laporan hapusan darah tepi

8/18/2019 laporan hapusan darah tepi

1/16

PEMBUATAN dan PEWARNAAN

HAPUSAN DARAH TEPI

OLEH :

PUTU RINA WIDHIASIH

(P07134014002)

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN DENPASAR

JURUSAN ANALIS KESEHATAN

TAHUN AKADEMIK 201!201"

Tan##a$ P%a&'&* : 14 + 21 Ma%,' 201"


2/16

Ma',% P%a&'&* : P,*-a'an dan P,.a%naan Ha/an Da%a T,/

I TUJUAN

Untuk dapat mengetahui cara pembuatan dan pewarnaan sediaan hapusan darah.

IIMETODE

Metode yang digunakan dalam praktikum kali ini adalah hapusan darah (blood smear)

III PRINSIP

Darah + antikoagulan di teteskan pada objek glass dan di buat hapusan menyerupai

lidah, kemudian sediaan di warnai dengan giemsha lalu dibaca dibaca pada mikroskop.

I DASAR TEORI

1 Da%a

Darah berasal dari kata haima, yang berasal dari akar kata hemo atau hemato. Darah

adalah sejenis jaringan ikat yang sel-selnya (elemen pembentuk) tertahan dan dibawa dalam

matriks cairan (plasma). Darah terdiri dari !" korpuskula dan !!" plasma darah. Darah

lebih berat dibandingkan air dan lebih kental. #airan ini memiliki rasa dan bau yang khas,

serta $% &, (&,'! - &,!). (Mansyur ri.**)

arna darah berariasi dari merah terang sampai merah tua kebiruan, bergantung

pada kadar oksigen yang dibawa sel darah merah. /olume darah total sekitar ! liter pada laki-

laki dewasa berukuran rata- rata, dan kurang sedikit pada perempuan dewasa. /olume ini

berariasi sesuai dengan ukuran tubuh dan berbanding terbalik dengan jumlah jaringan

adiposa dalam tubuh. /olume ini juga berariasi sesuai dengan perubahan cairan darah dan

konsentrasi elektrolitnya.

Darah memiliki komposisi yang terdiri atas sekitar !!" cairan darah (plasma) dan

!" sel-sel darah. 0lemen pembentuk darah meliputi tiga macam sel darah, yaitu sel darah

merah (eritrosit), sel darah putih (leukosit), dan keping darah (trombosit). 1etiga sel-sel

darah tersebut tergolong dalam unsur padat yang disebut korpuskuler. (Mansyur ri.**)


3/16

2 S,daan a/an da%a

Hapusan darah tepi adalah tindakan diagnostik yang digunakan dalam evaluasi dan

diagnosis berbagai kondisi medis, atau dalam bahasa 2nggris dikenal sebagai 3lood 4mear.

2ni adalah tindakan standar jika dokter menduga ada penyakit atau ineksi, %apusan darahtepi biasanya tes diagnostik pertama yang dilakukan.Dalam hapusan darah tepi yang

diperiksa adalah tiga komponen utama darah5

• 6rombosit

• 4el darah putih

• 4el darah merah

6rombosit adalah sel yang memungkinkan pembentukan gumpalan darah untuk

mencegah darah mengalir dengan bebas dalam luka. %al ini memainkan peran penting dalam

proses penyembuhan. 4ementara itu, sel-sel darah putih merupakan bagian penting dari

sistem kekebalan tubuh karena mereka melawan 7at asing dan penyakit menular. 4el darah

merah, di sisi lain, memberikan oksigen ke berbagai organ untuk memungkinkan mereka

berungsi secara normal. (3ashar, ya7hid.*')

4ediaan hapusan digunakan untuk melihat komponen-komponen ini di bawah

mikroskop untuk memeriksa setiap kelainan, seperti dalam bentuk sel-sel atau jumlahnya.

