian glukosa. Warna kuning
merupakan reaksi negatif. Merupakan default penghasilan asid daripada penapaian glukosa.
Penghasilan indol berlaku apabila titisan reagen Kovacs ditambah pada medium. Gegelang
merah akan terhasil pada indol daripada pemecahan trytophan.
Prosedur:
1. 31 g serbuk agar MIO dimasukkan dalam bekas steril.
2. Kemudian air suling dimasukkan sehingga mencapai paras satu liter.
3. Campuran tersebut dipanaskan dengan kacauan yang kerap.
4. Sesudah mendidih, agar dibiarkan selama satu minit untuk larutan lengkap.
5. Air agar dimasukkan dalam botol universal.
6. Botol tersebut diaotoclave pada suhu 121ºC selama 15 minit.
7. Botol dibiarkan sekejap, dan kemudian dituangkan ke dalam tabung uji.
Keputusan:
161
No. tabung uji (sebelah kanan setiap tabung uji
telah ditambah dengan reagen Kovaks) 1 2 3
Kehadiran asid amino (aerobik alkali) + + +
Mortiliti (kekeruhan) - + +
Dikarboksilasi ornitin (anaerobik alkali) - + +
Penghasilan indol (gegelung merah selepas tambah
kovaks)
+ - +
Penapaian glukosa (asid) + + +
Contoh jenis mikroorganisma Klebseila
oxytoca
Enterobecte
r aerogenes
Escherichia
coli
MUELLER HINTON AGAR/BROTH
Penyediaan Mueller Hinton Agar/Broth
Bahan yang diperlukan :
I. Mueller hintonII. Air suling.
III. Botol universal steril.
IV. Autoclave.
V. Botol kaca.
162
Prinsip :
Muller Hinton broth digunakan bersama Muller-Hinton agar dalam ujian sensitiviti antibiotik.
Muller-Hinton agar adalah satu medium pertumbuhan mikrobiologi yang biasanya digunakan
untuk ujian kerentanan antibiotik. Ia juga digunakan untuk mengasingkan dan mengekalkan
spesies Neisseria dan Moraxella.
Prosedur:
Muller-Hinton Agar
1. 38 g serbuk agar Mueller hinton dimasukkan dalam bekas steril.
2. Kemudian air suling dimasukkan sehingga mencapai paras satu liter.
3. Campuran tersebut dipanaskan dengan kacauan yang kerap.
4. Sesudah mendidih, agar dibiarkan selama satu minit untuk larutan lengkap.
5. Air agar dimasukkan dalam botol universal.
6. Botol tersebut diaotoclave pada suhu 121ºC selama 15 minit.
7. Botol dibiarkan sekejap, dan kemudian dituangkan ke dalam piring petri.
Muller-Hinton Broth
1. 21 g serbuk agar Mueller hinton dimasukkan dalam bekas steril.
2. Kemudian air suling dimasukkan sehingga mencapai paras satu liter.
3. Campuran tersebut dipanaskan dengan kacauan yang kerap.
4. Sesudah mendidih, agar dibiarkan selama satu minit untuk larutan lengkap.
5. Air agar dimasukkan dalam botol universal.
6. Botol tersebut diaotoclave pada suhu 121ºC selama 15 minit.
7. Botol dibiarkan sekejap, dan kemudian dituangkan ke dalam botol.
163
Keputusan :
PENGKULTURAN BAKTERIA
SAMPEL URIN
Pemprosesan Sampel Urin
Bahan dan alat radas:
i) Agar darah
ii) Agar C.L.E.D ( Cystine Lactose Electrolyte Defision)
iii) Inkubator (37°C)
iv) Dawai loop
Prinsip:
Kebanyakkan infeksi saluran urin adalah disebabkan oleh bakteria tunggal. Tetapi bagi pesakit
yang menghidapi kronik UTI atau membuat pembedahan pada saluran urin,dua organisma
mungkin hadir. Sampel ‘midstream urin’ diproses dan dikultur dalam media agar untuk
mengesan kehadiran bakteria dan mengenalpasti bakteria yang hadir.
Prosedur:
i) Sampel urin yang diterima dilabel dan pastikan maklumat pada sampel adalah sama
pada borang permintaan.
ii) Sampel dikulturkan pada agar darah dan agar MacConkey.
iii) Selepas itu media agar diinkubasi secara aerobik pada suhu 37°C selama 18 – 24
jam.
164
iv) Agar media tersebut didiagnos dan ujian biokimia dilakukan untuk pengenalpastian
bakteria.
v) Ujian sensitiviti dilakukan.
Keputusan:
Tiada pertumbuhan bakteria: Dilaporkan sebagai tiada pertumbuhan.
Pertumbuhan signifikant: >100,000/ml, ujian identifikasi dan sensitiviti dijalankan.
Pertumbuhan tidak signifikant: <100,000/ml, dilaporkan sebagai tiada patogen.
SAMPEL SPUTUM
Pemprosesan Sampel Sputum
Bahan dan alat radas:
i) Agar darah
ii) Agar MacConkey
iii) Agar coklat
iv) Slaid
v) Mikroskop
vi) Dawai loop
vii) Inkubator 37°C
Prinsip:
Batuk merupakan salah satu tanda atau simptom kepada jangkitan dalam sistem respiratori.
Batuk selalunya akan memyebabkan sputum terhasil dalam alveoli dan saluran udara.
Pemeriksaan sampel sputum adalah untuk mengenalpasti bakteria yang menginfeksi saluran
respiratori. Sampel sputum diambil dan dikultur dalam media agar dan pengenalpastian
bakteria.
Prosedur:
1. Sampel yang diterima dilabel dan pastikan sampel adalah sesuai untuk diproses.
165
2. Selepas itu, pemeriksaan makroskopik dilakukan.
3. Smear dan pemeriksaan mikroskopik dilakukan selepas itu.
4. Sampel kemudiaannya dikulturkan di atas agar darah, agar coklat dan agar Mac
Conkey.
5. Agar darah dan agar Mac Conkey dieram dalam incubator pada suhu 37°
semalaman manakala agar coklat pula dieram dalam balang karbon dioksida
selama 48 jam.
6. Plat agar didiagnos dan ujian biokimia dilakukan pengenalpastian bakteria.
7. Ujian sensitiviti dijalankan.
Keputusan
Patogen diisolasi: Streptococcus pyogens, Streptococcus pneumonia.
- Ujian pengenalpastian.
- Ujian sensitiviti.
Tiada patogen diisolasi: Inkubat semula.
- Dilaporkan sebagai tiada patogen diisolasi.
SAMPEL FESES
Pemprosesan Sampel Feses
Bahan dan alat radas:
i) Dawai loop
ii) Agar Hektoen
iii) Broth Selenite
iv) Inkubator 37°C.
Prinsip:
Feses cair merupakan salah satu simptom bagi infeksi pada gasterusus. Infeksi ini berlaku
apabila patogen memasuki salur gasterusus dan membiak. Mikroorganisma boleh menembusi
166
mukosa intestinal dan membiak diusus ataupun merebak ke organ sistemik yang lain. Sampel
feses akan dikultur pada media agar, dikenalpasti dan ujian sensitivity dilakukan
Prosedur:
1. Sampel feses diterima dan dilabel.
2. Sampel dikultur pada agar Hektoen dan broth Selenite untuk pengkulturan
primary dan dibiarkan semalaman.
3. Subkultur dari broth Selenite dilakukan pada agar Hektoen untuk pengkulturan
sekunder dan dieram pada suhu 37°C dan dibiarkan 24jam.
4. Plat agar didiagnos dan ujian biokimia dilakukan untuk pengenalpastian bakteria.
5. Ujian sensitiviti dijalankan.
Keputusan:
Patogen diisolasi: Salmonella dan Shigella
- Ujian pengenalpastian.
- Ujian sensitiviti.
Tiada patogen diisolasi: Dilaporkan sebagai tidak patogenik.
