Laporan Praktikum Mikrfar Uji Sterilisasi

8/19/2019 Laporan Praktikum Mikrfar Uji Sterilisasi

1/9

Tujuan :

Menguji sterilitas suatu bahan, alat atau ruangan secara aseptik.

· Prinsip :

Tidak adanya pertumbuhan mikrob pada suatu alat atau bahan atau ruangan yangdapat menunjukan kondisi yang steril.

· Dasar Teori :

Populasi mikroba di alam sekitar kita sangat besar dan kompleks. Beratus-ratus

spesies berbagai mikroba biasanya menghuni bermacam-macam bagian tubuh kita,

termasuk mulut, saluran pencernaan, dan kulit.

Uji sterilitas pada suatu bahan , alat atau ruangan mempunyai fungsi penting untuk

mengetahui adanya tehnik aseptik. Uji sterilitas dapat dilakukan pula untuk ruangan

seperti ruang operasi juga pada sediaan farmasi misal cairan infus , obat tetesmata dll.

!uang steril sangat penting dalam bidang kesehatan, contoh ruang steril antara lain

ruang bedah, ruang pasca operasi, termasuk dalam industri farmasi, khususnya

sediaan steril "injeksi dan lain-lain#. !uang-ruang tersebut dibutuhkan adanya

pengujian sterilisasi yang baku. Untuk pengujian tersebut dibutuhkan adanya

kesterilannya sebab diharapkan tidak adanya kontak bakteri dengan bahan atau

alat yang digunakan yang pada akhirnya akan merugikan bagi manusia.

$terilisasi dalam mikrobiologi berarti membebaskan tiap benda atau substansi dari

semua kehidupan dalam bentuk apapun. Untuk tujuan mikrobiologi dalam usahamendapatkan keadaan steril, mikroorganisme dapat dimatikan setempat "in situ#

oleh panas "kalor#, gas-gas seperti formaldehide, etilenoksida atau betapriolakton

oleh bermacam-macam larutan kimia, oleh sinar lembayung ultra atau sinar

gamma. Mikroorganisme juga daapat disingkirkansecara mekanik oleh sentrifugasi

kecepatan tingggi atau oleh %ltrasi

$terilisasi dan densifektan sering digunakan di rumah sakit dan laboratorium

berbatas atau mengontrol pertumbuhan dari mikroorganisme yang berpotensi

pathogen untuk perlindungan dari pasien dan staf. &ua prosedur ini tidak

terhindarkan dan sebaiknya tidak dihindari. $terilisasi digunakan ketika inakti'asi

dari semua mikrooorganisme yang bersifat absolute. $terilisasi dimaksudkan aktifsecara %sika, kimia mekanik. Umumnya metode pengeringan dan pemanasan

digunakan dirumah sakit dan laboratorium

Untuk bekerja dalam ruang lingkup kecil disarankan menggunakan kamar steril

"books steril, kapel steril#. Ukuran dan konstruksinya sanagt ber'ariasi. (emari yang

terbuat dari logam ringan atau bahan sintesis yang dilengkapi dengan dinding gelas


2/9

atau pleksigelas lebar ini menjamin kondisi yang kedap udara, sehingga tidak ada

mikroorganisme dan ruang kerja yang dapat masuk kedalam kamar

!uang steril merupakan suatu keadaan ruang yang bebas dari semua bentuk

kehidupan mikroba yang patogen maupun yang non-patogen termasuk sporanya.

!uang steril sangat penting dalam bidang kesehatan. $eperti pada ruang sterilantara lain ruang bedah, ruang pascaoperasi termasuk dalam bidang industri

farmasi, yang terkhusus pada sediaan steril contohnya injeksi. !uang-ruang

tersebut dibutuhkan pengujian sterilisasi yang baku .

Bahan ataupun peralatan yang digunakan dalam bidang mikrobiologi, harus dalam

keadaan steril. )rtinya pada bahan tersebut tidak didapatkan mikroba lain yang

tidak diharapkan, baik yang akan menggangggu*merusak media ataupun

mengganggu kehidupan dan proses yang sedang berlangsung.

$terilisasi didesain untuk membunuh atau menghilangkan mikroorganisme. Target

suatu metode inakti'asi tergantung dari metode dan tipe mikroorganismenya, yaitu

tergantung dari asam nukleat, protein, atau membrane mikroorganisme tersebut.

)gen kimia untuk sterilisasi disebut sterilant .

· Alat dan Bahan :

+. unting steril

. a/an petri steril

0. Pinset steril 1. 2apas lidi steril

3. )lkohol 456

7. !odac plate

4. )mpul

8. 9ial*:lakon

;. Tetes mata

+5.


3/9

+1. Media $abaraud lukosa )gar

+3. Media >utrien )gar

· Cara Kerja :

+. ara 2erja Uji $terilitas !uangan

+# Bersihkan mea dengan alkohol.