1elainan sel-sel ini menghasilkan komplikasi dalam pengiriman oksigen, dalam sistem

kekebalan tubuh, atau pembekuan darah.%apusan darah tepi merupakan bagian tak

terpisahkan dari proses diagnostik. $ewarnaan hapusan merupakan komponen penting dalam

pembuatan hapusan ini karena dengan adanya pewarnaan maka akan memberikan gradasi

warna dan memperjelas setiap inti dan bagian dari sel-sel darah, sehingga memudahkan

dalam pengamatannya. $ewarnaan yang biasa dilakukan adalah pewarnaan 8omanowsky

yaitu 5

o $ewarna right, yang dipakai sebagai pewarna tunggal

o $ewarna 9iemsha, yang dipakai sebagai pewarna tunggal atau bersama-sama

dengan pewarna May-9runwald


4/16

o $ewarna May-9runwald, yang dipakai bersama-sama dengan pewarna

9iemsha sebagai pewarna May-9runwald 9iemsa (M99)

o $ewarna :eishman, yang dipakai sebagai pewarna tunggal

(8iswanto. *')

3ahkan, hampir setiap pasien akan memerlukan hapusan darah tepi. ;amun, beberapa

alasan paling umum mengapa dokter akan meminta tindakan ini adalah untuk

mengidentiikasi alasan mengapa pasien mengalami anemia, penyakit kuning, memar

abnormal, nyeri tulang, ruam, ineksi, penurunan berat badan, atau gejala lu berulang.

4angat penting untuk memahami bahwa hasil hapusan darah tepi dapat dipengaruhi oleh

beberapa aktor. 4angat penting bagi nda untuk menginormasikan dokter, apa saja obat,

itamin, atau suplemen yang nda konsumsi jika diminta untuk menjalani tindakan tersebut.

(/anila.*)

3eberapa jenis pengobatan paling umum yang akan mempengaruhi hasil tes hapusan

darah tepi adalah antikoagulan dan obat untuk penyakit lain.


5/16

• >bjek glass

• $ipet tetes

• 8ak pewarna

• 3eaker glass

• $ipet ukur

• 3all pipet

• 3otol semprot

• 4topwatch

• Mikroskop binokuler

- Baan

•

Darah ena dengan antikoagulan 0D6

• 6issue

• 6issue lensa

• 3uer phosat p% ?.@

• 9iemsha pekat

• Methanol p.a

• lkohol & "


6/16

• Auadest

• >il imersi

I ARA KERJA

a P,*-a'an ,daan a/an da%a

. Disiapkan alat dan bahan yang akan di gunakan

*. Diteteskan sampel darah pada objek glass

'. Diratakan sampel darah dengan bantuan objek glass yang lain

. Didorong objek glass dengan membentuk sudut '- derajat

!. Dikeringkan dengan menganginkan sediaan hapusan yang telah dibuat

- P,.a%naan ,daan a/an da%a

• 9iemsha

. Diteteskan sediaan darah pada rak pewarnaan

*. Diteteskan methanol pada sediaan selama ! menit

'. Diteteskan sediaan hapusan dengan giemsha + buer phosat (5)

. Diamkan larutan pewarna pada sediaan selama ' menit

!. Dibilas sediaan yang diwarnai dengan aAuadest

?. Dikeringkan dengan menganginkan sediaan hapusan yang telah dibuat


7/16

• right

. Diteteskan sediaan darah pada rak pewarnaan

*. Diteteskan methanol pada sediaan selama ! menit

'. Diteteskan cat right sebanyak * tetes pada hapusan dan tunggu * menit

. Diteteskan buer phosat p% ?, pada hapusan dan tunggu * menit

!. Dibilas sediaan yang diwarnai dengan aAuadest atau air mengalir

?. Dikeringkan dengan menganginkan sediaan hapusan yang telah dibuat

II HASIL PEN5AMATAN

6

Hapusan

dalam

jembatan

pengecatan

Hapusan darah

tepi sebelum

dilakukan

pengecatan

Hapusan

dengan

pengecatan

Hapusan

dengan

pengecatan


8/16

Gambar dibawah

mikroskop denganGambar dibawah

mikroskop dengan


9/16

III PEMBAHASAN

4ediaan hapusan dapat dibedakan menjadi sediaan hapusan darah tipis danhapusan darah tebal. 1edua jenis hapusan ini biasanya digunakan untuk identiikasi

parasit $lasmodium sp. yang menyebabkan penyakit malaria. $ada hematologi

pembuatan hapusan darah juga sangat diperlukan untuk membantu diagnosis namun

pembuatan hapusan yang digunakan hanya hapusan darah tipis. 4ediaan hapusan tipis

digunakan untuk mendeteksi dan mengidentiikasi morologi sel darah (eritrosit, leukosit

dan trombosit), menentukan raksi jumlah leukosit dan mengestimasi jumlah trombosit.

