Uji Sensitivitas Perasan Daun Alpokat

8/20/2019 Uji Sensitivitas Perasan Daun Alpokat

1/61


2/61


3/61


4/61

ABSTRAK

Penelitian ini berjudul “Uji Sensitivitas Perasan Daun Alpukat (Persea

ameri cana mi ll er ) Terhadap Pseudomonas sp Metode Invitro” yang bertujuan

untuk mengetahui pengaruh perasan daun alpukat terhadap pertumbuhan

Pseudomonas sp. Penelitian ini di lakukan pada tanggal 20 Februari s/d 23

Februari 2012 di laboratorium Mikrobiologi Akademi Analis Kesehatan Banda

Aceh, sampel penelitian ini adalah daun alpukat dengan konsentrasi 100%, 80%,

60%, 40% dan 20% dengan rancangan secara eksperimen dengan melakukan

perlakuan percobaan terhadap pengaruh pertumbuhan Pseudomonas sp dengan

tiga kali pengulangan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa air perasan daun

alpukat pada konsentrasi 100%, 80%, 60%, 40% tidak terdapat pertumbuhan

Pseudomonas sp. Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa air perasandaun alpukat pada konsentrasi 100% bersifat bakterisida sedangkan pada

konsentrasi 80%, 60%, dan 40% bersifat bakteriostatik, sehingga air perasan

daun alpukat dapat di jadikan obat untuk infeksi yang di sebabkan oleh

Pseudomonas sp.

Sumber bacaan : 18 buku dan 4 internet

Tahun : 1982 - 2010

i


5/61

KATA PENGANTAR

Syukur Alhamdulillah penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, yang telah

memberikan rahmat dan hidayahNya kepada penulis, sehingga penulis dapat

menyelesaikan Karya Tulis Ilmiah yang berjudul “Uji Sensitivitas Perasan Daun

Alpukat (Persea americana miller) Terhadap Pseudomonas sp Metode

Invitro”

Shalawat dan salam, penulis persembahkan kepangkuan Alam Nabi Besar

Muhammad SAW. Karena dengan kerasulannyalah telah dapat mengangkat harkat

dan martabat umat manusia dari alam kebodohan ke alam yang berilmu

pengetahuan yang kita rasakan seperti saat ini, Amin.

Ucapan terima kasih kepada :

1. Bapak Badlisyah, S.Ag, S.Pd, M.Pd sebagai Direktur Pendidikan Diploma

III Analis Kesehatan Banda Aceh.

2.

Ibu Erlinawati, SKM, M.Kes sebagai Dosen Pembimbing I dan Ibu

Fitriana, S.Pd, M. Si sebagai Dosen Pembimbing II.

3.

Ibu Darmawati, S.Pd, MT sebagai dosen penguji.

4. Bapak dan Ibu Dosen serta Tenaga Administrasi di Akademi Analis

Kesehatan Banda Aceh.

5. Teristimewa kepada ayahanda HalidanSyah, S.Pd dan Ibunda tercinta Siti

Arfah telah membesarkan dan mendidik dengan kasih sayang.

ii


6/61

6.

Sahabat-sahabatku yang telah membantu dan memberi motivasi dalam

penyusunan Karya Tulis Ilmia ini.

Akhir kata hanya kepada Allah SWT tempat berserah diri dan semoga

rahmat dan Karunina-Nya dilimpahkan kepada kita semua.

Amin Ya Rabbal „Alamin.

Banda Aceh, Januari 2012

Penulis

iii


7/61

DAFTAR ISI

ABSTRAK ........................................................................................................... i

KATA PENGANTAR ......................................................................................... ii

DAFTAR ISI ........................................................................................................ iv

DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... vii

DAFTAR TABEL ............................................................................................... viii

BAB I : PENDAHULUAN ................................................................ 1

A. Latar Belakang Masalah ....................................................... 1

B. Rumusan Masalah .................................................................. 3

C. Hipotesis ................................................................................ 3

D. Tujuan Penelitian .................................................................. 4

E. Manfaat Penelitian ................................................................. 4

BAB II : TINJAUAN KEPUSTAKAAN ........................................... 5

A. Daun Alpukat ......................................................................... 5

1. Taksonomi Daun alpukat ................................................ 5

2. Kandungan Daun Alpukat ............................................... 6

3.

Manfaat Daun Alpukat .................................................... 7

B. Pseudomonas sp .................................................................... 7

1.

Klasifikasi ........................................................................ 7

2.

Morfologi ........................................................................ 8

3. Sifat Biakan .................................................................... 8

4. Daya Tahan ..................................................................... 9

iv


8/61

5.

Struktur Antigenic ........................................................... 9

6.

Patogenesis dan patologi ................................................. 9

7. Variabel-variabel Penelitian ............................................ 11

8. Kerangka Konsep ............................................................ 11

9. Defisiensi Operasional Variabel ...................................... 11

BAB III : METODOLOGI PENELITIAN ......................................... 13

A. Metode Penelitian........................................................... 13

B.

Tempat dan Waktu Penelitian ........................................ 13

1.Tempat Penelitian........................................................ 13

2.Waktu Penelitian ......................................................... 13

C. Populasi dan Sampel ..................................................... 13

1.Populasi ....................................................................... 13

2.Sampel ......................................................................... 13

D. Teknik Pengumpulan Data ............................................. 14

E. Prosedur Kerja ................................................................ 14

1.

Alat-alat .................................................................... 14

2.

Media dan Reagensia ............................................... 14

3.