Tiada pertumbuhan: Dilaporkan sebagai tiada pertumbuhan
SAMPEL GENITAL, RESPIRATORY SPESIMEN DAN SPESIMEN STERIL
Pemprosesan Sampel Genital, respiratory spesimen dan Spesimen Steril
Bahan dan alat radas:
i) Agar darah
ii) Agar Mac Conkey
iii) Agar Coklat
iv) Dawai loop
v) Biggy Agar
167
vi) Inkubator 37 °C.
Prinsip:
Pemeriksaan bakteriologi bagi spesimen genital dari wanita adalah sukar kerana spesimen
terdedah pada normal flora pada vagina. Sampel diambil pada High Vaginal Swab (HVS) atau
swab endoservikal dan akan diperhatikan dibawah mikroskop setelah pewarnaan Gram
dilakukan. Setelah itu, pengkulturan pada media agar dilakukan untuk isolasi dan
mengenalpasti patogen yang hadir.
Prosedur:
1. Sampel diterima dan dilabel.
2. Sampel kemudiaannya dikultur pada agar darah, agar MacConkey dan agar
coklat serta biggy agar. Agar darah dan MacConkey serta biggy agar dieram
pada inkubator 37° semalaman dan agar coklat dieram secara anaerobik selama
48 jam.
3. Sekiranya tiada pertumbuhan bakteria yang diperhatikan selepas dieram
semalaman agar dieram semula selama 24jam.
4. Plat agar didiagnos dan ujian biokimia dilakukan pengenalpastian bakteria.
5. Ujian sensitiviti dilakukan.
Keputusan:
Patogen diisolasi: N. Gonorrhoeae, Candida Albican
- Ujian pengenalpastian.
- Ujian sensitiviti.
Tiada patogen diisolasi: Dilaporkan sebagai tidak patogenik.
Tiada pertumbuhan: Dilaporkan sebagai tiada pertumbuhan.
168
SAMPEL PUS / NANAH
Pemprosesan Sampel Pus
Bahan dan alat radas:
i) Agar darah
ii) Agar Mac Conkey
iii) Dawai loop
iv) Inkubator 37 °C.
Prinsip:
Kecederaan kecil yang terjadi pada kulit boleh memusnahan intergritinya dan membolehkan
mikroorganisma yang terdapat pada permukaan kulit masuk ke dalam lapisan kulit. Kecederaan
yang dialami dapat dikelaskan sebagai kecederaan daripada pembedahan, trauma dan
kecederaan fisiologi.
Jka kecederaan tidak dirawat dengan segera, mikroorganisma akan menginfeksi kawasan luka
tersebut dan terjadilah nanah. Nanah yang terhasil adalah diakibatkan oleh infeksi bakteria
pada kulit dan kecederaan yang dialami. Sampel pus diambil daripada kawasan terinfeksi untuk
menentukan jenis organisma dan membuat pengkulturan pada media agar untuk mengisolasi
dan mengenalpasti patogen.
Prosedur:
1. Sampel diterima dan dilabel.
2. Sampel kemudiaannya dikultur pada agar darah dan agar MacConkey.. Agar
darah dan MacConkey dieram pada inkubator 37° semalaman. Sekiranya tiada
pertumbuhan bakteria yang diperhatikan selepas dieram semalaman agar
dieram semula selama 24jam.
3. Plat agar didiagnos dan ujian biokimia dilakukan pengenalpastian bakteria.
4. Ujian sensitiviti dilakukan.
Keputusan:
Patogen diisolasi: S.aureus,acinetobacter
- Ujian pengenalpastian.
169
- Ujian sensitiviti.
Tiada patogen diisolasi: Dilaporkan sebagai tidak patogenik.
Tiada pertumbuhan: Dilaporkan sebagai tiada pertumbuhan.
SAMPEL DARAH
Pemprosesan Sampel Darah
Bahan dan alat radas:
i) Agar darah
ii) Agar MacConkey
iii) Agar coklat
iv) Dawai loop
v) Inkubator khas.
Prosedur:
1. Spesimen yang diterima dalam media komersial.
2. Spesimen discan pada komputer dan dimasukkan kedalam inkubator khas.
3. Spesimen akan dieram selama 5hari bagi dan bagi spesimen fungus ia dieram
selama 2minggu.
4. Spesimen yang positif akan dikeluarkan dan perwarnaan gram dilakukan untuk
memerhatikan morfologi bakteria yang hadir.
5. Vial aerobik akan dikultur dalam agar darah, agar MacConkey dan agar coklat.ia
akan dieram dalam inkubator 37° selama 24jam
6. Vial anaerobik pula akan dieram dalam agar darah dan dieram secara anaerobic
selama 24jam.
7. Bagi spesimen negatif, ia akan terus dieram selama 5hari dan akan dikeluarkan
selepas itu.
Patogen diisolasi: S.aureus,Brucella sp
170
o Ujian pengenalpastian.
o Ujian sensitiviti.
Tiada patogen diisolasi: Dilaporkan sebagai tidak patogenik.
Tiada pertumbuhan: Dilaporkan sebagai tiada pertumbuhan.
UJIAN SENSITIVITI
Ujian Sensitiviti
Bahan dan alat radas:
i) Swab kapas
ii) Dawai loop
iii) Agar Muller Hinton
iv) bakteria dalam broth.
Prinsip:
Menentukan aktiviti perencatan agen antimikrobial terhadap strain tertentu bakteria. Inokulum
yang standard diswabkan pada permukaan agar dan disk yang mengandungi antibiotik
diletakkan atas agar. Plat agar tersebut kemudiannya dieramkan dalam inkubator semalaman.
Antibiotik tersebut kemudiannya akan menyerap masuk ke dalam agar bergantung kepada ciri –
ciri fizikal dan kimia. Zon perencatan organism diperhatikan dan diameter zon ini akan
ditentukan berdasarkan kebolehan organism berkembang, kadar pertumbuhan dan penyerapan
antibiotik. Diameter tersebut diukur dan ditukar kepada sensitive, intermediate & resistant
berdasarkan jadual.
Prosedur:
1. Broth bakteria dieram selama 2 jam.
2. Swab kapas dicelup ke dalam broth dan pastikan cecair yang diserap oleh swab kapas
tidak berlebihan.
3. Kemudian diswabkan di atas agar menutupi semua kawasan, plat agar diputar 60° dan
diswab dan kemudiaan plat agar diputar 60° lagi dan diswab.
171
4. Disk antibiotik diletakkan diatas agar dan tidak melebihi 6 disk dalam 1 plat agar.
5. Plat agar dieramkan agar selama 16-18 jam pada suhu 35oC.
6. Selepas 24 jam, zone perencatan diperhatikan dan diukur dalam unit mm.
Keputusan:
Optochin: Resistan ( streptococcus viridians).
Sensitif ( streptococcus pneumonia).
Novobiochin: Resistan (staphylococcus saprophyticus).
Sensitif( staphylococcus epidermis).
Bacitracin: Resistan ( streptococcus sp).
Sensitif ( streptococcus pyogenes).
Polymycin B: Resistan( bukholderia , pseudomallei B cepacia).
Sensitif (pseudomonas aeruginosa).
PEWARNAAN GRAM
Pewarnaan Gram
Prinsip:
Pewarnaan ini adalah untuk membezakan bakteria gram positif dan bakteria gram negatif.
Pembezaan ini berdasarkan tindak balas bakteria terhadap alkohol iaitu agen penyahwarnaan.
Bakteria gram positif tidak bertindakbalas dengan alkohol dan akan berwarna ungu gelap
manakala bakteria gram negatif akan bertindak balas dengan alkohol. Warna ungu gelap akan
pudar dan bakteria akan berwarna merah jambu disebabkan pewarna balas safranin.
Prosedur:
1. Apusan bakteria dilakukan ke atas slaid dan difiksasikan untuk melekatkan
bakteria pada slaid.
2. Slaid kemudiaannya diwarnakan dengan pewarna kristal violet selama satu minit
untuk mewarnakan dinding sel bakteria.