4ediaan ini dibuat dengan meletakkan setetes (kecil saja) darah pada kaca objek,

kemudian ditempatkan ujung kaca objek didepan tetesan darah tersebut dan biarkan darah

menepati seluruh ujung kaca objek lalu dorong kebelakang sedikit kemudian dorong

kedepan sehingga terbentuk hapusan yang tipis yang berbentuk peluru atau lidah. Dimana

hapusan ini harus memiliki daerah counting area sebagai tempat untuk penghitungan

yang penyebaran eritrositnya merata tidak menumpuk dan tidak jarang.


10/16

%al-hal yang perlu diperhatikan yaitu, 1aca objek yang digunakan harus kering,

bersih dari debu dan lemak. 1aca objek yang berminyakBberlemak menyebabkan apusan

berlubang-lubang. %indari menyentuh permukaan kaca objek dengan tangan. 1otoran

yang menempel pada kaca objek menyebabkan kesulitan dalam pembacaan. $ada waktu

pembuatan sediaan harus memperhatikan sudut kemiringan kaca penggeser dengan kaca

objek dan kecepatan penggerakan kaca penghapus sebab dapat berpengaruh pada

ketebalaan sediaan yang dibuat, semakin kecil sudut penggeseran dan semakin lambat

menggeser, maka semakin tipis apusan. ;amun $enyebaran leukosit pada sediaan yang

dibuat tidak merata, leukosit kecil-kecil selalu lebih banyak terdapat di tengah-tengah,

sedangkan yang besar-besar lebih banyak dipinggir. Maka dari itu sebaiknya digunakan

sudut '- derajat saja. (8iswanto. *')

#iri-ciri sediaan apusan yang baik yaitu 5

. Memiliki bagian tebal dan bagian tipis untuk pembacan

*. 6idak melebar sampai pinggir kaca objek, panjangnya kira-kira setengah

sampai *B' kaca objek

'. $enyebaran eritrosit dan leukosit bagus, dimana sel-sel eritrosit terletak

berdekatan dan tidak bertumpuk-tumpuk atau menyusun gumpalan dan

sel-sel luekosit tersebar merata, tidak terhimpunBmenggerombol dipinggir-

pinggir atau diujung-ujung sediaan.. 4ediaan tidak boleh berlubang-lubang atau bergaris-garis, ditepi hapusan

rata tidak membentuk gerigi.

!. 3entuk seperti peluru

4elanjutnya hapusan yang sudah dibuat sebaiknya diiksasi terlebih dahulu

dengan menggunakan larutan methanol selama ! menit, iksasi ini bertujuan untuk

merekatkan sel-sel darah pada kaca objek. ;amun sebelum diiksasi sebaiknya hapusan

dipastikan sudah benar-benar kering sempurna. 1arena jika tidak kering sempurna maka

saat membilasnya dengan aAuadest hapusan pada bagian yang belum kering akan ikut

larut dengan aAuades menyebabkan lubang pada hapusan. 4etelah dibilas dengan aAuades


11/16

ditunggu sampai hapusan kering sempurna kemudian bisa dilanjutkan pewarnaan ataupun

disimpan.

$ada praktikum kali ini hapusan yang telah diiksasi disimpan terlebih dahulu

kemudian baru lakuakan pewarnaan. $ewarna yang digunakan adalah pewarna

8omanowsky yang terdiri dari 7at warna methylene blue, a7ure 3 (produk oksidati dari

methylene blue) dan eosin. $rinsip pewarnaan 8omanowsky adalah 5

• 0lemen seluler yang bersiat asam, seperti nucleoprotein, asam nukleat dan

protein plasma bereaksi dengan 7at warna basa methylene blue dan a7ure 3

sehingga terwarnai biru. 0lemen seluler tersebut dinamakan Cbasoilik

• 0lemen seluler yang bersiat basa, seperti hemoglobin dan beberapa

konstituen sitoplamik leukosit bereaksi dengan 7at warna asam eosin danterwarnai orange-merah. Mereka dinamakan Casidoilik

• 0lemen seluler yang bersiat netral, seperti beberapa organela seluler dapat

bereaksi dengan 7at warna asam maupun basa serta menunjukan warna

ungu, yaitu campuran antara warna biru dan merah. Eang dinamakan

Cneutroil

(8iswanto. *')

$ada praktikum kali ini digunakan * macam cat yaitu cat giemsha dan right.

