Genmol Tanaman

8/18/2019 Genmol Tanaman

1/16

LAPORAN GENETIKA MOLEKULER

IDENTIFIKASI TANAMAN MENGGUNAKAN MATK

Oleh :

Hanni Tsaaqifah

BTK/ P0!!00"!

PROGRAM STUDI BIOTEKNOLOGI

SEKOLAH PAS#ASAR$ANA

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

%0!


2/16

PENDAHULUAN

!& La'a( )ela*an+

Metode identifikasi spesies makhluk hidup telah berkembang dari identifikasi

morfologi sampai pada identifikasi molekuler berdasarkan potongan DNA pendek

yang disebut “barcode DNA” (Hebert et al . 200!. Barcode DNA memiliki

fungsi"fungsi aplikatif misalnya untuk sur#ei ekologi (Di$k dan %ress 200&!'

identifikasi takson"takson kriptik (ahaye et al . 200)!' dan konfirmasi sampel"

sampel tanaman obat (*ue dan i 20++!.

%eragaman tingkat genetik merupakan tingkat keragaman yang paling rendah

dalam organisasi biologi. %eragaman genetik sangat penting bagi tanaman untuk

beradaptasi terhadap perubahan lingkungan yang ter,adi disekitarnya. -nformasi

keragaman genetik tanaman pada tingkat' indi#idu' spesies maupun populasi perlu

diketahui' sebagai dasar pertimbangan dalam menyusun strategi konser#asi'

pemuliaan' pengelolaan dan pemanfaatan sumberdaya genetik tanaman se$ara

berkelan,utan. enilaian keragaman genetik tanaman dapat dilakukan dengan

menggunakan penanda morfologi' biokimia dan molekuler DNA (/ulfahmi'

20+!.

enilaian keragaman genetik tanaman se$ara morfologi dilakukan melalui u,i

progeni' u,i pro#enan dan pengu,ian lainnya dengan mengamati penampilan

fenotipik tanaman. engu,ian ini dilakukan pada lingkungan yang berbeda dengan

fokus utama adalah $iri kualitatif dan kuantitatif yang bernilai ekonomi serta $iri

yang se$ara biologi penting seperti kemampuan hidup ( survive!' sifat toleran

terhadap stres lingkungan' sifat produksi dan resistensi terhadap hama dan

penyakit. ebagian diantara $iri1$iri tersebut bersifat poligenik dan ekspresinyadipengaruhi oleh lingkungan. tudi se$ara tradisional dengan metode genetika

kuantitatif' penilaian keragaman dan distribusi keragaman dikelompokkan ke

dalam beberapa kelas pengaruh' seperti pengaruh fenotifik' genotipe' lingkungan

dan interaksi antara lingkungan dan genotipe. enentuan keragaman genetik

tanaman se$ara kon#ensional ini membutuhkan aktu yang lama' relatif mahal'

dipengaruhi oleh lingkungan dan keragaman yang diperoleh terbatas dan tidak

konsisten.


3/16

%ema,uan teknologi telah melahirkan pendekatan se$ara molekuler' yang

memungkinkan untuk melakukan isolasi DNA atau 3NA langsung dari sampel

yang diperoleh langsung dari lingkungan' sehingga dapat diperoleh gambaran

menyeluruh untuk suatu komunitas. The Consortium for the Barcode of Life

(456 lant 7orking 8roup' 200&! merekomendasikan penggunaan dua gen

plastida yaitu ribulosa-1,5-bifosfat karboksilase (rbc! dan gen maturase %

(mat %! sebagai barcode standar untuk DNA tumbuhan (Hollingsorth et al.

200&!.

Mengingat pentingnya mengetahui identifikasi tanaman nanas se$ara

molekuler' sehingga pada a$ara praktikum ini digunakan primer mat%9 dan

mat%3 yang bertu,uan untuk mengetahui keragaman tanaman nanas yang

digunakan sebagai sampel dalam praktikum ini.

%& T,-,an P(a*'i*,.

raktikum ini bertu,uan untuk mengetahui dan mempela,ari teknik isolasi

DNA genom dan identifikasi tanaman nanas se$ara molekuler menggunakan

mat%.


4/16

METODOLOGI

!& a*', an Te.1a'

raktikum a$ara isolasi dna genom tanaman nanas dilakukan pada tanggal 2&

eptember 20+:' sedangkan identifikasi tanaman nanas dilakukan pada tanggal +0

6ktober 20+:. eluruh kegiatan dilakukan di aboratorium 5iorin usat Antar

;ni#ersitas -5.