Sampel ...................................................................... 15

4. Cara Kerja ................................................................ 15

a. Pembuatan Air Perasan Daun Alpukat ................. 15

b. Perlakuan Kuman ................................................. 15

F. Pengolahan Data............................................................. 17

G. Analisa Data ................................................................... 17

vi


9/61


10/61

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran I : Gambar 1.1 dan 1.2 Daun alpukat .......................................... 26

Gambar 1.3 dan 1.4 Media MCA ........................................... 27

Gambar 1.5 dan 1.6 Pewarnaan gram Pseudomonas ............. 28

Gambar 1.7 Tes Katalase, H2O2 3% (Pehidrol) ...................... 29

Gambar1.8 Tes Oksidase (PADAM-H 1%) ........................... 29

Gambar 1.9 Reaki Biokimia (API 20 NE) ............................. 30

Gambar 1.10 Sensitivitas ........................................................ 30

Lampiran II : Pembuatan Media .................................................................... 31

Lampiran III : Pewarnaan Gram ..................................................................... 33

Lampiran IV : Tes enzimatis ........................................................................... 35

Lampiran V : Cara Kerja Reaksi Biokimia (API 20 NE) ............................... 36

Lampiran VI : Cara Kerja Alat ....................................................................... 38

Lampiran VII : Rumus Pengenceran Sampel ................................................... 41

Lampiran VIII : Skema Kerja ............................................................................ 42

Lampiran IX : Rata – rata zona hambat obat anti mikroba Ciprofloxasin

(kontrol positif + )terhadap bakteri Pseudomonas sp ............ 44

Lampiran X : Rancangan Anggaran Biaya ................................................... 45

Lampiran XI : Jadwal penelitian .................................................................... 46

viii


11/61

DAFTAR TABEL

Tabel 1 : Rata-rata zona hambat konsentrasi air perasan daun

alpukat terhadap bakteri Pseudomonas sp ........................... 18

Tabel 2 : Hasil reaksi biokimia (API 20 NE) ........................................ 37

Tabel 3 : Rata-rata zona hambat obat anti mikroba Ciprofloxasin

terhadap bakteri Pseudomonas sp ........................................ 44

ix


12/61


13/61

dan subtropis beriklim sejuk dan basah. Perbanyakan tanaman alpukat dengan biji

dan okulasi pada tanah gembur dan subur (Mursito, 2007 : 40).

Buah alpukat ( Persea americana miller) memiliki kandungan lemak cukup

tinggi, yakni berkisar antara 4% - 5% tergantung pada varietasnya, tingkat

ketuaan, dan lokasi tumbuhnya. Buah alpukat mengandung banyak vitamin A, B,

E, serta mineral yang umumnya lebih tinggi dari pada buah-buahan lain. Nilai

kolori buah alpukat ( Persea americana miller ) hampir tiga kali kalori buah pisang

ambon. Buah alpukat ( Persea americana miller ) bahkan dinyatakan baik bagi

penderita penyakit kencing manis (diabetes melithus) dan kolesterol tinggi. Selain

itu, bagian-bagian tanaman seperti daun dan biji memiliki daya terapik yang dapat

menyembuhkan beberapa penyakit (Kanisius, 1997 : 19).

Daun alpukat ( Persea americana miller) rasanya pahit berkhasiat sebagai

diuretik dan menghambat pertumbuhan beberapa bakteri seperti Staphylococcus

sp, Pseudomonas sp, Proteus sp, Escherichea sp, dan Bacillus sp. Selain itu,

berkhasiat untuk menyembuhkan kencing batu, darah tinggi, dan sakit kepala.

Daun yang dibuat teh dapat menyembuhkan nyeri saraf, nyeri lambung, bengkak

saluran pernapasan dan haid tidak teratur. Biji berkhasiat sebagai anti radang,

menghilangkan rasa sakit, menyembuhkan sariawan mulut, dan mengatasi

diabetes melitus. Bubuk biji dapat menyembuhkan bengkak karena radang

(Tersono, 2008 : 42).

Kandungan zat aktif yang terdapat di daun alpukat ( Persea americana

miller ) adalah flavonoid dan quersetin (Mursito, 2007 : 41).

2


14/61

Pseudomonas merupakan bakteri gram negatif, aerobik. Beberapa galur

memperoduksi pigmen larut air. Pseudomonas tersebar luas pada tanah, air,

tanaman, dan hewan. Pseudomonas aeruginosa sering ada dalam jumlah sedikit

pada flora normal usus dan kulit manusia. Pseudomonas aeruginosa merupakan

patogen utama dari spesiesnya.

Organisme ini merupakan penyebab 10-20% infeksi nosokimial,

Pseudomonas sp menyebabkan infeksi pada luka dan luka bakar, menghasilkan

nanah warna hijau (Brook dkk, 2001 : 371).

B. Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas, maka ingin diketahui apakah perasan

daun alpukat ( Persea americana miller) dalam berbagai konsentrasi bersifat anti

bakteri secara in vitro.

C. Hipotesis

1. Hipotesis nihil (Ho) : Perasan daun alpukat ( Persea americana miller)

tidak bersifat bakteriostatik terhadap bakteri Pseudomonas sp secara

Invitro.

2.

Hipotesis kerja (H1) : Perasan daun alpukat ( Persea americana miller)

bersifat sebagai zat bakteriostatik terhadap bakteri Pseudomonas sp secara

Invitro.

3


15/61


16/61

BAB II

TINJAUAN KEPUSTAKAAN

A. Daun Alpukat

1. Taksonomi Daun Alpukat

Berdasarkan taksonominya tanaman ini dapat diklasifikasikan

sebagai berikut:

Kerajaan : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Subdivisi : Angiospermae

Kelas : Dicotyledonae

Ordo : Laurales

Family : Lauraceae

Genus : Persea

Spesies : Persea americana miller

(Kanisius, 1997 : 17).