172
3. Bilas dengan air kemudian diwarnakan dengan pewarna iodin Lugol yang
bertindak sebagai mordan selama satu minit
4. Bilas dengan air selama dan kemudian dibilas dengan alkohol aseton selama 10
ke 15 saat.
5. Slaid dibilas dengan air.
6. Kemudian slaid diwarnakan dengan pewarna safranin selama satu minit.
7. Kemudian dibilas dengan air dan slaid dikeringkan.
8. Pemerhatian dibawah mikroskop dilakukan.
Keputusan:
Gram Positif: Berwarna biru.
Gram Negatif: Berwarna merah.
Tatacara Pelekapan Basah Bakteria
BAHAN
1. Kultur bakteria (dalam botol media broth atau plat kultur)
2. Slaid mikroskop
3. Penutup slaid
4. Botol larutan salin (steril)
TATACARA
1. Sterilkan gelung dawai melalui kaedah pembakaran dan biarkannya sehingga sejuk.
2. Letakkan setitis kecil salin steril di atas sekeping slaid mikroskop bersih.
3. Sentuhkan gelung dawai steril kepada 1 koloni bakteria pada plat kultur.
4. Buatkan suspensi bakteria dari gelung dawai di dalam titisan salin di atas.
5. Letakkan sekeping penutup slaid di atas suspensi bakteria seperti yang ditunjukkan
dalam Rajah 3.1.
6. Amati pergerakan bakteria dengan kanta objektif 40X.
173
Sekiranya menggunakan kultur broth tukarkan langkah 4 kepada berikut:
4a. Sterilkan gelung dawai melalui kaedah pembakaran dan biarkannya sehingga sejuk.
4b. Letakkan 1 gelung penuh kultur cecair bakteria (yang agak keruh atau tebal) ke atas slaid
mikroskop.
Tatacara Plat Garisan
BAHAN
1. Kultur bakteria
2. Piring Petri yang mengandungi media agar
3. Gelung dawai
4. Penunu Bunsen
TATACARA
1. Labelkan plat Petri yang mengandungi media pertumbuhan yang steril (pada bahagian
dasar atau bawahnya dan bukan di atas penutupnya).
2. Letakkan plat Petri tersebut dengan bahagian dasarnya di sebelah atas.
3. Sterilkan gelung dawai melalui pembakaran api penunu Bunsen dan setelah sejuk, ambil
specimen dengannya.
4. Pegang dan angkat bahagian dasar plat sehingga permukaan media yang terdedah
menghadap anda.
5. Letakkan gelung yang mengandungi specimen di atas permukaan media agar kira-kira 1
cm daripada dinding plat Petri tersebut.
6. Sebarkan inokulum seluas 1 cm garis pusat.
7. Bermula daripada sebaran di atas gariskan inokulum dengan menggerakkan gelung
bolak-balik supaya garisan meliputi satu kawasan seluas kira-kira sepertiga daripada
plat.
174
8. Garisan seterusnya bermula daripada kawasan di sekitar penghujung garisan-garisan
pertama.
9. Bakar semula gelung dawai dan biarkan sejuk. Putarkan plat ~90 darjah dan buatkan
pula beberapa garisan mengulangi prosedur di atas sehingga garisan meliputi
keseluruhan kawasan permukaan media.
10. Pastikan garisan yang terakhir tidak menyentuh sebaran inokulum yang pertama.
11. Piring Petri yang telah diinokulasi dieramkan pada suhu tertentu dalam keadaan terbalik.
NOTA
1. Gunakan penghujung gelung dawai sahaja untuk menyentuh permukaan media supaya
mendapatkan garisan yang halus dan tipis.
2. Dalam membuat garisan, yang penting ialah menyentuh gelung pada permukaan media
dan menggariskannya; usahakan menggaris perlahan-lahan supaya anda tidak sampai
mencungkil atau merobek media sehingga mengakibatkan media menjadi pecah-pecah.
3. Pastikan juga garisan yang dibuat tersebut rapi, berterusan tetapi terpisah serta tidak
saling memotong atau bersilang di antara garisan atas dengan yang di bawahnya
supaya mendapatkan koloni bakteria yang berasingan.
4. Gelung dawai dibakar semula selepas garisan dibuat pada bahagian pertama piring
Petri supaya inokulum (jumlah bakteria) dikurangkan, maka koloni bakteria yang
terpisah akan didapati.
5. Jangan bercakap semasa melakukan prosedur ini untuk mengelakkan semburan air liur
terjatuh ke atas permukaan media agar.
6. Piring petir yang telah diinokulasi dieramkan secara terbalik supaya sebarang
pemulapan yang berlaku pada penutupnya tidak akan menitis ke atas kultur.
UJIAN MAKMAL DALAM PENGENALPASTIAN BAKTERIA
Bakteria mempunyai kisaran aktiviti biokimia yang amat luas; yang merangkumi proses
kemusnahan dan proses pembinaan (atau sintesis). Aktiviti yang luas ini dikawal oleh factor
genetic serta alam sekelilingnya.Daripada segi genetik, sesuatu aktiviti biokimia ditentukan oleh
enzim-enzim yang dihasilkan oleh bakteria.Dalam pengenalpastian bakteria, faktor ini dengan
spesifisiti sesejenis enzim terhadap substrat tertentu membolehkan bakteria dikenal pasti dalam
keadaan sekeliling yang terkawal seperti di makmal.Misalnya, beberapa kumpulan bakteria
175
tertentu menghasilkan bahan pertengahan metabolisme yang spesifik seperti asetil-metil-
karbinol berikutan fermentasi glukos yang boleh digunakan untuk membezakan kumpulan
bakteria yang menghasilkannya daripada yang tidak.
Kehadiran sesejenis enzim dikenal pasti secara tidak langsung melalui tindakannya terhadap
sesuatu substrat.Hasilan aktiviti enzim ini boleh berupa gas atau terbitan bukan gas. Gas yang
dihasilkan dikesan secara langsung melalui pengamatan penghasilan gelembung gas atau
secara tidak langsung melalui penggantian cecair di dalam tiub Durham dengan gas, kehadiran
rekahan atau celah-celah di dalam agar atau melalui tindakan kimia yang menghasilkan terbitan
yang berwarna dan tidak larut (misalnya H2S). Hasilan bukan gas ditunjukkan oleh perubahan
warna indicator pH (sesuatu jenis pewarna) yang bergantung kepada jenis indicator yang
digunakan (contoh, Andrade: neutral – kuning pucat, asid – merah, alkalin – tanpa warna;
bromthymol blue: neutral – hijau, asid – kuning, alkali – biru). Enzim juga boleh ditunjukkan
dalam tindakan serologi yang menghasilkan kompleks enzim (sebagai antigen) – antibody yang
muncul sebagai presipitasi.
Ujian Tiga Gula-Besi
Media tiga gula-besi atau Triple Sugar Iron (TSI) merupakan sejenis media campuran yang
digunakan untuk membezakan spesies bakteria dalam famili Enterobacteriaceae dengan
berdasarkan kepada kemampuan spesies-spesies ini untuk memfermentasi gula dekstros,
laktos atau sukros atau kombinasi daripada ketiga-tiga tersebut; penghasilan gas dan
penghasilan hydrogen sulfid.
Media TSI disediakan dalam agar condong. Bahagian permukaan agar (agar condong) (slant)
adalah terdedah kepada udara maka wujud daladm keadaan aerobic. Sebaliknya, bahagian
punting agar (di bahagian dasar tabung) (butt) dilindungi dari udara dan wujud dalam keadaan
anaerobic (walaupun bukan 100%). Gula yang digunakan adalah glukosa (0.1%), laktosa
(1.0%) dan sukrosa (1.0%). Indicator pH, sebagai penunjuk fermentasi, adalah fenol merah
yang akan menjadi kuning pada pH 6.8 (keadaan asid). Media TSI ditampan pada pH 7.4 iaitu
pH alkali maka warna agar kelihatan oren-kemerahan atau merah.