%& Ala' an Bahan

Alat yang digunakan pada praktikum ini yaitu collection tube (tabung

eppendorf!' tabung 43' mikropipet (ukuran 2' 20' 200 dan +000! dan tip'

mortar dan pestle' erlenmeyer' setrifuge' inkubator' pengering #akum' #orte


5/16

tabung baru dan ditambahi Na6A$ (2M@ pH :'2! sebanyak + kali #olume

dan t6H absolut sebanyak 2" kali #olume. 4ampuran larutan di

diinkubasi selama semalam pada suhu "20 ℃ . =ahap selan,utnya' tabung

disentrifugasi dengan ke$epatan +0.000 rpm selama 2: menit pada suhu ?

℃ . upernatan yang terbentuk dibuang' selan,utnya pellet ditambah

dengan :00 μl t6H B0C. =abung disentrifugasi pada ke$epatan +0.000

rpm pada suhu ? ℃ selama +0 menit. upernatan dibuang dan tabung

yang berisi pelet dikeringkan dengan #akum. ellet yang berada pada

tabung ditambahi dengan 20 μl ddH26 dan 3nase sebanyak μl dan

dihomogenkan dengan spin down. =abung diinkubasi pada suhu B ℃

selama +0 menit.

2& %& De'e*si DNA .en++,na*an Gel A+a(3sa

Ada tidaknya DNA genom tanaman nanas diketahui dengan

elektroforesis' yaitu men,alankan DNA genom hasil isolasi pada gel

agarose +C. ebanyak :Fl DNA genom ditambahi +Fl loading dye sampai

ter$ampur. 4ampuran dimasukkan ke dalam sumur agarosa +C (0' gram

agarose dalam 0 ml buffer =A (Tris #cetic $%T#! +*. DNA lambda

digunakan sebagai marker.

lektroforesis dilakukan selama 0 menit pada +00 Eolt dengan buffer

=A +* sebagai runnin buffer . 8el direndam dalam larutan $thidium

Bromida (t5r!. 8el dapat di#isualisasi dengan meletakkan gel diatas ;E

transiluminator untuk melihat ada tidaknya pita DNA genom. Agarose

diambil dari alat elektroforesis kemudian direndam dalam larutan tidhium

5romida. elan,utnya pergerakan DNA diamati di baah sinar ;E.2& 2& K,an'ifi*asi DNA en+an S1e*'(3f3'3.e'e(

=ahap ini dilakukan untuk mengetahui konsentrasi dan kemurnian DNA

dengan menggunakan spektrofotometer. uspensi DNA dien$erkan dengan

mengambil : Fl dalam &: Fl ddH26. uspensi DNA yang telah dien$erkan

diba$a absorbansinya pada 20 nm dan 2)0 nm. Nilai absorbansi pada

pan,ang gelombang 20 nm dikon#ersikan ke dalam konsentrasi' yaitu +


6/16

µgml

6D20 G :0 ug DNA utas ganda tiap ml. %onsentrasi DNA dihitung dengan

persamaan'

%onsentrasi DNA G

edangkan untuk mengetahui kualitas DNA berhubungan dengan

kemurnian DNA terhadap kontaminan protein dapat dilihat dari

perbandingan nilai absorbansi 20 nm terhadap nilai absorbansi 2)0 nm.

DNA dikatakan murni apabila nilai perbandingan berada pada rentang +')"

2'0.

2& 5& A.1lifi*asi DNA Gen3. Tana.an Nanas

Amplifikasi dilakukan dengan menggunakan teknik 43. =eknik ini

merupakan suatu reaksi in vitro untuk menggandakan ,umlah molekul DNA

target tertentu dengan $ara mensintesis molekul DNA baru yang

berkomplemen dengan molekul DNA target tersebut dengan bantuan enim

dan oligonukleotida sebagai primer dalam suatu thermocycler (Muladno'

2002!. etiap siklus dari teknik 43 terdiri dari tahap yaitu tahap

denaturasi' pelekatan (annealin ! dan peman,angan (elonation! (%oolman

dan 3oehm' 200?!.

ada reaksi amplifikasi digunakan mat%9Imat%3 dari mat% (pada

masing" masing sampel!. Analisis 43 dilakukan dengan total +< reaksi

sebanyak +0 Fl (=abel +!. 4ampuran dihomogenkan kemudian dimasukkan

ke dalam mesin thermocycler .