Daun tumbuh berdesakan di ujung ranting. Bentuk daun ada yang

bulat telur atau menjorong dengan panjang 10-20 cm, lebar 3 cm, dan

panjang tangkai 1,5-5 cm. bunga berbentuk malai, tumbuh dekat ujung

ranting dengan jumlah banyak, garis tengah 1-1,5 cm, warna putih

kekuningan, berbulu halus. Buah berbentuk bola berwarna hijau atau hijau

kekuningan dan biji berbentuk bola (Tersono, 2008 : 42).

5

http://id.wikipedia.org/wiki/Planthttp://id.wikipedia.org/wiki/Planthttp://id.wikipedia.org/wiki/Planthttp://id.wikipedia.org/wiki/Plant


17/61

Daun merupakan bagian tanaman yang berfungsi untuk

mempertahankan kehidupan mengingat fungsinya tersebut, maka alat ini

sering disebut dengan alat vegetatif, pada batasnya terdapat daun

berbentuk tunggal dan tersusun dalam bentuk spiral. Daun alpukat disebut

daun tidak lengkap karena hanya terdiri dari tangkai dan helaian saja,

tanpa upih atau pelepah daun. Bagian tanaman yang berfungsi sebagai alat

pengambilan dan pengolahan zat-zat makanan serta alat penguapan air dan

pernapasan, daun berwarna hijau tua dan pucuk hijau muda sampai agak

kemerahan (Indriani dan Sumiarsih, 1992 : 2).

2. Kandungan Daun alpukat

Kandungan zat aktif yang terdapat di daun alpukat ( Persea america

miller ) adalah flavonoid, quersetin (Mursito, 2007 : 41).

Flavonoid dalam tubuh manusia berfungsi sebagai antioksidan

sehingga sangat baik untuk mencegah kanker. Manfaat flavonoid antara

lain adalah untuk melindungi struktur sel, meningkatkan efektivitas vitamin

C, anti inflamasi, mencegah keropos tulang, dan sebagai antibiotik.

Flavonoid dapat berperan secara langsung sebagai antibiotik dengan

menggangu fungsi dari mikroorganisme seperti bakteri dan virus.

Quersetin adalah senyawa kelompok flavonol terbesar, quersetin

dan glikosidannya berada dalam jumlah sekitar 60-75% dari flavonoid.

Quersetin dipercaya dapat melindungi tubuh dari beberapa jenis penyakit

degenerative dengan cara mencegah terjadinya proses peroksidasi lemak.

6


18/61

Quersetin memperlihatkan kemampuan mencegah proses oksidasi dari Low

Density lipoproteins (LDL) dengan cara menangkap radikal bebas dan

menghelat ion logam transisi (www.q=flavonoid+quersetin).

3. Manfaat Daun Alpukat

Daun alpukat dimanfaatkan untuk kencing batu, darah tinggi, sakit

kepala, nyeri syaraf, nyeri lambung, saluran napas membengkak (bronchial

swellings), menstruasi tidak teratur (Yuniarti, 2008 : 24).

Menurut (Maryani dan Suharmiati, 2003 : 23) untuk memperlancar

pengeluaran air seni, penghancuran air seni, penghancuran batu saluran air

kemih, dan obat sariawan. Hasil percobaan farmakologi menunjukan

bahwa infus daun alpukat mempunyai daya melarutkan batu saluran

kemih. Di samping itu infus tersebut mempunyai aktifitas sebagai anti dan

menghambat pertumbuhan spesies Pseudomonas.

B. Pseudomonas

1. Klasifikasi

Ordo : Pseudomonadales

Famili : Pseudomonadaceae

Tribel : Pseudomonadae

Genus : Pseudomonas

Spesies : a. Pseudomonas aoruginosa

b. Pseudomonas flurescent

7


19/61


20/61

4. Daya Tahan

Pseudomonas aeruginosa lebih resisten terhadap desinfektan dari

kuman lain. Kuman ini menyenangi hidup dalam suasana lembab seperti

pada peralatan pernapasan, air dingin, lantai, kamar mandi, tempat air dan

lain nya. Air mendidih dapat membunuh kuman ini (Sajudi, 1993 : 178).

5. Struktur Antigenik dan Toksin

Pili (fimbriae) menonjol dari permukaan sel dan pungsi untuk

perlekatan pada epitel inang. Kapsul polisakarida menyebabkan bentuk

mukoid dari koloni yang dipisahkan dari pasien dengan kista fibrosis.

Liposakarida yang ada dalam beragam bentuk antigenik, bertanggung

jawab pada sifat endotoksin organisme.

Banyak galur Pseudomonas aeruginosa memperoduksi eksotoksin

A yang menyebabkan jaringan nekrosis dan jika bentuk murni di suntikkan

pada binatang bisa mematikan. Toksin memblok sintesis protein dengan

sebuah mekanisme yang identik dengan toksin difteria, meskipun struktur

kedua toksin tidak identik. Antitoksin terhadap eksotoksin A ditemukan di

beberapa serum manusia, termasuk pada pasien yang sembuh dari infeksi

Pseudomonas aeruginosa (Brooks dkk, 2005 : 373).

6. Patogenesis dan Patologi

Pseudomonas aeruginosa menjadi patogenik hanya jika berada

pada tempat dengan daya tahan tidak normal, misalnya di selaput lendir

9


21/61

dan kulit yang rusak akibat kerusakan jaringan, jika menggunakan kateter

pembuluh darah atau saluran kencing, atau pada neutropedia. Seperti

khemoterapi kanker. Bakteri menempel dan menyerang selaput lendir atau

kulit, menyebar dari tempat tersebut, dan berakibat penyakit sistemik

(Brooks,dkk, 2005 : 373).