Peptida dan asid amino yang berasal dari pepton di dalam media TSI didegradasikan melalui
proses dekarboksilasi oksidatif kepada amina, sejenis terbitan alkali. Proses ini dipercepatkan
oleh bakteria yang tumbuh di bahagian permukaan agar. Di bahagian puntung, oksigen di
176
dalam udara tidak dapat sampai maka proses dekarboksilasi oksidatif adalah pada tahap
minimum.
Jika bakteria yang diinokulasi tidak menfermentasi karbohidrat, asid tidak diihasilkan dan warna
merah akan kekal di seluruh media. Jika bakteria hanya boleh menfermentasi glukosa, kuantiti
asid yang dihasilkan adalah terhad kerana kuantiti glukosa yang digunakan adalah rendah
(0.1%). Walau bagaimanapun, kuantiti ini mencukupi untuk bahagian permukaan dan puntung
agar menjadi kuning. Tetapi di permukaan agar yang terdedah kepada oksigen udara, amina
dihasilkan dan lama kelamaan (18 – 24 jam selepas pengeraman) kuantitinya mencapai aras
yang mampu mengatasi kesan kuantiti rendah asid yang dihasilkan, pH asid di bahagian
permukaan agar akan berubah semula menjadi alkali (ungu – merah) manakala bahagian
puntung agar (bahagian dasar tabung) akan kekal asid (kuning) kerana di situ amina yang
dihasilkan tidak mencukupi untuk mengatasi kesan asid.Jika laktosa atau sukrosa, atau kedua-
duanya difermentasi kuantiti asid yang dihasilkan daripada salah satu di antara kedua gula ini
adalah besar kerana konsentrasi kedua-dua gula ini adalah tinggi iaitu masing-masing 1%. Jadi,
walaupun amina dihasilkan kuantiti asid yang dihasilkan terlalu besar untuk perubahan pH
kembali kepada keadaan alkali maka bahagian condong mahupun bahagian puntung agar akan
tetap berkeadaan asid (kuning). Sukrosa dicampurkan untuk menyaringkan spesies Salmonella
dan Shigella kerana kedua-dua bakteria ini tidak menfermentasi sukrosa atau laktosa.
Penghasilan gas ditunjukkan dengan kehadiran gelembung gas atau bahagian puntung agar
akan kelihatan pecah-pecah. Hydrogen sulfid yang dihasilkan akan bertindak balas dengan
ferrous sulfat dan suatu presipitasi hitam (ferik sulfid) akan terbentuk di dalam media.
Tatacara Ujian Tiga Gula Besi
BAHAN
1. Kultur bakteria
2. Cerun agar TSI di dalam tabung uji
3. Dawai inokulasi lurus (dawai lurus)
4. Penunu Bunsen
TATACARA
1. Sterilkan keseluruhan dawai lurus melalui pembakaran dan biarkan supaya sejuk.
2. Sentuhkan penghujung dawai kepada koloni bakteria.
177
3. Tusukkan inokulum menembusi cerun agar TSI di dalam tabung sehingga ke dasarnya.
4. Tarik semula dawai dan gariskan organisma di atas permukaan agar yang condong.
5. Eramkan semalaman dan teruskan selama 48 jam (jika perlu).
NOTA
1. Tabung TSI harus ditutup secara longgar sahaja selepas diinokulsi supaya udara dapat
masuk ke dalam tiub kultur untuk membolehkan berlakunya oksidasi dan perubahan
balik condong agar daripada asid (kuning) ke alkali (ungu-kemerahan).
2. Oleh kerana sesetengah spesies Proteus dan beberapa spesies lainnya boleh
memberikan reaksi pada TSI yang serupa dengan Salmonella ataupun Shigella, maka
untuk membezakan spesies-spesies ini ujian urease dilakukan. (Salmonella dan Shigella
adalah urease-negatif, manakala Proteus, urease-positif).
Penggunaan Sitrat
Koser mencipta sejenis media broth asas yang mengandungi natrium ammonium fosfat sebagai
sumber tunggal nitrogen, dan natrium sitrat sebagai sumber tunggal karbon. Bakteria golongan
aerogen boleh menggunakan sitrat sebagai sumber karbon , manakala golongan koliform tidak.
Dalam ujian yang menggunakan media Koser, hasilnya ditafsir berdasarkan berlakunya
kekeruhan pada media broth akibat pertumbuhan bakteria. Seterusnya, Simmons
mengubahsuai media Koser tersebut dengan menambahkan agar dan indicator, bromthymol
blue, yang kelihatan hijau pada pH 6.8 dan biru pada pH lebih 7.6.
Pengubahsuaian ini membolehkan pertumbuhan bakteria dikesan dengan lebih mudah kerana
dalam metabolisme karbon pada sitrat (pertumbuhan positif), suatu tindak balas alkali berlaku
dan ini ditunjukkan dengan perubahan pada warna media daripada hijau kepada biru tua.
Kadangkala bacaan hasil ujian tidak semata-mata berdasarkan kepada perubahan warna, tetapi
sama ada terdapat atau tidaknya pertumbuhan bakteria pada garis inokulasi di atas media.
Kehadiran pertumbuhan bererti kemampuan bakteria mengurai sitrat sebagai sumber karbon,
dan hasil ujian dinyatakan sebagai positif untuk sitrat.Perubahan warna, dalam hal ini,
mempermudahkan lagi pembacaan hasil ujian.
178
Ujian Penggunaan Sitrat
BAHAN
1. Kultur bakteria
2. Dawai lurus
3. Cerun agar sitrat Simmons di dalam botol Bijou
(Agar sitrat Simmons: Dari sumber komersial)
TATACARA
1. Sterilkan keseluruhan dawai lurus dan biarkan sehingga sejuk.
2. Sentuhkan pada koloni bakteria dengan penghujung dawai.
3. Buatkan 1 garisan tipis bakteria pada permukaan agar.
4. Eramkan pada 37®C selama semalaman atau 48 jam, jika perlu.
5. Amatilah perubahan warna pada media.
PENGAMATAN DAN PENTAFSIRAN
Ujian positif: Pertumbuhan dengan/tanpa media menjadi biru.
Ujian negative: Tiada pertumbuhan atau media tetap hijau.
Pentafsiran ujian positif: Kemampuan menggunakan sitrat sebagai sumber tunggal karbon.
NOTA
1. Gunakan sedikit sahaja inokulum supaya semasa penginokulasian inokulum ini tidak
kelihatan sama sekali pada garis inokulasi dan untuk mengelakkan reaksi positif palsu
akibat bakteria yang mati membebaskan karbon dan nitrogen dalam kuantiti yang boleh
menampung pertumbuhan.
2. Elakkan daripada mengambil sebarang bahan nutrient daripada media kultur di mana
inokulum diambil.
3. Kultur yang menunjukkan pertumbuhan tanpa perubahan pH (perubahan warna) juga
dianggap positif kerana pada sesetengah bakteria yang lambat tumbuh keadaan tindak
balas alkali tidak dapat dicapai dalam tempoh pengeraman yang ditetapkan.
179
Pengeraman selama 48 jam mungkin diperlukan untuk bakteria yang lambat tumbuh
supaya warna biru dapat muncul.
Ujian Oksidase
Ujian oksidase menentukan kehadiran sitokrom C, sejenis enzim respiratori.Oleh yang
demikian, ujian ini hanya positif untuk bakteria yang memiliki sitokrom C. sitokrom adalah
protein yang mengandungi heme dan merupakan enzim oksidatif dalam kitaran respiratori yang
terlibat dalam fosforilasi oksidatif.Dalam ujian oksidase tatacara Kovacs, reagen oksidase
adalah tetrametil-p-fenilena-diamina dihidroklorida 1%. Enzim oksidase sitokrom tidak bertindak
secara langsung dengan reagen oksidase,tetapi menyebabkan oksidase sitokrom C yang
kemudian menyebabkan oksidase tetrametil-p-fenilena-diamina dihidroklorida sehingga
membentuk sejenis bahan kimia berwarna biru yang disebut biru Wunster. Sitokrom C yang
direduksi (ditambah electron) dalam tindakan ini diubah secara tidak langsung kepada bentuk
yang teroksidasi oleh oksidase sitokrom yang menerima elektronnya.Enzim oksidase sitokrom
kemudian menggantikan electron tersebut kepada oksigen untuk menghasilkan air dengan ion
hydrogen.