=abel +. %omposisi 43 mi& untuk amplifikasi

%omposisi 43 + < +

a. re denaturasi G &?04@ : menit

9 < :0 FgIml < Abs. 20


7/16

b. Denaturasi G &?04@ + menit

$. Annealing G :004@ 0 detik

d.


8/16

DNA genom pada bakteri dan $endaan. ada pelisisan sel tanaman nanas'

ditambah dengan larutan β "mer$apto etanol.penambahan senyaa pereduksi

ini pada sel tanaman berfungsi untuk men$egah ter,adinya proses oksidasi

senyaa fenolik sehingga menghambat akti#itas radikal bebas yang dihasilkan

oleh oksidasi fenol terhadap asam nukleat. elain itu proses lisis ,uga dibantu

dengan menginkubasi sampel pada suhu :o4 selama +: menit.

8ambar +. elisisan sel nanas dengan metode 4=A5

DNA yang telah terpisahkan dari membran selan,utnya dilakukan tahap

presipitasi dengan penambahan bahan"bahan kimia seperti fenol kloroform

isoamilalkohol' etanol' dan Na6A4. Metode presipitasi dengan kloroform

isoamilalkohol (4>-' 2?>+! dilakukan untuk mendenaturasi protein dan melarutkan

komponen lipid. enggunaan kloroform isoamil alkohol (4-! berdasarkan

perbedaan sifat pelarut organik. %loroform tidak dapat ber$ampur dengan air dan

kemampuannya untuk mendeproteinisasi berdasarkan kemampuan rantai

polipeptida yang terdenaturasi untuk masuk atau termobilisasi ke dalam fase

antara kloroform"air. %onsentrasi protein yang tinggi pada fase antara tersebut

dapat menyebabkan protein mengalami presipitasi. edangkan lipid dan senyaa

organik lain akan terpisah pada lapisan kloroform. 9ungsi lain dari penambahan4- ini adalah untuk menghilangkan kompleks 4=A5 dan meninggalkan DNA

pada fase aKuoeus. DNA kemudian diikat dari fase aKuoeus dengan presipitasi

etanol (ury$ki' 2000!.

resipitasi tahap kedua dilakukan dengan menggunakan larutan fenol"

kloroform"isoamil alkohol (>4>-' 2:>2?>+!. 4ampuran pelarut akan

mendenaturasi protein dan melarutkan komponen lipid. enambahan 4- setelah

disentrifugasi membentuk fase (gambar 2! yaitu fase aKuoeus (lapisan paling


9/16

atas tempat DNA berada!' fase protein (protein terkoagulasi di fase tengah!' dan

fase kloroform (paling baah karena sifat kloroform yang berat ,enisnya besar!.

8ambar 2. resipitasi DNA genom tanaman nanas dengan 4-

=ahap presipitasi selan,utnya adalah dengan penambahan Na6A$ (2M pH

:'2!. arutan Na6A$ berfungsi menetralkan suasana basa yang di$iptakan oleh

ion hidroksida pada tahap lisis sebelumnya. -katan"ikatan hidrogen antar basa utas

tunggal DNA terbentuk kembali. Muatan NaL akan berinteraksi dengan DNA yang

bermuatan negatif. -nteraksi tersebut menyebabkan DNA bersifat hidrofob.

enambahan t6H absolut ,uga dilakukan pada praktikum ini. t6H absolut

digunakan sebagai agen presipitasi lan,utan yang akan memudahkan garam

berinteraksi dengan DNA' sehingga DNA akan mengendap (gambar !.

=ahap pen$u$ian pellet DNA dengan etanol B0C. en$u$ian dilakukan untuk

menghilangkan kelebihan garam. elan,utnya pellet dikeringkan dan setelah itu

dilakukan pemurnia DNA dari 3NA dengan penambahkan 3NAase sehingga akan

didapatkan DNA genom yang murni. =ahap resuspensi dilakukan dengan

menambahkan ddH26 yang berfungsi untuk men,aga stabilitas dan lama

penyimpanan DNA.


10/16

8ambar . =ahap presipitasi dengan t6H absolut

%& Analisis Ke.,(nian DNA an K,an'ifi*asi DNA en+an S1e*'(3f3'3.e'e(

DNA tanaman nanas yang telah diisolasi' kemudian di $ek kuantitasnya

dengan metode spektrofotometri untuk mengetahui kemurnian dan

konsentrasinya. rinsip metode spektrofotometri adalah menghitung nilai

absorbansi pada A20 dan A2)0. %emurnian DNA didapat dari perbandingan antara

nilai absorbansi A20I A2)0' dan konsentrasi DNA didapatkan dengan mengalikan

nilai absorbansi A20 dengan faktor pengen$eran serta mengon#ersikannya

kedalam nanogram (ng! dengan mengalikan nilai 6D A20 yaitu :0 ng.