Mikroorganisme ini dapat menyebabkan bahaya di rumah sakit

pada masa yang akan datang karena kemampuannya untuk hidup pada

berbagai temperatur, resisten terhadap antibiotika, resisten terhadap

desinfektan yang lemah, mampu mengkotaminasi cairan steril, sumbat

botol, tetesan mata, salep, alat pelembab ventilator mekanik dan inkubator

bayi (Gibson, 1996 : 25-26).

Bakteri seperti Staphylococcus, Proterius, Pseudomonas,

Escherichia coli, dan Enterobakter Klebsiella mendapatkan kondisi yang

optimal untuk tumbuh pada luka bakar. Eskar pada luka bakar merupakan

krusta yang nonviabel tanpa suplai darah sehingga tidak ada satu pun dari

leukosit polimorfonukleus (PMN) atau antibodi yang dapat menjangkau

daerah tersebut. Bakteri dengan jumlah yang luar biasa yaitu, lebih dari

satu milyar per gram jaringan dapat timbul dengan selanjutnya menyebar

kedalam aliran darah atau melepaskan toksinnya mencapai tempat-tempat

yang jauh (Smeltzer dan Brenda, 2001 : 1933).

10


22/61

7. Variabel-Variabel Penelitian

1.

Variabel bebas/ pengaruh : perasan daun alpukat ( Persea americana

miller ) konsentrasi 100%, 80%, 60%, 40% dan 20% sebagai zat

bakteriostatik.

2. Variabel tidak bebas/ terpengaruh : sensitivitas bakteri Pseudomonas

sp.

8.

Kerangka Konsep

Independent Dependent

9. Defenisi Operasional Variabel

Sensitivitas : Keadaan rentan terhadap suatu obat atau antigen

dalam mikrobiologi test yang dilakukan untuk

menentukan sensitivitas atau resistensi suatu

mikroorganisme terhadap berbagai macam obat

antimikroba (Brooker, 2001: 379).

Intermediate : Terletak diantara, menyisip sebagian, menyerupai

setiap dua perbedaan (Dorland, 1998: 562).

Resisten : Derajat perlawanan terhadap suatu aksi (Brooker,

2001: 360).

Perasan daun alpukat

(Persea ameri cana mil ler )

Konsentrasi 100%, 80%,

60%, 40%, 20%

Sensitivitas

Pseudomonas sp

11


23/61

Bakteriostatik :Menghambat atau menghentikan pertumbuhan

bakteri (FKUS, 2009 : 599).

Bakterisida : Bersifat membunuh bakteri. Dalam hal ini jumlah

bakteri akan berkurang atau habis, tidak terdapat

lagi perkembangbiakan mikroba (FKUS, 2009 :

599).

In vitro : Proses atau reaksi yang dilakukan dalam tabung

percobaan dalam laboratorium atau secara

harfiahnya berarti “dalam kaca” se perti dalam

tabung laboratorium (Hinchliff, 1999: 239).

Perasan : Sari (berbentuk cairan).

Pseudomonas :Bakteri gram negatif bersifat aerobik,

memproduksi pigmen yang larut dalam air dan

dapat menyebabkan penyakit (Brooks dkk, 2001 :

371).

Antibiotik :Subtansi kimia yang di hasilkan oleh suatu

mikroorganisme, yang mempunyai kemampuan

untuk menghambat atau membunuh

mikroorganisme lain (Dorland, 1998: 63).

12


24/61


25/61


26/61

3. Sampel

Daun alpukat dan stamp bakteri Pseudomonas sp.

4. Cara Kerja

A. Pembuatan air perasan daun alpukat ( Persea americana miller )

1) Daun alpukat ditimbang sebanyak 100 gram dan dibersihkan.

2) Selanjutnya di haluskan dan di saring dengan kain kasa steril, maka

di peroleh konsentrasi 100%, masukkan ke dalam tabung reaksi I.

3)

Tabung reaksi II di isi 4 ml perasan daun alpukat, tambah 1 ml

NaCl (konsentrasi 80%).

4) Tabung reaksi III di isi 3 ml perasan daun alpukat, tambah 2 ml


5)

Tabung reaksi IV di isi 2 ml perasan daun alpukat, tambah 3 ml


6) Tabung reaksi V di isi 1 ml perasan daun alpukat, tambah 4 ml


B. Perlakuan kuman

1) Diambil kuman dari media biakan dan tanam kemedia MHA dan

MCA.

15


27/61


28/61


29/61

BAB IV

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Penelitian

Setelah dilakukan penelitian uji sensitivitas perasan daun alpukat terhadap

Pseudomonas sp, maka hasilnya dapat dilihat pada tabel dibawah ini :

Tabel 1. Rata-rata zona hambat konsentrasi air perasan daun alpukat terhadap

bakteri Pseudomonas sp.

NO Konsentrasi P1 P2 P3 Rata-rata zona hambat

(mm)

keterangan

1 100% 25 20 25 23 S

2 80% 22 18 20 20 I

3 60% 18 15 16 16 I

4 40% 15 13 14 14 R

5 20% 12 11 10 11 R

6 Ciprofloxasin 21 21 21 21 S

7 NaCl 0 0 0 0 RSumber : Hasil penelitian 2012

Keterangan :

Ciprofloxasin : Kontrol positif S= Sensitif

NaCl : Kontrol negatif I= Intermediate

P1,P2,P3 : Percobaan 1,2,3 R= Resisten

18


30/61

Dari tabel di atas dapat di lihat bahwa air perasan daun alpukat pada

konsentrasi 100% bersifat bakteriosida terhadap Pseudomonas sp dengan diameter

zona hambat (23 mm).