Ujian ini digunakan untuk membezakan streptkokus (oksidase-negatif) daripada Neisseria
(oksidase-positifa).
Tatacara Ujian Oksidase
BAHAN
1. Kultur bakteria
2. Slaid mikroskop
3. Kepingan kecil kertas turas Whatman no.1
4. Reagen oksidase (tetrametil-p-fenilena-diamina dihidroklorida 1%)
5. Kayu aplikator
TATACARA
1. Letakkan sekeping kertas turas kecil di atas slaid mikroskop bersih.
2. Titiskan 2 hingga 3 titis reagen oksidase ke atas kertas turas.
180
3. Ambil koloni bakteria dengan kayu aplikator dan goreskan ke atas kertas turas pada
bahagian yang menyerap reagen oksidase.
4. Amati kemunculan warna dalam beberapa saat.
PENGAMATAN DAN PENTAFSIRAN
Ujian positif: Kemunculan warna Lavender (ungu pudar) yang cepat (dalam beberapa saat)
menjadi
biru/ungu.
Ujian negative: Tiada perubahan warna atau warna muncul hanya setelah beberapa minit.
Pentafsiran hasil positif: Perubahan segera ke warna biru/ungu menunjukkan bakteria
memilikim
sitokrom C.
NOTA
1. Reagen ini mesti disediakan segar kerana sifatnya yang tidak stabil. Auto-oksidasi oleh
oksigen bebas dari udara boleh berlaku dan oleh yang demikian reagen ini dengan
sendirinya akan berubah menjadi biru atau ungu jika dibiarkan di udara agak lama.
2. Reagen yang baru disediakan perlu dibiarkan selama 15 minit untuk menjadi “masak”
sebelum digunakan.
3. Pastikan dan patuhi tempoh masa yang ditetapkan untuk mentafsir hasil ujian ini kerana
pada ujian yang disimpan lama sebelum dibaca hasil positif palsu boleh berlaku kerana
warna biru atau ungu boleh muncul akibat auto-oksidasi yang berlaku ke atas reagen.
4. Gunakan kayu aplikator atau dawai platinum untul mengambil koloni. Dawai nikrom juga
boleh mempengaruhi hasil ujian dan memberikan hasil positif palsu.
5. Tatacara alternatif ujian oksidase ini adalah dengan membanjiri kultur pada piring petri
dengan reagen dan kemudian segera menyingkirkan bahan yang berlebihan ini dengan
pipet. Hasilnya ditunjukkan dengan perubahan warna koloni bakteria kepada warna
ungu (oksidase-positif) atau tiada perubahan warna (oksidase-negatif).
Ujian Koagulase
181
Ujian untuk menentukan penghasilan enzim koagulase oleh stafilokokus adalah suatu ujian
penting dalam mikrobiologi diagnostik.Ia membezakan stafilokokus patogenik kerana
berkemampuan untuk menghasilkan enzim ini, daripada yang tidak menghasilkannya atau tidak
patogenik. Terdapat dua jenis koagulase; yang satu terikat pada dinding sel bakteria (koagulase
terikat) dan tidak bebas, dan yang satu jenis lagi dirembeskan oleh sel ke dalam media atau
cairan (koagulase bebas).Ujian slaid di mana penggumpalan atau pengelompokan bakteria
dihasilkan dipercayai disebabkan oleh koagulase terikat yang terdapat pada dinding sel. Enzim
bentuk ini bertindak secara langsung ke atas fibrinogen haiwan-haiwan tertentu dan
menghasilkan fibrin yang memerangkap bakteria sehingga berlakunya
penggumpulan/pengelompokan tersebut.Sebaliknya, koagulase yang dihasilkan secara bebas
bertindak dengan protrombin untuk menghasilkan thrombin, yang seterusnya bertindak ke atas
fibrinogen untuk menghasilkan fibrin (pembekuan).
Tatacara Ujian Koagulase Slaid
BAHAN
1. Kultur bakteria
2. Larutan salin 0.85%
3. Slaid mikroskop
4. Gelung dawai
5. Plasma arnab
TATACARA
1. Letakkan setitis larutan salin steril di atas sebuah slaid mikroskop yang bersih dan
kering.
2. Ambil beberapa koloni bakteria dengan gelung dawai steril.
3. Buatkan suspensi bakteria ini di dalam titisan salin.
182
4. Tambahkan setitis plasma arnab kepada suspensi dan campurkan dengan gelung
dawai.
5. Goncangkan slaid dan amatilah penggumpalan (clumping) bakteria yang akan kelihatan
sebagai kelompok-kelompok putih dalam masa 15 saat.
PENGAMATAN DAN PENTAFSIRAN
Ujian positif: Pembentukan gumpalan bakteria.
Ujian negatif: Tiada penggumpalan dan suspensi bakteria kelihatan homogeny.
Pentafsiran hasil positif: Bakteria memiliki enzim koagulase.
NOTA
1. Mana-mana bakteria yang boleh menggunakan sitrat sebagai sumber tenaga boleh
membebaskan kalsium yang akan mengakibatkan pembekuan plasma jika plasma
tersebut diambil daripada darah yang bercampur sitrat. Oleh yang demikian, adalah
amat penting untuk mempastikan bahawa bakteria yang diuji adalah benar-benar kultur
murni stafilokokus, dan ujian ini digunakan semata-mata untuk membezakan antara
strain yang menghasilkan koagulase daripada yang tidak.
2. Gunakan plasma arnab atau manusia dan bukan spesies mamalia lain kerana
kebanyakan plasma daripada spesies lain tidak bertindak dengan koagulase
stafilokokus. Perlu juga diperhatikan bahawa kadangkala plasma manusia yang
digunakan mengandungi bahan perencat yang akan memberikan hasil negative palsu.
3. Plasma perlulah diuji terlebih dahulu dengan strain kawalan positif dan negative
sebelum digunakan. Seterusnya, supaya hasil ujian boleh dipercayai dan diterima tanpa
ragu-ragu, ujian haruslah dilakukan juga keatas beberapa jenis bakteria kawalan yang
memberikan hasil positif kuat, positif lemah dan kawalan negatif.
4. Pastikan koloni bakteria boleh diemulsifikasi di dalam salin supaya tidak menimbulkan
masalah dalam pembacaan hasilnya nanti.
5. Ujian positif palsu boleh berlaku jika penggumpalan yang berlaku lewat diambil kira.
6. Hasil positif yang berlaku lewat atau negative diuji semula dengan ujian koagulase
tabung kerana terdapat strain S.aureus yang menghasilkan hanya koagulase bebas
yang tidak bertindak dalam ujian koagulase slaid.
183
Ujian Katalase
Katalase adalah enzim dengan bahagian (moieti) yang mengandungi besi. Tindak balas kimia
yang berlaku dalam ujian katalase adalah : 2H2O2 AE 2H2O + O2. Penghasilan gelembung
gas (oksigen) adalah tanda bagi ujian yang positif.Ujian katalase digunakan khususnya untuk
membezakan antara stafilokokus (katalase positif) dengan streptokokus (katalase negative) dan
juga kadangkala digunakan dalam pengenalpastian pelbagai jenis bakteria.
Tatacara Ujian Katalase
BAHAN
1. Kultur bakteria
2. Slaid mikroskop
3. Kayu aplikator
4. Hydrogen peroksida 3%
TATACARA
1. Letakkan setitis larutan hydrogen peroksida dia atas sebuah slaid kaca bersih dan
kering.
2. Sentuhkan penghujung kayu aplikator kepada koloni bakteria.
3. Masukkan organisma ke dalam titisan reagen di atas slaid.
4. Amatilah kehadiran gelembung-gelembung gas yang dihasilkan dengan cepat, rancak
dan berterusan.