=abel 2. Hasil kuantifikasi DNA genom tanaman nanas dengan metode

spektrofotometri

Sa.1le 6%70 6%80 Ke.,(nian K3nsen'(asi 9n+/l;

+ 0.+2B 0.0& +.: ))&

2 0.+0+ 0.0B +.) B0B

0.+:& 0.++0 +.??: +++

? 0.0&0 0.0B +.22 0

: 0.+0) 0.0)+ +. B: 0.+?2 0.+++ +.2B& &&?

B 0.+2B 0.0&+ +.&: ))&

) 0.+? 0.0&& +.?B? +022

& 0.+2) 0.+0+ +.2B )&

+0 0.0:2 0.0? +.20& ?

5erdasarkan data dari tabel 2' semua hasil perhitungan kemurnian DNA

menun,ukkan nilai yang rendah karena berada dibaah +'). Menurut 9at$hiyah

(20++!' DNA dapat dikatakan murni apabila rasio absorbansi DNA yang diukur

pada (A20IA2)0! menun,ukkan nilai +')" 2'0. %etidakmurnian hasil isolasi

dikarenakan terdapat kontaminasi khususnya protein (nilai kemurnian DNA

+')!. Adanya kontaminan protein hasil isolasi DNA praktikum ini dimungkinkan

karena saat pengambilan supernatan hasil purifikasi dengan 4-' protein yang

mengendap ikut terbaa. Hal lainnya dimungkinkan pada praktikum ini tidak

dilakukan penambahan enim proteinase % (enim pendenaturasi protein!.


11/16

Hasil perhitungan konsentrasi DNA paling tinggi terdapat pada sampel

(+++ ngIFl! sedangkan konsentrasi terendah terdapat pada sampel +0 (? ngIFl!.

%onsentrasi DNA yang pada hasil isolasi $ukup besar sehingga pengen$eran harus

dilakukan sebelum amplifikasi pada mesin 43. ada praktikum ini digunakan

pengen$eran sebanyak +00 ngI μ l& %onsentrasi DNA perlu diketahui untuk

mendapatkan konsentrasi yang tepat untuk amplifikasi 43.

2& Analisis DNA en+an Ele*'(3f3(esis Gel A+a(3sa

Analisis ini bertu,uan mengetahui kualitas dan menge$ek ada tidaknya DNA

dalam gel. 8ambar ? menun,ukkan hasil migrasi DNA pada gel agarosa dimana

terlihat pita DNA menandakan keberadaan genom.

8ambar ?. lektroforegram DNA genom nanas hasil isolasi

ita tunggal DNAterlihat pada sampel 2' ?' :' ' B' )' dan &. ada sampel +' '

dan +0 tdak terlihat adanya band DNA. ada sebagian pita migrasinya belum

seutuhnya bersih dari smear yang mungkin dikarenakan kualitas DNA kurang

baik karena mengalami kepatahan. 'mear terbentuk akibat degradasi DNA

men,adi polinukleotida"polinukleotida yang pendek. Hal ini disebabkan perlakuan

DNA selama isolasi' yaitu sentrifugasi' perlakuan suhu' atau perlakuan dengan

larutan"larutan yang digunakan.

edangkan tidak adanya band DNA yang terdeteksi ,uga dimungkinkan

karena banyak faktor' antara lain ketidakmurnian hasil isolasi DNA genom yang

masih mengandung kontaminan atau pengotor lain (menga$u pada tabel 2

rendahnya kemurnian dari hasil isolasi DNA genom!@ konsentrasi DNA yang

dimasukkan ke dalam sumuran terlalu sedikit sehingga pita band DNA tidak

terdeteksi. Adanya pengotor berupa protein (kemurnian +') ! pada praktikum ini

dapat disebabkan karena saat pengambilan supernatan hasil purifikasi dengan


12/16

4-' protein yang mengendap ikut terbaa. Hal lainnya dimungkinkan pada

praktikum ini tidak dilakukan penambahan enim proteinase % (enim

pendenaturasi protein!.