B. Pembahasan

Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian air perasan daun alpukat

dapat mempengaruhi pertumbuhan Pseudomonas sp secara in vitro. Zona hambat

yang terbentuk berupa daerah terang yang tidak memperlihatkan adanya

pertumbuhan bakteri di sekitar perasan daun alpukat. Kemampuan dari air perasan

daun alpukat tersebut membuktikan bahwa air perasan daun alpukat mengandung

zat anti bakteri.

Zona hambat yang terbentuk pada konsentrasi 100% (23 mm) dinyatakan

sensitif, konsentrasi 80% (20 mm) dinyatakan intermediate, 60% (16 mm) dan

40% (14 mm) dan 20% (11 mm) dinyatakan resisten terhadap pertumbuhan

Pseudomonas sp.

Zat anti bakteri adalah zat yang dapat mengganggu pertumbuhan dan

metabolisme bakteri. Berdasarkan aktifitasnya zat anti bakteri dapat di bedakan

menjadi dua, yaitu yang memiliki aktifitas membunuh (bakterisida) dan aktifitas

yang dapat menghambat pertumbuhan (bakteriostatik). Dalam hal ini perasan

daun alpukat termasuk bakteriostatik, akan tetapi zat antibakteri dapat bersifat

bakteriostatik pada konsentrasi 40%, 60%, dan 80%, namun bersifat bakterisida

pada konsentrasi 100%.

19


31/61

Daun alpukat ( Persea americana miller) rasanya pahit berkhasiat sebagai

diuretik dan menghambat pertumbuhan beberapa bakteri seperti Staphylococcus

sp, Pseudomonas sp, Proteus sp, Escherichea sp, dan Bacillus sp. Selain itu,

berkhasiat untuk menyembuhkan kencing batu, darah tinggi, dan sakit kepala.

Daun yang dibuat teh dapat menyembuhkan nyeri saraf, nyeri lambung, bengkak

saluran pernapasan dan haid tidak teratur (Tersono, 2008 : 42).

Kandungan zat aktif yang terdapat di daun alpukat ( Persea americana

miller ) adalah flavonoid dan quersetin. Flavonoid dalam tubuh manusia berfungsi

sebagai antioksidan sehingga sangat baik untuk mencegah kanker. Manfaat

flavonoid antara lain adalah untuk melindungi struktur sel, meningkatkan

efektivitas vitamin C, anti inflamasi, mencegah keropos tulang, dan sebagai

antibiotik. Flavonoid dapat berperan secara langsung sebagai antibiotik dengan

menggangu fungsi dari mikroorganisme seperti bakteri dan virus

(www.q=flavonoid+quersetin).

Dalam penelitian ini di gunakan bakteri Pseudomonas sp sebagai sampel

yang ditanam ke media MHA (Mueller Hinton Agar) dan media MCA (Mac

conkey Agar). Media MHA untuk melihat fruescan bakteri Pseudomonas yang

berwarna hijau dan media MCA untuk melihat morfologi bakteri Pseudomonas.

Pseudomonas sp merupakan penyebab 10-20% infeksi nosokomial,

Organisme ini menyebabkan infeksi pada luka dan luka bakar, dan menghasilkan

nanah yang berwarna hijau (Brook dkk, 2001 : 371).

20


32/61

Antibotik yang di gunakan dalam penelitian ini adalah Ciprofloxasin, yaitu

sepotongan senyawa baik alami maupun sentetik yang mempunyai efek menekan

atau menghentikan proses biokimia pada organisme khusus dalam proses infeksi

oleh bakteri, antibiotik ini bekerja dengan menekan satu mata rantai metabolisme

bakteri sehingga ampuh membunuh dan menghambat bakteri Pseudomonas sp.

21


33/61

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Setelah dilakukan penelitian uji sensitivitas perasan daun alpukat

( Persea americana miller ) terhadap pertumbuhan bakteri Pseudomonas sp dengan

beberapa konsentrasi yaitu :

1.

Perasan daun alpukat konsentrasi 20% dengan zona hambat (11 mm).

2. Perasan daun alpukat konsentrasi 40% dengan zona hambat (14 mm).



5.

Perasan daun alpukat konsentrasi 100% dengan zona hambat (23 mm).

6. Ciprofloxasin sebagai control positif dengan zona hambat (21 mm).

7. NaCl sebagai control negatif dengan zona hambat (0 mm).

Hasil pengamatan diameter zona hambat pertumbuhan Pseudomonas sp

akibat pemberian air perasan daun alpukat dengan konsentrasi 100%, 80%, 60%,

40% dan 20%, menunjukkan bahwa diameter zona hambat Pseudomonas sp dapat

di pengaruhi oleh pemberian air perasan daun alpukat pada berbagai konsentrasi

dan ada yang tidak dapat melebihi ukuran diameter zona standar sensitif

Ciprofloxasin ≥ 21 mm. Maka dapat di simpulkan bahwa air perasan daun alpukat

konsentrasi 100% bersifat bakteriostatik terhadap pertumbuhan Pseudomonas sp.

22


34/61

B. Saran

1.

Air perasan daun alpukat dapat di rekomendasikan sebagai bahan obat, selain

fungsinya sebagai anti bakteri dan mudah di dapat pada daerah tropis.

2. Sebaiknya masyarakat yang menggunakan daun alpukat lebih baik dengan

konsentrasi 100% karena lebih banyak khasiatnya.

Perlu penelitian selanjutnya untuk mengetahui efektifitas terhadap

mikroorganisme lain.

23


35/61

DAFTAR PUSTAKA

Brooks, Geo F, Janet S. Buntel, dan Stephen A.Morse. Mikrobiologi

Kedokteran. Jakarta : Selemba Medika, 2005.

Dorland. Kamus Saku Kedokteran. Jakarta: EGC, 1998.

FKUS. Kumpulan Kuliah Farmakologi. Jakarta : EGC, 2009.