# )mbil ca/an petri steril tuangi dengan media >) dan $&) biarkan terbuka

selama +3 menit , tututp kembali dan bungkus dengan kertas koran.

0# >) di inkubasi pada incubator pada suhu 04o dan $&) di inkubasi pada enkast

pada suhu kamar selama 1 jam.

1# $etelah di inkubasi amati ada atau tidaknya bakteri atau jamur. jika adalakukan pengecatan gram.

. ara 2erja Uji $terilitas !odac

+# $iapkan alat dan bahan.

# $iapkan rodac plate berupa kertas tebal*manila berukuran 3?3cm

0# (etakan kertas pada lantai "meja# lakukan usapan kapas lidi steril yang sudah

dibasahi media B=< cair, lalu kapas dibuang.

1# Ulangi dengan kapas lidi steril yang lain dengan cara yang sama, peras kapas

pada dinding tabung yang mengandung B=< , ketuk gojog 35?.

3# Pipet media tersebut bagi menjadi 1 " untuk media >), untuk mdia $)#

7# Tuangkan media media >) dan $) yang sudah terdapat media B=< pada

ca/an petri masing masing.

4# ) pada inkubator, $) di entkast.

8# Buat pe/arnaan sederhana untuk media $) dan pe/arnaan gram untukmedia >), amati dengan mikroskop.


4/9

0. ara 2erja Uji $terilitas )mpul

+# $iapkan ampul , media B=< , media Thioglikolat , media $) dan ca/an petristeril.

# )mbil sampel ampul ml masukan kedalam media B=< , media Thioglikolat

dan ca/an petri steril.

0# Masukan media $) ke dalam ca/an petri yang berisi sampel ampul, sambil

digoyang goyangkan hingga merata dan tunggu sampai medianya memadat.

1# Bungkus tabung yang berisi media B=< , media Thioglikolat dan ca/an petri

steril dengan kertas koran.

3#


5/9

3. ara 2erja Uji $terilitas Tetes Mata

+# )mbil ml sampel tetes mata dengan spuit.

#


6/9

1# Bungkus dengan koran dan inkubasi media B=< dan thioglikolatdidalam

inkubator pada suhu 045 selama 1 jam, dan inkubasi media $) dalam entkast

pada suhu kamar.

3# )mati pertumbuhan bakteri pada media B=< dan Thioglikolat pada tabung

reaksi setelah kassa diambil dari masing masing tabung. &an amati adanyapertumbuhan jamur pada ca/an petri dari media $).

7# =asil biakan mikroba pada masing masing media dilanjutkan dengan

pengecatan gram, kemudia amati hasil diba/ah mikroskop dengan perbesaran kuat

"pakai minyak imersi#

atatan

+. Untuk ruang operasi, dibutuhkan minimal +3 lempeng

agar "plate agar#

&erajat kontaminasi dapat diketahui bila

a# Terdapat 3 koloni tiap plate C baik

b# Terdapat 7-35 koloni tiap plate C cukup

c# Terdapat lebih 35 koloni tiap plate C jelek

. Dumlah sampel yang diuji diusahakan representati'e

0. Dumlah 'olume sampel yang dikultur pada mediatergantung kemasannya bila

a# 2urang dari +ml *35 mg C dipakai semuanya

b# +-1ml * 35-55mg Cdipakai setengahnya

c# 1-5ml * 55-355mg C dipakai ml * +55mg

d# (ebih atau sama 5ml Cdipakai +56 nya

Pembahasan :

Tujuan uji sterilisasi adalah menguji sterilitas suatu bahan, alat atau ruangan secara

aseptik. Uji sterilitas ini menggunakan media B=


7/9

ampul, 'ial*@akon, tetes mata, infus dan kassa. $terilisasi adalah proses yang

dirancang untuk menciptakan keadaan steril. !uang steril adalah keadaan ruang

yang bebas dari semua bentuk kehidupan mikroba yang patogen maupun non-

patogen termasuk sporanya. $terilitas ruangan sangat penting dalam dunia

kesehatan. !uang yang steril menjamin kontaminasi yang minimal terhadap

mikroorganisme. Uji sterilitas ruangan adalah salah satu percobaan dimanadilakukan uji mikroba dalam suatu ruangan apakah memenuhi syarat atau tidak, hal

ini biasanya digunakan dalam ruang operasi. Pada uji sterilitas ruangan ca/an petri

setelah dituang dan diberi taburan maka dibuka selama kurang lebih +3 menit hal

ini dilakukan karena pada umumnya mikroba akan berpindah tempat dari media

sterilatornya . Uji sanitasi ruangan secara rodac biasanya digunakan untuk menguji

sterilitas suatu permukaan pada ruangan dengan menggunakan rodac plate. !odac

plate yang digunakan terbuat dari kertas tebal * kertas manila , lubang pada rodac

plate di olesi dengan B=< cair, agar membasahi bagian yang dilubangi tersebut

untuk selanjutnya membasahi kapas lidi steril lainnya, sehingga pada saat di peras

pada dinding tabung B=< cair dapat di ketahui ada atau tidaknya mikroba tumbuh

pada bagian rodac plate tersebut " setelah diinkubasikan # dengan cara dipipet + ml

kemudian diinokulasi secara taburan dalam media >) dan media $). ) pada inkubator, $) di entkast.