Adanya pita marker lambda yang terlihat ,elas menandakan proses

elektroforesis ber,alan dengan benar. ehingga faktor ini bukan pemi$u

ketidakmun$ulannya pita DNA hasil isolasi.

5& Ien'ifi*asi Tana.an Nanas )e(asa(*an .a'K

-dentifikasi spesies tumbuhan aalnya menggunakan metode morfologi yang

diidentifikasi dari bentuk fisiknya (bunga' daun' batang' $abang dan bi,i!. Namun'

dengan adanya perkembangan teknologi elektronika dan genetika saat ini telah

dikembangkan suatu metode terbaru dalam identifikasi spesies tumbuhan danhean' yaitu teknologi DNA bar$oding yang menggunakan potongan DNA

pendek standar (bar$ode DNA! (%alangi' 20+?!.

;ntuk identifikasi tanaman dalam teknologi DNA bar$oding' disepakati

menggunakan gen pengkode standar yaitu gen ribulosa"+':"bifosfat karboksilase

(rb$! dan gen maturase% (mat%! yang terdapat pada kloroplas (456 lant

7orking 8roup' 200&!. 8en mat% lebih banyak digunakan dalam berbagai

penelitian dibandingkan gen rb$' karena tingkat keakuratannya yang lebihspesifik pada yaitu pada tingkat spesies. 8en mat% di,adikan gen pengkode

standar untuk bar$ode DNA se,ak tahun 200 dan telah diu,i melalui beberapa

penelitian. 8en maturase% (mat%! diidentifikasi pertama kali oleh ugita et al.

(+&):! dari tanaman tembakau (Ni$otiana taba$um!. 8en mat% merupakan gen

pengkode enim maturase bagian sub"unit % yang terdapat dalam kloroplas pada

tanaman. Daerah urutan nukleotida gen mat% ini dapat menghasilkan kira"kira

+:00 pb (pasang basa! (%alangi' 20+:!.


13/16

8ambar :. 8en mat% diambil dari DNA kloroplast

& P#R DNA Tana.an Nanas en+an P(i.e( .a'K2 F an .a'K2 R

-solat DNA tanaman nanas diamplifikasi pada mesin 43 menggunakan

primer mat% 9 dan mat%3. rimer mat% 9 memiliki urutan basa :"AA8

A=8 44= 4== 44= =84 A=" dan primer mat% 3 memiliki urutan basa :"

8A= 448 8=4 =8A =AA =8A 8A". etelah dilakukan 43 dan di $ek

kualitasnya melalui elektroforesis dapat dilihat pada gambar dibaah ini. ada

praktikum ini menggunakan konsentrasi DNA sebesar +00 ngI μ l

8ambar . lektroforegram amplikon DNA genom nanas berdasarkan penanda

mat%@ (arker + kb DNA ladder .

Hasil elektroforegram menun,ukkan daerah mat% tanaman nanas pada &

sampel membentuk pita DNA yang tebal. =ebal dan tipisnya pita menun,ukkan

kuantitas dari DNA template yang teramplifikasi. lektroferogram amplikon DNA

genom tanaman nanas pada praktikum ini terlihat ,elas dan tebal mengindikasikan

baha konsentrasi molekul yang terseparasi pada ilayah ini tinggi. ada

sumuran nomor +0 didapat pita yang samar. ita DNA yang samar atau tipis pada

gambar diatas bisa ter,adi karena konsentrasi DNA yang teramplifikasi nilainya

rendah.

Hasil #isualisasi (gambar ! ,uga membentuk pita tipis yang berada

dibaah pita tebal. ita tipis ini terbentuk karena DNA hasil amplifikasi

mengalami fragmentasi. 9ragmentasi dapat ter,adi selama proses ekstrasi' salah

satunya pada aktu proses homogenisasi menggunakan #orte< (Mulyani' 20++!.


14/16

roses homogenisasi menggunakan #orte< dapat

membantu proses pelisisan' namun dapat

menyebabkan DNA terpotong"potong sehingga

menyebabkan terbentuknya beberapa pita DNA

ketika dielektroforesis. %emungkinan lain adalah

suhu annealing ketika 43 kurang spesifik.

ada praktikum ini tidak ter,adi masalah dengan

elektroforesis karena DNA marker menun,ukan

adanya pita DNA dan tidak smear . ehingga

anggapan penggunaan tegangan yang terlalu besar

(penyebab smear ! tidak ter,adi pada praktikum ini.

