ALKALINE PHOSPHATASE (ALP)

Oleh :1. Dewa Ayu Yuni Dewantari (P07134013026)2. A A Ayu Trisna Pradnyandari(P07134013028)3. A A Inten Pradnya Suamami(P07134013030)4. Christian Naftali Ranni(P07134013032)5. Ni Gusti Ayu pradnya Dewi (P07134013034)6. I Dewa Gd. Aditya Satria D.P(P07134013036)

KEMENTERIAN KESEHATAN R.IPOLITEKNIK KESEHATAN DENPASARJURUSAN ANALIS KESEHATAN2015

Alkaline Phosphatase (ALP)RingkasanAlkaline phosphatase (ALP) merupakan enzim yang bekerja optimal pada pH basa, yang ada di darah dalam berbagai bentuk yang berbeda yang berasal terutama dari tulang dan hati, tetapi juga dari jaringan lain seperti ginjal, plasenta, testes, timus, paru-paru dan tumor. Peningkatan fisik ditemukan pada waktu pertumbuhan tulang pada masa anak-anak dan kehamilan, sementara peningkatan patologik terutama berkaitan dengan hepatobilier dan penyakit tulang. Dalam penyakit hepatobilier diindikasikan dengan adanya obstruksi saluran empedu seperti dalam kolestasis yang disebabkan oleh batu ginjal, tumor atau peradangan. Aktivitas ALP berlebihan juga dapat ditemukan pada infeksi hepatitis. Pada peyakit tulang aktivitas ALP berlebihan dimulai dari peningkatan aktivitas osteoblastik yang disebut dengan penyakit Paget, osteomalasia (riket), metatastasis tulang dan hiperparatiroidisme.

Metode

ALPKinetik fotometri tes, metode standar optimal berdasarkan German Society of Clinical Chemistry (DGKC)

Prinsipp-Nitrophenylphosphate + H2O ALP Phosphate + p-Nitrophencl

Reagen Komponen dan KonsentrasiR1: Diethanolamine pH 9,8 1,2 mol/L Magnesium chloride0,6 mmol/LR2: p-Nitrophenylphosphate50 mmol/LPetunjuk penyimpanan dan Kestabilan reagenReagen stabil sampai akhir bulan kadaluwarsa, disimpan pada suhu 2- 8oC dan kontaminasi harus dihindarkan. Jangan bekukan reagen! Reagen 2 harus dilindungi dari cahaya.

Pengelolaan SampahSilahkan lihat persyaratan hokum localBahan yang diperlukan tapi tidak tersediaLarutan NaCl 9 g/LPeralatan umum laboratorium Peringatan dan Tindakan pencegahan1. Reagen 1 berbahayaR41 : memiliki risiko kerusakan seriusuntuk mata, R48/22 : Bahaya: bahaya gangguan serius untuk kesehatan melalui kontak yang terlalu lama jika tertelan. S2: Cegah dari jangkauan anak-anak. S13: Jauhkan dari makanan, minuman, dan tempat makanan binatang. S2S: Hindari kontak dengan kulit. S26: Apabila terjadi kontak dengan mata, cuci segera dengan air sebanyak mungkin dan meminta bantuan medis. S39: Gunakan pelindung mata atau wajah. S46: Apabila tertelan, segera minta bantuan medis dan bawa wadah atau labelnya.2. Reagen 2 mengandung Sodium Azide ( 0,95 g/L ) sebagai pengawet. Jangan ditelan! Hindari kontak dengan kulit atau membran mukosa3. Selama reaksi p-notrofenol diproduksi yang beracun apabila dihirup, ditelan atau diserap melalui kulit. Jika campuran reaksi datang dalam kontak dengan kulit atau membran mukosa, cuci dengan deras dengan bantuan air!4. Dalam setiap kasus yang jarang terjadi, sample pasien dengan gammopati dapat memberikan hasil positif palsu. 5. Tolong hubungkan dengan lembaran data yang aman, ambil tindakan pencegahan yang diperlukan untuk penggunaan reagen laboratorium. Untuk tujuan diagnostik, hasil harus selalu dievaluasi dengan riwayat medis pasien, uji klinik, dan penemuan lainnya.