8/9

inkubasi ketiga media menunjukan bah/a tetes mata tidak steril karena terjadi

pertumbuhan bakteri pada media B=< yang ditunjukan dengan adanya kekeruhan ,

dan pada ca/an petri media $) terbentuk koloni cenda/an.

Parameter kualitas untuk sediaan cairan infus yang harus dipenuhi adalah

steril, bebas partikel dan bebas pirogen disamping pemenuhan persyaratan yanglain. Pada sterilisasi cairan intra'ena selain pengujian sterilisasi menggunakan

media B=< , thioglikolat dan $) juga menggunakan metoda sterilisasi uap panas,

ada dua pendekatan yang banyak digunakan, yaitu

E F'erkill Pendekatan F'erkill dilakukan untuk membunuh semua mikroba, dengan

prosedur sterilisasi akhir pada suhu tinggi yaitu ++o selama +3 menit. &engan

cara ini, hanya cairan infus yang mengandung elektrolit tidak akan mengalami

perubahan. >amun cara ini sangat berisiko dilakukan pada cairan infus yang

mengandung nutrisi seperti karbohidrat dan asam amino karena bisa jadi nutrisi

tersebut pecah dan pecahannya menjadi racun.

E >on-o'erkill "bioburden-based# sesuai dengan perkembangan kedokteran yang

membutuhkan jenis cairan yang lebih beragam contohnya cairan infus yang

mengandung nutrisi seperti karbohidrat dan asam amino serta obat-obatan yang

berasal dari bioteknologi, maka berkembang juga teknologi sterilisasi yang lebih

mutakhir yaitu metoda >on-F'erkill atau disebut juga Bioburden, dimana

pemanasan akhir yang digunakan tidak lagi harus mencapai ++ derajat, sehingga

produk-produk yang dihasilkan dengan metoda ini selain dijamin steril, bebas

pirogen, bebas partikel namun kandungannya tetap stabil serta tidak terurai yang

diakibatkan pemanasan yang terlampau tinggi. &engan demikian infus tetapbermanfaat dan aman untuk diberikan.

Uji sterilitas kassa digunakan untuk mengetahui steril atau tidaknya kassa

sehubungan pemakaiannya yang dapat berkontak langsung dengan luka. Pada

percoban ini membuktikan bah/a kassa tidak steril karena dalam ca/an petri

terbentuk koloni cenda/an.

· Kesimpulan :

&ari hasil uji sterilisasi dapat disimpulkan bah/a

Uji sterilisasi ruangan menunjukan ruangan dalam keadaan steril dari cenda/an.

Uji sterilisasi rodac menunjukan ruangan "meja# dalam keadaan tidak steril.

Uji sterilisasi ampul menunjukan sampel didalam ampul dalam keadaan steril

sehingga memenuhi persyaratan sebagai obat suntik.


9/9

Uji sterilisasi 'ial * @akon menunjukan larutan didalamnya tidak steril karena terjadi

pertumbuhan mikroba.

Uji sterilisasi tetes mata menunjukan bah/a tetes mata dalam kondisi tidak steril

maka sebaiknya tidak lagi digunakan.

Uji sterilisasi infus menunjukan bah/a larutan didalamnya tidak steril.

Uji sterilisasi kassa serap menunjukan bah/a kassa serap tersebut sudah

terkotaminasi dengan bakteri dan cenda/an sehingga sudah tidak layak digunakan.

· Daftar Pustaka

&/idjoseputro,

&. +;;8.&asar-&asar Mikrobiologi . &jambatan Malang.

http**id.sh'oong.com*e?act-sciences*biology*+70;131-pengantar-mikrobiologi-

umum

9olk, G.). dan Gheeler, M.:. +;;5.Mikrobiologi &asar . Hrlangga Dakarta
http://id.shvoong.com/exact-sciences/biology/1639454-pengantar-mikrobiologi-umumhttp://id.shvoong.com/exact-sciences/biology/1639454-pengantar-mikrobiologi-umumhttp://id.shvoong.com/exact-sciences/biology/1639454-pengantar-mikrobiologi-umumhttp://id.shvoong.com/exact-sciences/biology/1639454-pengantar-mikrobiologi-umum

Laporan Praktikum Mikrfar Uji Sterilisasi

Documents

Transcript of Laporan Praktikum Mikrfar Uji Sterilisasi