PENGAMATAN DAN PENTAFSIRAN
Ujian positif : Penghasilan dan pembebasan gas dengan cepat dicirikan dengan gelembung-
gelembung gas yang dibebaskan dengan rancak.
Ujian negative : Tiada sebarang tindak balas. Penghasilan segelintir gelembung kecil selepas
20 – 30
saat tidak dianggap positif.
Pentafsiran hasil positif : Bakteria memiliki enzim katalase.
NOTA
184
1. Jangan gunakan dawai gelung kerana positif palsu boleh berlaku.
2. Jangan gunakan kultur yang berusia lebih daripada 24 jam untuk mengelak daripada
memperolehi hasil negative palsu kerana enzim ini hanya dapat dikesan pada kultur
hidup yang masih segar dan mungkin tiada lagi pada kultur tua.
3. Pada kultur anaerobik, dedahkan kultur kepada udara selama setengah jam sebelum
ujian dilakukan untuk membolehkan oksidasi aerobic ke atas katalase yang tereduksi
berlaku.
4. Gunakan H2O2 pada kepekatan 3% untuk mendapatkan hasil ujian yang terbaik atau
optimum. Larutan H2O2 disimpan di dalam botol gelap di dalam peti beku.
5. Seboleh-bolehnya elakkan daripada mengambil koloni yang tumbuh pada permukaan
media agar darah. Ini untuk mengelakkan daripada terambil bersama sel darah dan
mendapatkan hasil yang positif palsu seperti di atas. Tetapi, sekiranya hal ini tidak dapat
dielakkan, berhati-hatilah dalam pengambilan tersebut untuk mempastikan hasil yang
tepat dan betul.
6. Ujian katalase plat : Ujian ini boleh dilakukan ke atas koloni di atas plat kultur dengan
menuangkan reagen ke atas koloni berkenaan KECUALI jika media kultur tersebut
adalah agar darah kerana ia boleh memberikan hasil positif palsu. Perlu ditekankan di
sini bahawa darah juga mengandungi enzim katalase yang dapat bertindak balas
dengan reagen. Ujikan juga sebahagian daripada plat agar yang belum diinokulsi
dengan bakteria dengan menuangkan sedikit reagen di atasnya sebelum meneruskan
dengan ujian katalase plat ini untuk mengelakkan hasil positif palsu. Ini adalah kerana
sesetengah media mungkin mengandungi sedikit katalase yang boleh memberikan
tindak balas yang lemah dan lambat serta boleh menyulitkan pembacaan hasil.
Ujian Motiliti dengan Menggunakan Agar Separuh Pejal
Media pertumbuhan dengan kepekatan agar yang rendah (0.4% atau <) merupakan suatu
media separuh pejal yang membolehkan bakteria bergerak dan menyebar ke pelbagai arah di
dalamnya. Jika bakteria mempunyai kemampuan untuk bergerak atau bersifat motil ia akan
185
menunjukkan penyebaran yang bermula dari garis inokulasi. Bakteria yang tak motil akan tetap
pada garis inokulasi dan sama sekali tidak akan tersebar.
Garam tetrazolium digunakan dalam ujian motility ini kerana ia memudahkan pengesanan
pertumbuhan serta penyebaran bakteria secara visual di dalam media. Garam tetrazolium
adalah tanpa warna dan akan diubah kepada formazan, kompleks tak larut berwarna merah
hasil pereduksian oleh bakteria yang tumbuh.
Tatacara Ujian Motilit (Pergerakan) pada Agar Separuh Pejal
BAHAN
1. Kultur bakteria
2. Agar nutrient (0.4% atau <) yang mengandungi indicator (garam tetrazolium) di dalam
tabung uji.
3. Dawai lurus
4. Inkubator
TATACARA
1. Sterilkan keseluruhan dawai lurus.
2. Sentuh koloni bakteria dengan penghujung dawai.
3. Tusukkan hujung dawai ke dalam agar separuh pejal sehingga ke dasar tabung.
4. Eramkan semalaman.
5. Amati pola pertumbuhan bakteria.
PENGAMATAN DAN PENTAFSIRAN
Ujian positif : Pertumbuhan bakteria (merah) tersebar daripada garis tusukan dawai lurus.
Ujian negative : Pertumbuhan bakteria terhad kepada garis tusukan.
Pentafsiran ujian : Ujian positif – bakteria motif, ujian negatif – bakteria tak motil.
NOTA
1. Beberapa bakteria seperti Pseudomonas adalah aerobik dan akan hanya menunjukkan
motility pada bahagian atas media ini.
2. Oleh kerana keseluruhan dawai lurus akan ditusuk ke dalam agar maka pastikan
keseluruhan dawai ini dibakar untuk mensterilkannya.
186
3. Pertumbuhan beberapa jenis bakteria tertentu mungkin dihalang oleh garam tetrazolium.
4. Dawai yang ditusuk ke dalam media dikeluarkan seboleh-bolehnya bertepatan dengan
garis kemasukannya. Elakkan daripada menggerakkan dawai ke kiri atau ke kanan
semasa dikeluarkan (dan juga semasa dawai ditusuk) kerana ini akan menyebabkan
pertumbuhan yang kelihatan tersebar dan memberi tafsiran positif palsu mengenai
mobiliti.
187
MAKMAL KLINIKAL & TIBI
MAKMAL KLINIKAL DAN TIBI
PENGENALAN
Makmal klinikal dan tibi di dalam Hospital Nukleus Labuan ini berkesinambungan dengan makmal mikrobiologi kerana sampel yang positif untuk dikulturkan akan dihantarkan ke
188
makmal tersebut. Antara ujian yang dilakukan di makmal ini ialah ujian mikroskopi sputum, ujian urin feme, ujian stool ob,ujian sputum afb dan beberapa ujian lagi.
Sampel yang dihantar kebanyakannya adalah dari Klinik Pakar 2(KP2) kerana kebanyakan sampel yang didapati adalah berkaitan dengan wanita. Namun terdapat juga sampel yang dihantar dari wad seperti sputum.
CARTA ORGANISASI MAKMAL MIKROBIOLOGI
189
FAIZAL YUSOF
PEG.SAINS(KAJI KUMAN)C41
Tajuk ujian: pemprosesan spesimen dalam makmal klinikal dan tibi
1. Sampel: sputum
Bahan dan radas
190
SALSIAWATI HADIR
JTMP U29
TAN AH GEK
JTMP U29
1. Botol sputum(kaca)2. Slaid kaca3. Kayu aplikator
Kaedah ujian
1. Terima sampel dan borang sputum dalam bekas yang steril. Lakukan penolakan jika borang tidak betul atau tidak lengkap.
2. Daftar pesakit dan buat permohonan ujian dalam Labnet.3. Sampel sputum akan dilakukan di dalam kebuk wasap.4. Ambil sputum menggunakan kayu aplikator dan calitkan pada slaid kaca yang bersih.5. Sebarkan smear sputum dengan rata dengan keluasan kira-kira 3x2 cm.6. Buang kayu aplikator ke dalam plastik kuning biohazard.7. Keringkan slaid di udara atau dalam kebuk wasap tersebut. Jangan keringkan
menggunakan api.8. Lakukan pewarnaan Gram setelah smear kering.9. Perhatikan dan baca keputusan dibawah mikroskop.
Keputusan ujian mikroskopi sputum
Cell/IpfPolymorphonuclear neutrophils 10
Squamous epithelial cells 40Gram positive cocci 50Gram positive rods 50
Gram negative cocci 0Gram positive rods 0
Yeast cells 0
Interpretasi ujian
Pengkulturan bakteria tidak akan diterima apabila sel skuamus >10. Terkontaminasi oleh normal flora.