Persiapan Reagen Memulai substratReagen tersebut sudah siap untuk digunakanMemulai sampelCampurkan 4 bagian R1 + 1 bagian R2(contoh 20 ml R1 + 5 ml R2) = monoreagenStabilitas : 4 minggu pada suhu 2-8oC 5 hari pada suhu 15-25 oCMonoreagen harus dilindungi dari cahaya!

SpesimenSerum atau plasma heparin Stabilitas : 7 hari pada suhu 20-25oC 7 hari pada suhu 4-8oC 2 bulan pada suhu -20oCBuang specimen yang terkontaminasi! Bekukan sekali saja!

Prosedur PengujianLembar aplikasi untuk sistem automatis tersedia berdasarkan permintaan.Panjang gelombong Hg 405 nm, (400-420 nm)Jalan optik 1cmTemperatur25oC/ 30oC/ 37 oCUkuranaqaints airPengujian SubstratSample atau kalibrator 20 L

Reagen 11000 L

Campurkan, inkubasi selama 1 menit kemudian tambahkan R2

Reagen 2250 L

Campurkan, baca absorbansi setelah 1 menit. Baca absorbansi kembali setelah 1,2,3 menit

Pengujian SampelSampel atau kalibrator20 L

Monoreagen1000 L

Campurkan, baca absorbansi setelah 1 menit. Baca absorbansi kembali setelah 1,2,3 menit

PerhitunganDengan faktorDari pembacaan absorbansi menghitung A/min dan kalikan dengan faktor yang sesuai dari tabel di bawah ini:A/min x faktor = Kegiatan ALP [U/L]Substrat awal405 nm 3433Sampel mulai405 nm 2757Dengan kalibratorALP [U/L] = x konsentrasi kalibrator [U/L]Perhitungan factorALP [U/L] x 0.0167 = ALP [kat/L]Kalibrator dan kontrol:Untuk kalibrasi sistem fotometrik otomatis kalibrator TruCal U dianjurkan. Metode ini dapat dilacak dengan koefisien kepunahan molar. Untuk pengendalian mutu internal TruLab N dan P kontrol harus diuji. Setiap laboratorium harus menetapkan tindakan perbaikan dalam kasus penyimpangan dalam pemulihan kontrol. No Cat. Ukuran kitTruCal U 5 9100 99 83 063 20 x 3mL 5 9100 99 83 064 6 x 3mLTruLab N 5 9000 99 83 062 20 x 5mL 5 9000 99 83 061 6 x 5mLTruLab P 5 9050 99 83 062 20 x 5mL 5 9050 99 83 061 6 x 5mL

Karakteristik kinerja

Rentang pengukuranPada Sistem Otomatis Tes Ini Cocok Untuk Penentuan Kegiatan Alkali Fosfatase Hingga 800 U/L .Dalam Hal Prosedur Manual, Tes Ini Cocok Untuk Kegiatan Alkali Fosfatase Yang Sesuai Dengan Maksimal Dari A/Min 0,25 .Jika Nilai Tersebut Melebihi Sampel Harus Diencerkan 1 + 9 Dengan Larutan Nacl (9 G / L) Dan Hasil Dikalikan Dengan 10 .

Kekhususan / gangguanTidak Ada Gangguan Diamati Oleh Asam Askorbat Sampai 30 Mg/Dl, Billirubin Hingga 40 Mg/Dl, Hemoglobin Hingga 150 Mg/Dl Dan Lipemia Hingga 2.000 Trigliserida Mg/Dl.Untuk Informasi Lebih Lanjut Tentang Campur Zat Mengacu Ds Muda [5]

Sensitivitas / Batas DeteksiBatas Bawah Dtection Adalah 3u / LKetelitian (25oc)Intra-assayn=20Mean U/LSDU/LCV[%]

SAMPEL 1SAMPEL 2SAMPEL 31142222751.712.052.911.500.921.06

Intra-assayn=20Mean U/LSDU/LCV[%]

SAMPEL 1SAMPEL 2SAMPEL 31202232791.931.892.361.600.851.85

Metode PerbandinganPerbandingan alkali fosfatase FS DGKC (y) dengan tes yang tersedia secara komersial (x) dengan menggunakan 78 sampel memberikan hasil sebagai berikut : y = 0,98x-2,21 U / L; r = 0.999Nilai rujukan25 oc30 oc37 oc

Anak-anak

1-12 tahunU/L