$ewarna right dapat dibeli dalam bentuk serbuk atau larutan siap pakai. Untuk

membuat larutan sendiri, serbuk right harus diencerkan dengan methyl alcohol

(methanol). 4etiap , gram serbuk itu digerus dalam mortar dan dilarutkan dengan

methanol sedikit demi sedikit sampai ? ml. 1arena sudah mengandung methanol dengan

konsentrasi tinggi pewarnaan right tidak perlu diiksasi terlebih dahulu. ;amun karena

adanya penundaan pewarnaan saat praktikum sehingga hapusan sebelumnya sudah

diiksasi dengan methanol. $ewarnaan right baik digunakan untuk tujuan penilaian

morologi sel-sel darah karena struktur plasma dan inti (nucleus) lebih jelas terlihat.

4ediaan yang banyak berisi sel-sel muda dan sediaan sumsum tulang lebih baik diwarnai

dengan pewarna ini. Untuk mendapatkan hasil pewarnaan yang bagus, pewarnaan

dilakukan dengan menambahkan larutan penyangga (buer) osat p% ?,. :arutan buer


12/16

ini dibuat dari kalium dihidrogen osat (1%*$>) ?,?' gr, natrium hydrogen osat

(;a*%$>) *,!? gr dan liter aAuadest.

#ara pewarnaan dengan pewarna right adalah teteskan * tetes cat right pada

hapusan usahakan memenuhi semua bagian hapusan kemudian tunggu selama * menit,

lalu tambahkan buer osat dan tunggu * menit. 3uer osat yang sebaiknya

digunakan adalah dengan p% ?, namun pada praktikum kali ini digunakan buer osat

dengan p% & namun penggunaan larutan buer & ini tidak mempengaruhi pewarnaan

tetapi sebaiknya menggunakan buer osat dengan p% ?,. :angkah terakhir dibilas

menggunakan aAuadest atau air mengalir tunggu hingga kering kemudian dapat dibaca

pada mikroskop.

$ewarna giemsa biasanya dapat dibeli dalam bentuk larutan. 4ebelum digunakan,

larutan ini harus diencerkan dengan larutan penyangga (buer) osat p% ?,. $ewarna

9iemsa diencerkan dengan buer osat p% ?, dengan perbandingan bagian 9iemsa

dan bagian atau ' bagian buer kemudian saring. :arutan ini harus dibuat dan segera

digunakan. $ewarnaan 9iemsa tidak mengandung methanol sehingga sediaan perlu

diiksasi terlebih dahulu sebelum diwarnai. Fat warna 9iemsa sama baiknya dengan 7at

warna right untuk darah yang tidak banyak kelainan morologinya. $erbedaannya

adalah pewarnaan dengan giemsa menyebabkan granula basophil tidak ;ampak karena

granula itu akan larut. 4elain itu eritrosit berwarna abu-abu. ;amun jika untuk

mengamati parasite-parasit darah lebih baik menggunakan 7at warna giemsa.

#ara pewarnaan dengan pewarna 9iemsha adalah teteskan 7at warna 9iemsa

yang sebelumnya telah diencerkan dengan buer osat dan telah disaring pada hapusan

sampai semua bagian hapusan tertutupi oleh 7at warna. 1emudian tunggu selama '

menit. 3uer osat yang sebaiknya digunakan adalah dengan p% ?, namun pada

praktikum kali ini digunakan buer osat dengan p% &. :angkah terakhir dibilasmenggunakan aAuadest atau air mengalir tunggu hingga kering kemudian dapat dibaca

pada mikroskop.

#ara pembacaan hapusan yang benar adalah

. $ilih bagian yang akan dipakai (7ona dimana eritrosit tersebar rata)


13/16

*. Mulailah menghitung sel pada pinggir atas kebawah

'. Mulailah menghitung dari bagian ekor

Morologi 4ediaan apusan tipis

Dibedakan atas 5 kepala dan ekor

3agian badan dibagi beberapa 7ona5

• Fona 2 5 irregular, tidak teratur,berdesakan, '"

• Fona 22 5 tipis,tidak rata,berdesakan, "

• Fona 222 5 tebal, bergerombol,rouleuG, !"

• Fona 2/ 5 tipis , penyebaran rata, @"

• Fona / 5 tidak bertumpukan,penyebaran rata,bentuk utuh,"

• Fona /2 5 sangat tipis, lebih longgar dan jarang, H"(8ahma Euli.*)

S*-,% K,a$aan

. 1esalahan dalam persiapan penderita, pengambilan dan penyimpanan bahan

pemeriksaan

*. 4ediaan apus terlalu biru memungkinkan disebabkan oleh apusan yang terlampautebal , pewarnaan terlalu lama , kurang pencucian , 7at warna atau larutan dapar

yang alkalis.