Gibson, J.M. Mikrobiologi dan Patologi Modern untuk Perawat. Jakarta :EGC, 1996.

Hinchhliff, Sue. Kamus Keperawatan. Jakarta: EGC, 1999.

Indrayani, Hetty Y. Sumiarsih, Emi. Alpukat. Jakarta : Penebar Swadaya, 1992.

Kanisius. Budidaya Dan Pemanfaatan Alpukat. Yogyakarta, 1997.

Mursito, Bambang. Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Jantung. Jakarta :

Penebar Swadaya, 2007.

Notoatmodjo, Sekidjo. Metodologi Penelitian Kesehatan. Jakarta : Rineka

cipta,2002.

Santosa, Noegroho Imam. Instrumen Laboratorium Kesehatan. Jakarta:

Departemen Kesehatan, 1995.

Smeltzer, Suzanne C. Brenda G. Bare. Buku Ajar Keperawatan Medikal-

Bedah. Jakarta : EGC, 2001.

Soemarno. Isolasi dan identifikasi bacteri klinik . Akademi Analis KesehatanYogyakarta, 2000.

Sujudi. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta. 1993.

Sunarjono, Hendro. Berkebun 21 Jenis Tanaman Buah. Jakarta : Penebar

Swadaya, 2008.

Tersono, Lukas. Tanaman Obat Dan Jus Untuk Mengatasi Penyakit Jantung,

Hipertensi, Kolesterol, Dan Stroke. Jakarta : Agromedia pustaka, 2008.

Wikipedia, www.q=flavonoid+quersetin,2011

24


36/61

Wikipedia, http://shortcut”daun alpukat.com 2011.

Wikipedia, http.wikipedia//translate/Microbelibrary.org 2011.

Wikipedia, http://karnegiefoundation/Knowledge Media Lab.org.

Yuniarti, Titin. Ensiklopedia Tanaman obat Tradisional. Yogyakarta :

Pressindo, 2008.

Yunus, Zulkifli. Buku Pelajaran Bakteriologi Klinik. Untuk Sekolah Analis

Kesehatan Banda Aceh. 1982.

Zulfendi. Penuntun Pratikum Bakteriologi. Banda Aceh : Akademi Analis

Kesehatan, 2010.

25

http://xn--shortcutun-070o/http://xn--shortcutun-070o/http://xn--shortcutun-070o/http://www.carnegiefoundation.org/kml/http://www.carnegiefoundation.org/kml/http://www.carnegiefoundation.org/kml/http://www.carnegiefoundation.org/kml/http://xn--shortcutun-070o/


37/61


38/61

Gambar 1.3 Media MCA ( Mac conkey Agar )

(http.wikipedia//translate/Microbelibrary.org)

Gambar 1.4 Koloni Pseudomonas sp pad media MCA(mac conkey Agar)

(Sumber : hasil penelitian 2012)

27


39/61

Gambar 1.5 Bakteri Pseudomonas sp pada pewarnaan Gram

(http://karnegiefoundation/Knowledge Media Lab.org)

Gambar 1.6 Bakteri Pseudomonas sp pada pewarnaan Gram

(http://karnegiefoundation/Knowledge Media Lab.org)

28

http://www.carnegiefoundation.org/kml/http://www.carnegiefoundation.org/kml/http://www.carnegiefoundation.org/kml/http://www.carnegiefoundation.org/kml/http://www.carnegiefoundation.org/kml/http://www.carnegiefoundation.org/kml/http://www.carnegiefoundation.org/kml/http://www.carnegiefoundation.org/kml/


40/61

Gambar 1.7 Test Katalase (+) positif, H2O2 3% (Perhidrol)

(Sumber : hasil Penelitian 2012)

Gambar 1.8 Test Oksidase (+) Positif (PADAM-H 1%)

(Sumber : hasil Penelitian 2012)

29


41/61


42/61

LAMPIRAN II

Cara Pembuatan Media

A. Media MCA (MERCK)

Komposisi:

Peptone from casein : 17,0 gr

Peptone from meat : 3,0 gr

Sodium chioride : 5,0 gr

Lactose : 10,0 gr

Bile salt mixture : 1,5 gr

Neutral red : 0,03 gr

Crystal violet : 0,001 gr

Agar-agar : 13,5 gr

Cara membuat :

1.

Di timbang media MCA sebanyak 1.25 gram dan masukkan ke dalam

Erlenmeyer.

2.

Kemudian di tambahkan aquadest sebanyak 25 ml dan di panaskan di atas

penagas sambil di aduk dengan tangkai pengaduk.

3. Setelah itu Erlenmeyer tersebut di bungkus dengan kertas, lalu disterilkan

ke dalam Autoklave selama 15 menit, pada suhu 121˚ C atau tekanan 0,5

atm, setelah selesai di tunggu dingin.

4. Selanjutnya di bagi-bagikan ke Petridish.

31


43/61

B. Media NaCl Fisiologis

1.

Media NaCl ditimbang sebanyak 8,5 gram, kemudian dimasukkan

kedalam erlenmeyer.

2. Ditambahkan 1000 ml aquadest, aduk hingga homogen dan panaskan

sampai mendidih.

3. Diangkat, bungkus dengan kertas lalu di sterilkan kedalam autoclave pada

suhu 121˚ C selama 15 menit kemudian angkat.

4.

Dinginkan, NaCl siap untuk digunakan.

C. Media MHA (MERCK)

Infusion from meat : 2,0 gr

Casein hydrolysate : 17,5 gr

Starch : 1,5 gr

Agar-agar : 13,0 gr

Cara membuat :

1.

Di timbang media MHA sebanyak 1,3 gram dan masukkan ke dalam

Erlenmeyer.

2.

