Laporan Praktikum Biologi Oral 2

Pemeriksaan Radikal Bebas / Malondialdehyde (MDA)

Oleh:Stefanus Ferry Setiawan021111039

BIOLOGI ORAL II DEPARTEMEN BIOLOGI ORALFAKULTAS KEDOKTERAN GIGI - UNAIRSemester Genap 2013 / 2014

1. Buat bagan prosedur pemeriksaan MDA!

2. Jelaskan fungsi PBS, TCA, dan TBA! PBS merupakan sebuah larutan penyangga yang biasa digunakan dalam penelitian biologi. Buffer membantu untuk mempertahankan konstan pH. Osmolaritas dan konsentrasi ion solusi yang sesuai dengan tubuh manusia (isotonik) (Anonim 2, 2009). PBS sering digunakan dalam percobaan biologi sel untuk mempertahankan osmolaritas sel. Garam mengandung ion, yang menyeimbangkan jumlah ion garam di dalam sel. Jika sel yang tenggelam ke dalam solusi yang memiliki terlalu banyak garam ion, air akan bocor keluar dari sel, menyebabkan sel menyusut. Sebaliknya, jika sel terbenam ke dalam solusi yang memiliki ion terlalu sedikit garam, air akan masuk ke dalam sel, menyebabkan sel pecah. Oleh karena itu, sangat penting saat melakukan percobaan biologi sel untuk menjaga sel-sel di osmolaritas tertentu. PBS adalah pada osmolaritas yang benar untuk menjaga sel-sel dalam negara isotonik. PBS sering digunakan sebagai larutan penyangga dalam berbagai eksperimen untuk mempertahankan pH protein. Protein memerlukan kisaran pH tertentu untuk menjaga netralitas pada asam amino tertentu, untuk mempertahankan struktur protein. Jika tidak, struktur protein akan terdenaturasi Asam thiobarbituric (TBA) (Tarladgis et al.,1960) adalah salah satu yang paling banyak digunakan untuk mengukur lipid Produk oksidasi dalam produk daging dan daging karena itu sederhana dan cepat. Uji TBA menentukan jumlah malondialdehid (MDA), produk sampingan sekunder utama oksidasi lipid, dalam sampel. Penentuan MDA dalam produk daging atau telah dipelajari luas (Hoyland dan Taylor,1991, dan korelasi signifikan antara nilai TBA dan skor sensorik daging unggas telah dilaporkan (Salih et al.,1987). Namun, Kosugi et al.(1989) melaporkan bahwa absorbansi pigmen merah dalam metode TBA mungkin tidak khusus mengukur MDA karena zat lainnya dapat juga bereaksi dengan TBA dan berkontribusi terhadap absorbansi. Selain itu , pemanasan dan kondisi asam dapat menyebabkan terlalu tinggi zat reaktif asam thiobarbituric (TBARS). Gray dan Monahan ( 1992) melaporkan bahwa MDA berinteraksi dengan berbagai unsur makanan seperti amino asam , protein , glikogen , dan bahan makanan lainnya. Sehingga hasil interaksi MDA dan TBA kurang dianggap benar sempurna. Senyawa ini banyak digunakan dalam bidang biokimia, untuk pengendapan makromolekul seperti protein, DNA dan RNA. Garam natriumnya digunakan sebagai pembasmi rumput liar. Larutan yang mengandung asam trikloroasetat digunakan untuk penghapus tato dan pengobatan kutil, termasuk kutil kelamin (aman digunakan selama kehamilan). Garam-garam dari asam trikloroasetat disebut trikloroasetat. Reduksi sebagian dari asam trikloroasetat menghasilkan asam dikloroasetat, merupakan suatu obat aktif yang berpotensi dapat menyembuhkan penyakit kanker

3. Jelaskan prinsip kerja spektrofotometer! Prinsip kerja spektrofotometri berdasarkan hukum Lambert-Beer, bila cahaya monokromatik (I0),melalui suatu media (larutan), maka sebagian cahaya tersebut diserap (Ia), sebagian dipantulkan (Ir), dan sebagian lagi dipancarkan (It). Transmitans adalah perbandingan intensitas cahaya yang di transmisikan ketika melewati sampel (It) dengan intensitas cahaya mula-mula sebelum melewati sampel (Io). Persyaratan hukum Lambert-Beer antara lain : Radiasi yang digunakan harus monokromatik, rnergi radiasi yang di absorpsi oleh sampel tidak menimbulkan reaksi kimia, sampel (larutan) yang mengabsorpsi harus homogeny, tidak terjadi flouresensi atau phosphoresensi, dan indeks refraksi tidak berpengaruh terhadap konsentrasi, jadi larutan harus pekat (tidak encer).