2. Sampel: Swab Genital(HVS)
Bahan dan radas
1. Swab Emies(bekas steril)2. Slaid kaca
191
Kaedah ujian
1. Terima sampel dan borang HVS dalam bekas yang steril. Lakukan penolakan jika borang tidak betul atau tidak lengkap.
2. Daftar pesakit dan buat permohonan ujian dalam Labnet.3. Sampel ini akan dilakukan di dalam kebuk wasap.4. Buka bekas pada bahagian atas dan calitkan swab pada slaid kaca yang bersih.5. Sebarkan swab smear dengan rata.6. Keringkan slaid di udara atau dalam kebuk wasap tersebut. Jangan keringkan
menggunakan api.7. Lakukan pewarnaan Gram setelah smear kering.8. Perhatikan dan baca keputusan dibawah mikroskop.
Keputusan ujian mikroskopi HVS
Cell/IpfPolymorphonuclear neutrophils 10
Yeast Cells 0Squamous epithelial cells 40
Lactobacilli 0Gram variable rods/coccobacilli 20
Curved gram variable rods 0Gram negative diplococci 0
Interpretasi ujian
Consistent with vaginitis,culture N.ANormal 0-3
Intermediate 4-6Consistent with bacterial vaginosis 7-10
3. Sampel: kahak(AFB)
Bahan dan radas
1. Slaid kaca2. Bekas yang steril
192
3. Kayu aplikotar(khas)
Kaedah ujian
1. Label id pesakit pada hujung slaid mikroskopi yang baru dan bersih tanpa sebarang calar dengan menggunakan pensil.
2. Guna kayu aplikator untuk memindahkan specimen daripada botol specimen kepada slaid. Patahkan hujung kayu aplikator kira-kira 1 cm dan pastikan bahagian itu tidak tercabut.
3. Pindahkan specimen ke atas slaid dengan memilih specimen purulent dan kental (jika ada). Gunakan kayu aplikator yang lain untuk mengurangkan specimen yang terlalu kental dan banyak.
4. Sebar smear pada slaid dengan rata menggunakan kaedah coiling dengan keluasan kira-kira 3x2cm.
5. Buang kayu aplikator dalam plastik kuning dan guna kayu aplikator yang baru untuk setiap sampel yang berlainan.
6. Keringkan slaid di udara. Jangan keringkan slaid menggunakan api.7. Lakukan pewarnaan Ziehl’s Neelsen.
Interpretasi ujian
Gram negatif rod,latar belakang warna biru.
4. Sampel: Urin FEME
Bahan dan radas
1. Bekas urin yang steril2. Miditron Junior II(mesin)
193
3. Dipstick combo 10
Prinsip(Miditron Junior II )
Mesin miditron junior II ini merupakan mesin semi-automatic yang menganalisis urin dengan hanya menggunakan Dipstick Combo 10, ujian menganalisis urin ini sangat mudah dilakukan dengan menggunakan sistem operator yang dipaparkan pada skrin.
Kaedah ujian
1. Celupkan strip combur test 10 ke dalam air kecing selama 1 saat.2. Lapkan lebihan air kencing tersebut.3. Letakkan strip tersebut di atas tempat sampel Meditron Junior.4. Tekan butang start5. Tunggu hingga mesin Meditron Junior selesai memproses6. catatkan keputusan yang dicetak oleh mesin Meditron Junior ke dalam borang ujian7. Sekiranya Mesin Meditron Junior tidak berfungsi, bandingkan reaksi warna dalam
kawasan ujian di atas strip dengan skala warna di atas label botol Combur Test 10
Interpretasi ujian
5. Sampel: Cecair seminal
Bahan dan radas
1. Slaid kaca
194
ParameterSpecific gravitypHLeukocytesNitriteProteinGlucoseKetoneUrobilinogenBilirubinerythrocytes
2. Sisip kaca3. Pipet dan tips4. Bekas seminal yang steril5. Silinder penyukat6. Mikroskop7. Neuber Chamber8. Kayu aplikator9. Air suling
Kaedah ujian
1. Catat masa pengambilan sampel, penerimaan sampel dan masa ujian dijalankan.2. Sukat isipadu sampel dengan menggunakan kaedah secara tidak langsung iaitu dengan
menggunakan bekas yang sama. Ukur isipadu air suling yang telah disukat dengan menggunakan silinder penyukat 10ml. Catat bacaan pada laporan ujian (Normal >2ml)
3. Perhatikan kepekatan sample (viscosity), laporkan samaada slightly diluent, normal ataupun extreme.
4. Pipetkan sedikit sampel ke atas slaid yang bersih dan tutup dengan sisip kaca.5. Kira peratusan pergerakan sperma di bawah mikroskop cahaya (40X). (Normal >50%)6. Lakukan percairan spesimen dengan mencampurkan 10 µl sampel dan 190 µl air suling
ke dalam tiub.7. Campurkan dengan sekata dan pipetkan sampel yang telah dicairkan ke atas Neubeur
Chamber dan lekapkan sisip kaca.8. Lihat di bawah mikroskop cahaya (40x)9. Kira bilangan sperma di dalam kotak E (Erythrocyte) yang berasingan dengan
menggunakan formula ini:
Bil Sel / ml =( bil sel dalam 5 kotak E ) x 10^6 / ml
(Bil normal per ml ialah >20 million / ml)
10. Kira peratusan morfologi normal & abnormal sperma (Normal >60% morphology normal)11. Catatkan semua bentuk pemerhatian12. Rekod semua keputusan ujian di dalam Buku Seminal Analysis dan Labnet
6. Sampel: Stool O.B(Occult Blood)
Bahan dan radas
195
1. Bekas feses2. Botol penutup hijau3. strip oc-light
Prinsip
Darah di dalam feses adalah salah satu tanda kanser kolon atau rektum. Jika darah hadir dalam sampel feses, molekul hemoglobin boleh berfungsi secara pseudoenzimatik. Kertas ujian akan bertukar biru dalam masa 5 minit jika terdapat kehadiran lebih daripada 2 hemoglobin mg per gram najis.
kaedah ujian
1. Buka penutup hijau botol sampel2. Calitkan specimen najis dan masukkan ke dalam botol sampel.3. Tutup penutup botol, ketatkan dan goncang sepenuhnya4. Letakkan botol sampel dengan penutup hijau di bawah5. Alihkan kon nozzle putih6. Masukkan strip oc-light ke dalam botol sampel sehingga kedalaman paling bawah7. Baca keputusan ujian dalam masa 5 minit.8. Laporkan keputusan sebagai negative jika hanya satu garisan yang berwarna merah
jambu-ungu muncul pada kawasan bertanda ‘C’.9. Jika ada 2 garisan yang muncul, laporkan sebagai positif.
Interpretasi ujian
Terdapat 2 garis – Positif
Terdapat 1 garis - Negatif
7. Pewarnaan Gram
Reagen
196
1. Kristal violet2. Safranin3. Aseton alkohol4. Lugol’s Iodine
Prinsip ujian
Pewarnaan ini adalah untuk membezakan bakteria gram positif dan bakteria gram negatif.
Pembezaan ini berdasarkan tindak balas bakteria terhadap alkohol iaitu agen penyahwarnaan.
Bakteria gram positif tidak bertindakbalas dengan alkohol dan akan berwarna ungu gelap
manakala bakteria gram negatif akan bertindak balas dengan alkohol. Warna ungu gelap akan
pudar dan bakteria akan berwarna merah jambu disebabkan pewarna balas safranin.
Kaedah ujian
1. Lakukan palitan pada slaid yang bersih dan lakukan ‘fixation’ dengan menggunakan haba.
2. Basahkan slaid dengan menggunakan larutan crystal violet dan biarkan selama 1 minit. 3. Basuh slaid menggunakan air paip yang bersih. 4. Basahkan slaid dengan menggunakan larutan Lugol’s iodine. Biarkan 1 minit. 5. Basuh slaid menggunakan air paip yang bersih. 6. Basahkan slaid dengan menggunakan acetone dan biarkan selama 1/2 minit. 7. Basuh slaid menggunakan air paip yang bersih. 8. Basahkan slaid dengan menggunakan larutan safranin. Biarkan selama 1 minit. 9. Basuh slaid menggunakan air paip yang bersih. 10. Keringkan slaid tersebut sebelum diperiksa di bawah microskop. 11. Periksa slaid di bawah mikroskop pada kanta berkuasa 100x 12. Perhatikan warna dan morfologi bacteria. Catatkan keputusan.