Kemudian di tambahkan aquadest sebanyak 100 ml dan di panaskan di

atas penagas sambil di aduk dengan tangkai pengaduk.

3. Setelah itu Erlenmeyer tersebut di bungkus dengan kertas, lalu disterilkan

ke dalam Autoklave selama 15 menit, pada suhu 121˚ C atau tekanan 0,5

atm, setelah selesai di tunggu dingin.

4. Selanjutnya di bagi-bagikan ke Petridish.

32


44/61

LAMPIRAN III

Pewarnaan Gram

A. Reagensia

1. Amonium kristal violet

2. Lugol

3.

Alkohol

4.

Karbon Fukhsin

5.

Oil Imersi

B. Cara Kerja

1. Diteteskan satu tetes aquadest pada objek glass yang bersih dan bebas

lemak, beri etiket.

2. Diambil satu ose kuman dan dicampur sampai rata, keringkan pada suhu

kamar, setelah kering difiksasi 2- 3 kali.

3.

Kemudian berilah Amonium Kristal Violet, sehingga menutupi seluruh

permukaan olesan bakteri, dibiarkan selama 30 – 60 detik.

4.

Larutan amonium kristal violet dibuang dan segera diberikan larutan lugol

dibiarkan selama 30 – 60 detik.

5. Sediaan dibilasi dengan air / aquadest hingga bersih (zat warna tersebut

tidak larut lagi).

6. Sediaan diberikan larutan alkohol dan dibiarkan selama 15 – 20 detik.

7. Sediaan dibilasi dengan air hingga bersih.

33


45/61


46/61


47/61

LAMPIRAN V

Reaksi Biokimia ( API 20 NE )

A. Cara keja

1. Dipersiapkan suspensi bakteri setara dengan 0,5 mc farland dengan cara

memasukkan 1- 4 koloni bakteri muda bakteri ke dalam 5 mL Nacl 0.85

% steril.

2.

Dipersiapkan baki API 20NE dengan cara memasukkan air sampailekukan penuh. Taruhlah satu secarik API 20NE di dalam.

3.

Masukkan segera ke dalam setiap cangkir NO3 s/d PNPG suspensi sampai

ke dasar permukaan saja ( setengah saja )

4. Dari suspensi ini ambil 7-10 tetes atau 200 UL masukkan kedalam API

AUX medium 7 ml.

5. Masukkan campuran ini kedalm strip API 20 NE yang bertanda garis

merah sampai penuh.

6.

Tambahlah minyak steril ( paraffin oil ) pada lubang yang bergaris bawah

( GLU, ADh dan URE ).

7. Tutuplah baki dan inkubasi suhu 29oC ± 2 oC selama 24 jam ± 2 jam .

36


48/61

Tabel 2 : Hasil Reaksi Biokimia ( API 20 NE )

Tes Positif Negatif

NO3 Pink tidak warnaTRP Pink tidak warna

GLU Kuning Biru / hijau

ADH Orange/ pink/ merah Kuning

URE Orange/ pink/ merah Kuning

ESC Abu2/coklat /hitam Kuning

GEL Pigment hitam Tidak ada pigmen hitam

PNPG Kuning Tidak berwarna

GLU Keruh Transparent

ARA Keruh Transparent

MNE Keruh TransparentMAN Keruh Transparent

NAG Keruh Transparent

MAL Keruh Transparent

GNT Keruh Transparent

CAP Keruh Transparent

ADL Keruh Transparent

MLT Keruh Transparent

CIT Keruh Transparent

PAC Keruh Transparent

Oxidase

Sumber : RSUD Dr. Zainoel Abidin 2012

Identifikasi

Hasil disesuaikan dengan buku identifikasi API 20E Analytical Profile Index.

37


49/61

LAMPIRAN VI

1. Autoclave ta-630

Prinsip : Pemanasan atau sterilisasi menggunakan udara lembab (uap)

bertekanan tinggi, dimana uap air ini dapat mengkoagulasikan

protein dari mikroorganisme.

Cara Kerja :

a. Diisi air kedalam bejana sampai setinggi penyangga dan tutup

pengatur airnya.

b. Dimasukkan alat atau bahan yang akan disterilkan.

c. Ditutup dengan rapat.

d.

Diatur temperatur pada suhu 121˚C dengan tekanan 0,5 atm.

e.

Diatur waktu pada 15 menit.

f. Posisikan kester (untuk mensterilkan media) atau ke dry (untuk

mensterilkan alat). Ditutup lubang udaranya.

g. Hidupkan ke ON dan tunggu sampai alarm berbunyi.

h.

Setelah alarm berbunyi, matikan kearah tombol OFF.

i. Buka lubang udara secara perlahan-lahan, buka juga lubang air

agar air dapat keluar.

j.

Tunggu sampai suhu menunjukkan angka nol (0).

k. Buka tutup autoclave dan keluarkan alat-alat atau media yang

sudah disterilkan (Santosa,1995:174-175).

38


50/61

2. Oven Mammert

Prinsip : Sterilisasi menggunakan udara kering panas untuk mencapai

steril

Cara Kerja :

a. Alat-alat atau gelas yang akan dsterilkan harus dalam keadaan

bersih dan kering. Untuk tabung reaksi ditutup dengan kapas,

sedangkan petridish dan alat gelas lain dibungkus dengan

kertas yang tahan panas.

b. Kemudian dimasukkan kedalam oven.

c. Diatur suhu pada 180˚C selama 30-60 menit.

d. Oven ditutup dan diputar ke ON.

e.

Diputar tombol pengatur waktu.

II : untuk waktu yang dibatasi atau ditentukan.

f. Setelah sampai waktunya putar ke OFF dan tunggu dingin

kemudian buka pintu oven untuk mengeluarkan alat-alat yang

sudah disterilkan (Santosa,1995:170).