Dengan mengukur ,arak migrasi pita"pita sumur

marker maka diperoleh persamaan yang akan

digunakan untuk menentukan ukuran basa dari DNA

tanan nanas yang telah diamplifikasi. Hasil

perhitungan se$ara manual menggunakan alat ukur

penggaris' maka diperoleh data sebagai berikut>

=abel ?. Oarak migrasi marker + kb ladder

bp og bp Oarak

($m!100

00 4 3,4800

0

3,9030

9 3,7600

0

3,7781

51 4500

0

3,6989

7 4,35400

0

3,6020

6 4,7350

0

3,5440

68 5

3000

3,477121 5,25

250

0

3,3979

4 5,7200

0

3,3010

3 6,2150

0

3,1760

91 6,9100

0 3 7,8

750

2,8750

61 8,5


15/16

3 4 5 6 7 8 9 10 11

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

4

4.5

f(x) = - 0.21x + 4.62

R² = 0.99

Linea ()

Migrasi DNA tanaman nanas dari semua sampel ketika diukur dengan

penggaris' ,araknya adalah )'? $m dari sumuran. ehingga' berdasarkan

persamaan linier y G "0'20&< L ?'?2' diperoleh ukuran DNA genom bakteri

sebesar B pasang basa atau berkisar B:0 pasang basa.

KESIMPULAN

8ambar B. 8rafik perbandingan,arak migrasi marker +

kb ladder dengan log bp ukuran DNA bakteri dari

marker + kb


16/16

-dentifikasi molekular pada tanaman nanas dapat dilakukan dengan

amplifikasi gen mat%. Dari +0 sampel' ada & sampel yang dapat teramplifikasi

namun terdapat fragmentasi DNA karena. Amplifikasi gen ini akan menghasilkan

DNA dengan ukuran sekitar B:0 pasang basa.

ada praktikum ini isolasi DNA genom tanaman nanas dilakukan dengan

metode 4=A5. Hasil kuantifikasi DNA dengan spektrofotometer pada semua

sampel menun,ukkan nilai kemurnian yang rendah (kurang dari +')!. ;ntuk

konsentrasi DNA se$ara umum relatif $ukup tinggi' sehingga dilakukan

pengen$eran pada +00 ngI μ l.

Dari +0 sampel' terdapat B sampel yang membentuk pita DNA hasil isolasi

DNA genom. edangkan identifikasi molekular tanaman nanas yang dilakukan

dengan amplifikasi pada daerah mat%' pada & sampel mun$ul adanya pita DNA.

;kuran pita DNA yang dihasilkan oleh tanaman nanas menu,ukkan ukuran sekitar

B pasang basa atau sekitar B:0 pasang basa.

DAFTAR PUSTAKA

456 (4onsortium for the 5ar$ode of ife! lant 7orking 8roup. 200&. A DNA

5ar$ode for and lant. ro$eeding of the National A$ademy of $ien$es.+0> +2B&?"+2B&B

Hebert' . D. N.' N. A. 4yinska' . . 5all' and O. 3. de 7aard. 200. 5iologi$al

-dentifi$ations =hrough DNA 5ar$odes. ro$eedings of the 3oyal o$iety 5>

5iologi$al $ien$e. 2B0> +12+.

%alangi' 4. 20+?. 5ar$ode DNA =anaman eilem berdasarkan 8en mat%. )urnal (!"#

*+'#T ' (2!> +0)"++2.

ahaye' 3.' M. E. D. 5ank' D. 5ogarin' O. 7arner ' 9. upulin' 8. 8igot' 6. Maurin' .

Duthoit' =. 8. 5arra$lough and E. a#olainen. 200). DNA bar$oding the

floras of biodi#ersity hotspots. "roc. +at. #cad. 'ci. +0:> 2&2"2&2).

Mulyani' P. 20++. erbandingan 5eberapa Metode -solasi DNA untuk Deteksi Dini %oi.

Herpes Eirus pada -kan Mas. )urnal #kuatika! ' ) (++!> +"+.

ugita' M.' %. hinoaki' and M. ugiura. +&):. =oba$$o 4hloroplast t3NAys(;;;!

8ene 4ontains a 2':"kilobase"pair -ntron. ro$eeding of the National

A$ademy of $ien$es. )2> ::B":+.

*ue' 4.P. and D./. i. 20++. ;se of DNA bar$ode sensu lato to identify traditional

=ibetan medi$inal plant entianopsis paludosa (entianaceae!. ). 'ys. $vol.

?&> 2B.

Genmol Tanaman

Documents

Transcript of Genmol Tanaman