Interpretasi ujian
Gram Positif = Warna Biru
Gram Negatif = warna Merah
Gram Positif Gram NegatifStaphylococci EnterobacteriaceaeStreptococci SalmonellaMycobacterium Shigella
Haemophilus
8. Pewarnaan Ziehl’s Neelsen(AFB)
197
Reagen
1. Carbolfuschin2. Asid alkohol3. Metalina biru4. Api
Prinsip
Perwarnaan Zhiel Neelson adalah untuk mewarnakan bakteria tahan asid seperti Mycobacterium Tuberkulosis. Karbon fuschin yang digunakan adalah untuk mewarnakan bakteria berwarna merah. Tujuan pemanasan karbon fushin adalah untuk memusnahkan struktur keratin sel bakteria tersebut supaya warna dapat diserap dan sekiranya bakteria seperti Mycobacterium Tuberculosis hadir, ia akan berwarna merah.
Kaedah ujian
1. Fixkan smear menggunakan api secara berhati-hati dan perlahan-lahan sebanyak 3 hingga 4 kali kira-kira 1 hingga 2 saat pada belakang smear yang telah disediakan.
2. Letak slaid yang telah difix pada jambatan pencelupan di atas singki dengan kedudukan smear menghala ke atas. Pastikan jarak antara slaid adalah lebih kurang 1 hingga 2 cm.
3. Basahkan keseluruhan slaid dengan menggunakan larutan Carbolfuschin.4. Panaskan slaid yang telah dibasahkan tadi dengan menggunakan api yang perlahan
hingga mengeluarkan wap. Jangan biarkan slaid tersebut dipanaskan sehingga kering atau menggelegak. Biarkan selama 5 minit.
5. Basuh slaid dengan menggunakan aliran air paip yang perlahan.6. Basahkan slaid dengan menggunakan larutan 3% acid alcohol dan biarkan selama 2
hingga 3 minit.7. Basuh slaid dengan menggunakan aliran air paip yang perlahan.8. Basahkan slaid dengan menggunakan larutan methylene blue dan biarkan selama 1
minit.9. Basuh slaid dengan menggunakan aliran air paip yang perlahan.10. Keringkan slaid tersebut sebelum diperiksa di bawah mikroskop.
Interpretasi ujian
AFB = Warna merah dan latar belakang biru
9. ujian UPT(WHPM)
198
Bahan dan radas
1. Bekas urin yang steril2. Kit ujian
Prinsip
Pada prinsipnya reaksi imunologi terjadi pada kertas kromatografi melalui aksi kapilaritas. Pada
sistem ini menggunakan dua jenis antibody-antigen spesifik. Salah satu antibody ditempatkan
pada kertas kromatografi (fase diam) dan lainnya dilabel dengan koloid emas (colloidal gold)
dan diinfiltrasi ke tempat sampel (sample pad). Ketika cairan sampel diteteskan pada tempat
sampel, maka akan terbentuk kompleks imun dengan antibodi yang dilabeli dengan koloid
emas. Kompleks tersebut akan bergerak bersama dengan cairan sampel dan akan berinteraksi
dengan antibodi yang ada pada kertas kromatografi dan menghasilkan garis berwarna merah
ungu.
Kaedah ujian
1. Terima sampel daripada kaunter 2. Pastikan nama pada bekas air kencing dan borang pesanan adalah sama. Jika tidak
sama, hantar kembali ke kaunter 3. Daftarkan maklumat pesakit dan permohonan ujian di LabNet. 4. Keluarkan kit ujian dan biarkan pada suhu bilik. 5. Pastikan tarikh luput dan strip ujian berada dalam keadaan yang baik dalam kit ujian. 6. Rendamkan strip ujian ke dalam bekas berisi sampel. 7. Keluarkan strip ujian daripada bekas sampel apabila sampel air kencing kelihatan
meresap naik melalui strip ujian. 8. Tafsirkan keputusan ujian dalam 5 minit 9. Semak keputusan (rujuk fail pengendalian ujian serologi & kawalan kualiti). Jika
keputusan meragukan, ulangi ujian 10. Rekodkan keputusan di LabNet, buku rekod ujian serologi dan borang Per. Pat 301. 11. Sahkan keputusan
Intertpretasi ujian
Satu garisan – Negatif
2 garisan – Positif
10. SMEAR DARAH PARASIT MALARIA
199
Apusan Darah Parasit Malaria
Peralatan yang diperlukan:
i) Mikroskop
ii) Slaid
iii) Pewarna Giemsa
Prinsip:
10% pewarna Giemsa memberikan warna biru kepada sitoplasma manakala kromatin
diwarnakan dengan warna merah. Filem darah tebal adalah untuk pembilangan parasit
manakala filem darah nipis adalah untuk pengenalpastian spesis parasit malaria.
Prosedur:
1. Spesimen diterima, diperiksa dan dilabel.
2. Filem darah dikeringkan sebelum fiksasi dilakukan.
3. Filem darah nipis difiksasi dalam methanol selama 1 minit.
4. Slaid diwarnakan dengan 10% Giemsa selama 10minit.
5. Selepas itu, slaid dicuci dan dikeringkan.
6. Slaid diperhatikan dibawah mikroskop pada kuasa 100x dan diletakkan minyak imersi
pada slaid.
7. Pemerhatian dilaporkan.
Keputusan:
1. 1-10 parasit dalam 10 field filem darah tebal - + ( Sederhana).
2. 11-100 parasit dalam 10 field filem darah tebal - ++ ( Sederhana teruk).
3. 1-10 parasit dalam 1 field filem darah tebal - +++ ( Teruk).
4. 1-100 parasit dalam 1 field filem darah tebal - ++++ (Sangat teruk).
11. OVA DAN SISTA FESES (STOOL OVA AND CYST)
200
Ujian Ova Dan Sista Feses
Prinsip:
Konsentrasi formalin-eter merupakan teknik sediment yang memerhatikan telur helmint, larva
dan sista protozoa. Teknik ini sangat cepat dan mempunyai kebaikan dimana lipid dan bahan
kolisidal dapat disingkirkan dan memberikan sediment yang jernih.
Peralatan yang diperlukan:
i) Mikroskop
ii) Pengempar
iii) Slaid
iv) Sisip kaca
v) 10% formalin
vi) Eter
vii) Kayu aplikator
viii) Tabung uji.
Prosedur:
1. Spesimen diterima, diperiksa dan dilabel.
2. Sedikit sampel feses diambil menggunakan kayu aplikator dan dimasukkan ke
dalam tabung uji.
3. Air dimasukkan sehingga 10-12 ml dan digaul.
4. Suspensi tersebut ditapis dengan kain kasa untuk menyingkirkan benda-benda
asing.
5. Suspensi tersebut kemudiaannya dicuci dua kali dengan mengemparnya pada
kelajuan pengempar 2000rpm selama 2 minit.
6. Selepas itu, supernatan dibuang dan sediment diambil. Sebanyak 10 ml 10%
formalin ditambah pada sediment tersebut dan digaulkan sehingga sebati.
7. 5ml eter ditambah dan tabung uji ditutup dan digoncang secara berterusan selama
30 saat.
8. Tabung uji diempar selama 2 minit pada kelajuan 2000rpm.
9. Supernatant dibuang dan setitik sediment diambil dan dititiskan pada slaid kaca
untuk pemerhatian bawah mikroskop.
10. Pemerhatian dilaporkan.
201
Keputusan:
1. Positif – telur, larva dan sista kelihatan.
2. Negatif – tiada telur, larva dan sista kelihatan
202
LAMPIRAN
203
Architect Plus C4000 Abbott Miditron Junior II
one step pregnancy test roche hitachi cobas c311
cobas h 232 poc system
BD Bactec 9050