3. Inkubator Mammert

Prinsip :

Dengan pengatur suhu dan pengatur waktu dapat memeram

mikroorganisme pada suhu yang terkontrol (0oC-120oC) yang memiliki

ketelitian yang tinggi.

39


51/61

Cara kerja :

a.

Hubungkan dengan sumber listrik.

b. ON-kan dengan tanda lampu pilot merah dan kuning menyala.

c. Atur suhu yang dikehendaki hingga lampu hijau menyala.

d. Timer di- ON-kan, masukkan media yang akan diinkubasi.

e. Bila masa pembiakan telah cukup, ambil media dari incubator.

f. Matikan incubator.

g. Putuskan hubungan sumber arus listrik.

40


52/61

LAMPIRAN VII

A. Rumus pengenceran

1. Konsentrasi 80%

K1.V1 = K2.V2

100%.V1 =80%.5 ml

V1 =400 ml : 100

= 4 ml

2.

Konsentrasi 60%

K1.V1 =K2.V2

100%.V1 =60%.5 ml

V1 =300 ml : 100

=3 ml

3. Konsetrasi 40%

K1.V1 =K2.V2

100%.V1 =40%.5 ml

V1 =200 ml : 100

=2 ml

4. Konsentrasi 20%

K1.V1 =K2.V2

100%.V1 =20%.5 ml

V1 =100 ml : 100

=1 ml.

41


53/61

LAMPIRAN VIII

SKEMA KERJA

A.Pembuatan perasan daun alpukat.

5 ml 4 ml 3 ml 2 ml 1 ml

Sampel

1 ml 2 ml 3 ml 4 ml NaCl

1

0

0

%

8

0

%

6

0

%

40

%

2

0

%

42


54/61


55/61

LAMPIRAN IX

Tabel 3. Rata – rata zona hambat obat anti mikroba Ciprofloxasin (kontrol positif

+ )terhadap bakteri Pseudomonas sp.

Anti mikroba Resisten Intermedit Sensitif

Ciprofloxasin ≤15 16-20 ≥21

(Sumber : RSUD Dr. Zainoel Abidin)

44


56/61

LAMPIRAN X

Rancangan Anggaran Biaya

NO Bahan /

Reagensia

Harga / gr Pemakaian Harga/

Kebutuhan

1 MHA Rp. 4.400 / gr 1,3 gr Rp. 5.720

2 MCA Rp. 1.400 / gr 1,25 gr Rp. 1.750

3 Nacl Rp. 650 / gr 8,5 gr Rp. 5.525

4 Aquadest Rp. 5.000 / L 1 liter Rp. 5.000

5 Dp Gram Rp. 20.000 / gr 1 test Rp. 20.000

6 Tes katalase Rp. 1.000 1 test Rp. 1.000

7 Tes Oksidase Rp. 1.000 1 test Rp. 1.000

8 Antibiotik Rp. 35.000 250 ml Rp. 35.000

9 Administrasi Rp. 40.000 Rp. 40.000

Jumlah Rp. 114.965

45


57/61

RENCANA PENELITIAN

JADWAL KEGIATAN PENELITIAN TAHUN 2011 – 2012

NoBulan Desember Januari Februari Maret April Mei Juli

Kegiatan /Minggu Ke I II III IV I II III IV I II III IV I II III IV I II III IV I II III IV I II III IV

1 Pengumpulan Teori

2 Penulisan Proposal

3 Seminar Proposal

4Persiapan Alat dan

Bahan

5 Melakukan Penelitian

6 Penulisan KTI

7 Sidang KTI

46


58/61


59/61


60/61


61/61

Uji Sensitivitas Perasan Daun Alpokat

Documents

Transcript of Uji Sensitivitas Perasan Daun Alpokat

Antiinflamasi Daun Dewa

spt daun majemuk

Daun tunggal (2)

UJI EFEKTIFITAS DAYA ANTHELMINTIK PERASAN DAN INFUSA ...

TINJAUAN NEUROPSIKIATRI PADA TUNALARASstaffnew.uny.ac.id/upload/132326899/pendidikan/materi+kuliah... · depresan). •↑ aliran darah di otak. •↑ sensitivitas SSP. •↑ produktivitas

antiinflamasi daun mengkudu

Khasiat daun sirih

EFEKTIVITAS LARUTAN AIR PERASAN JERUK NIPIS Citrus ... · menggunakan larutan air perasan jeruk nipis konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80% dan 100% sama dengan hasil pemeriksaan menggunakan

Daun Gymnospermae

PENGARUH PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN SALAM, DAUN …digilib.unila.ac.id/54396/3/SKRIPSI TANPA BAB PEMBAHASAN.pdf · pengaruh penggunaan ekstrak daun salam, daun sirih, dan serai sebagai

PERTULANGAN DAUN

uji sensitivitas antibiotik

PENAMBAHAN AIR PERASAN JERUK NIPIS (Citrus aurantifolia …eprints.undip.ac.id/56861/1/Cover.pdf · 2017-10-06 · i penambahan air perasan jeruk nipis (citrus aurantifolia) sebagai

KARYA TULIS ILMIAH UJI EFEK DIURETIK PERASAN …

1 3 4 5 10 Jangan terlalu menekan gagang pada tabung blender.Kerucut perasan jeruk o Saringan perasan jeruk Blender p Cakram dan BilahUnit pisau lepas-pasang untuk blender q Gelas

Anatomi Daun Rev

Efektifitas Ekstrak Daun Kenikir (Cosmos caudatus), Daun ...

Daun Ketum (1)

PENGARUH PERASAN BUAH APEL (Maulus domestica Borkh ...

daun bawang