'. 4ediaan apus terlalu merah mungkin disebabkan oleh sat warna sediaan atau larutan

dapar yang asam. :arutan yang terlalu asam dapat menyebabkan lekosit hancur.

. 3ercak-bercak 7at warna pada sediaan apus dapat disebabkan oleh 7at warna tidak

disaring sebelum dipakai atau pewarnaan terlalu lama sehingga 7at warna

mengering pada sedian.

!. Morologi sel yang terbaik adalah bila menggunakan darah tepi langsung tanpa anti

koagulan. 3ila menggunakan anti koagulan sediaan apus harus dibuat segera, tidak

lebih dari satu jam setelah pengambilan darah. $enggunaan antikogulan heparin

akan menyebabkan latar belakang berwarna biru dan lekosit menggumpal


14/16

?. 4ediaan hapus yang tidak rata dapat disebabkan oleh kaca pengapus yang tidak

bersih atau pinggirannya tidak rata atau oleh kaca objek yang berdebu, berlemak

atau bersidik jari.

&. =iksasi yang tidak baik menyebabkan perubahan morologi dan warna sediaan. 2ni

mungkin terjadi apa bila iksasi dilakukan menggunakan methanol yang tidak

absolut karena telah menyerap uap air akibat penyimpanan yang tidak baik.

@. =iksasi yang tidak dilakukan segera setelah sediaan apus kering dapat

mengakibatkan perubahan morologi lekosit.

(3ashar, ya7hid.*')

IKESIMPULAN

$ada praktikum kali ini dibuat hapusan dengan metode blood smear, dan dibuat hapusan

setipis mungkin serta digunakan pewarna giemsha dan wright untuk pengecatan sediaan

hapusan tersebut.

DA8TAR PUSTAKA

nonim.*.4ediaan pus Darah.

(online).tersedia5https5BBnae?H'.wordpress.comBtagBsediaan-apus-darah-tepiB.IDiakses5

*! Maret *?. 5!J

3ashar, ya7hid.*'.$embuatan dan $ewarnaan 4ediaan pusan.IonlineJ.tersedia 5

http5BBya7hid*@bashar.blogspot.co.idB*'BBpembuatan-dan-pewarnaan-sediaan-

apus.html.Idiakses * Maret *? .!J


15/16

8ahma Euli.*.Membuat 4ediaan pusan Darah.I>nlineJ.6ersedia 5 http5BBnaliskesehatan-

2ndonesia.3logspot.#o.2dB*B'BMembuat-4ediaan-pus-Darah-Dengan.%tml.Idiakses

* Maret *? '.*J

8iswanto. *'. Pemeriksaan Laboratorium Hematologi. Eogyakarta5 lamedia 1anal Medika

/anila.*.4ediaan apus darah tepi.IonlineJ.tersedia 5

http5BBprimaanilla.blogspot.co.idB*B!Bsediaan-apus-darah-tepi.html.Idiakses * Maret

*? .*J

Denpasar, *! Maret *?

$raktikan

$utu 8ina idhiasih

$&'*

:embar $engesahan

Mengetahui,

http://analiskesehatan-indonesia.blogspot.co.id/2011/03/Membuat-Sediaan-Apus-Darah-Dengan.Html.%5Bdiakseshttp://analiskesehatan-indonesia.blogspot.co.id/2011/03/Membuat-Sediaan-Apus-Darah-Dengan.Html.%5Bdiakseshttp://primavanilla.blogspot.co.id/2011/05/sediaan-apus-darah-tepi.html.%5Bdiakseshttp://primavanilla.blogspot.co.id/2011/05/sediaan-apus-darah-tepi.html.%5Bdiakseshttp://analiskesehatan-indonesia.blogspot.co.id/2011/03/Membuat-Sediaan-Apus-Darah-Dengan.Html.%5Bdiakseshttp://analiskesehatan-indonesia.blogspot.co.id/2011/03/Membuat-Sediaan-Apus-Darah-Dengan.Html.%5Bdiakseshttp://primavanilla.blogspot.co.id/2011/05/sediaan-apus-darah-tepi.html.%5Bdiakses


16/16

P,*-*-n# I P,*-*-n# II

dr. 4ianny %erawati, 4p.$1 8ini 8iowati, 3.4c

P,*-*-n# III P,*-*-n# I

2 1etut di 4antika, .Md.1 :uh $utu 8inawati, 4.4i

P,*-*-n#

2 1adek ryadi %artawiguna, .Md.1

laporan hapusan darah tepi

Documents

Transcript of laporan hapusan darah tepi