Post on 04-Apr-2018
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
1/22
LAPORAN PRAKTIKUM
FAKTOR-FAKTOR YANG MEMPENGARUHI KERJA ENZIM
dibuat untuk memenuhi tugas praktikum
Modul Cellular and Molecular Basis of Inheritance
Oleh:
Kelompok 9
M. Ilyas Saputera
Azwar Lauzardi
Ilham Murtala
Noor Shabrina
Reni Dwi Parihat
Mulia Sari
Annisafitria
Eka Rahma
Abqariyatuzzahra M.
Novia Putri R.
Program Studi Pendidikan Dokter
Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
2012
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
2/22
Kata Pengantar
Segala puji dan syukur kami ucapkan kehadirat Allah Yang Maha Esa, yang telah
memberikan rahmat dan karunia-Nya serta nikmat yang tiada hentinya kepada manusia.
Terutama nikmat iman dan akal yang menjadikan manusia sebagai makhluk yang paling
sempurna. Dengan nikmat akal tersebutlah kita dituntut untuk dapat memanfaatkannya
dengan sebaik-baiknya tanpa menyimpang dari perintah-Nya.
Salawat serta salam bagi makhluk mulia junjungan kita baginda Nabi Muhammad
SAW, yang telah mengajarkan ilmu dari Allah kepada umat-umatnya. Ilmu tersebut tidak
akan habis sekalipun air laut dijadikan tinta untuk menuliskan ilmunya itu. Dan manusia
hanya diberi sedikit sekali.
Alhamdulillah, kami dapat menyelesaikan laporan praktikum tentang faktor-faktor
yang mempengaruhi kerja enzim. Semoga dengan tersusunnya makalah ini dapat menambah
pengetahuan kita. Tiada gading yang tak retak demikian pepatah mengatakan. Karena itu
tiada menutup kemungkinan jika dalam penulisan makalah ini terdapat banyak kesalahan dan
kekurangan. Untuk itu, segala kritik dan saran kami harapkan demi kesempurnaan makalah
ini. Terima Kasih.
Ciputat, 18 Nopember 2012
Kelompok 9
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
3/22
Daftar Isi
Kata Pengantar ....................................................................................................................... ii
Daftar Isi ................................................................................................................................ iii
1 Pengaruh Suhu terhadap Kecepatan Reaksi Enzim1.1Tujuan Praktikum ............................................................................................. 11.2Landasan Teori .................................................................................................. 11.3Alat dan Bahan .................................................................................................. 21.4Cara kerja ........................................................................................................... 21.5Hasil Percobaan ................................................................................................. 31.6Pembahasan ....................................................................................................... 31.7Kesimpulan ........................................................................................................ 4
2 Pengaruh Kadar Enzim terhadap Kecepatan Reaksi Enzim2.1Tujuan Praktikum ............................................................................................. 42.2Landasan Teori .................................................................................................. 42.3Alat dan Bahan .................................................................................................. 52.4Cara kerja ........................................................................................................... 52.5
Hasil Percobaan ................................................................................................. 6
2.6Pembahasan ....................................................................................................... 72.7Kesimpulan ........................................................................................................ 7
3 Pengaruh Kadar Substrat terhadap Kecepatan Reaksi Enzim3.1Tujuan Praktikum ............................................................................................. 83.2Landasan Teori .................................................................................................. 83.3Alat dan Bahan .................................................................................................. 93.4Cara kerja ........................................................................................................... 93.5Hasil Percobaan ................................................................................................. 103.6Kesimpulan ........................................................................................................ 10
4 Pengaruh pH terhadap Kecepatan Reaksi Enzim4.1Tujuan Praktikum ............................................................................................. 114.2Landasan Teori .................................................................................................. 114.3Alat dan Bahan .................................................................................................. 114.4Cara kerja ........................................................................................................... 134.5Hasil Percobaan ................................................................................................. 14
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
4/22
4.6Pembahasan ....................................................................................................... 144.7Kesimpulan ........................................................................................................ 16
Daftar Pustaka ........................................................................................................................ 17
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
5/22
1. Pengaruh Suhu terhadap Kecepatan Reaksi Enzim
1.1Tujuan Praktikum Untuk mengetahui pengaruh suhu terhadap aktivasi enzim amilase Untuk memperlihatkan kecepatan reaksi enzimatik sampai suhu tertentu sebanding
dengan kenaikan suhu
Mengetahui suhu optimum untuk reaksi enzimatik
1.2Landasan TeoriEnzim adalah protein-protein yang mengatur perubahan kimia dalam tubuh atau disebut
juga biokatalisator yang mempercepat reaksi tanpa ikut bereaksi di dalamnya. Jadi produk
yang dihasilkan dalam suatu reaksi tidak mengandung enzim. Enzim memiliki sifat yang
spesifik, artinya enzim hanya akan bekerja pada substrat-substrat tertentu atau tidak semua
reaksi kimia yang ada dalam tubuh dipercepat oleh satu enzim tersebut, melainkan sesuai
dengan reseptor-reseptor yang dikenali oleh enzim tersebut.
Aktivitas enzim didefinisikan sebagai kecepatan pengurangan substrat atau kecepatan
pembentukan produk pada kondisi optimum. Aktivitas enzim dipengaruhi oleh beberapa 4faktor, yaitu suhu, konsentrasi enzim, konsentrasi substrat, dan pH. Enzim akan bekerja lebih
cepat pada suhu, kosentrasi dan pH optimal enzim tersebut. Semakin tinggi suhu yang
diberikan maka semakin cepat enzim bekerja sampai pada titik optimum suhu untuk enzim
tersebut. Reaksi kimia umumnya akan berlangsung dua kali lebih cepat pada setiap kenaikan
suhu 10, sampai pada suhu 35 - 60. Jika enzim dinaikkan melebihi batas optimum suhu
tersebut, maka enzim akan mengalami denaturasi sehingga merusak fungsi katalisatornya
yang mengakibatkan enzim tidak akan bekerja. Sedangkan pada suhu di bawah suhu
optimum, enzim tidak akan bekerja optimal karena dalam keadaan tersebut tidak terjadi
benturan antara molekul enzim dan molekul substrat yang berarti tidak berlangsungnya suatu
reaksi dan tidak terbentuknya produk.
Suhu yang sangat rendah akan menyebabkan terhentinya kerja enzim secara reversible,
karena dalam keadaan tersebut tidak terjadi benturan antara molekul enzim [E] dan substrat.
Karena benturan tidak terjadi maka komplek E-S yang sangat penting pada reaksi enzimatik
tidak terjadi, hal ini secara otomatis menghambat terjadinya produk [P].
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
6/22
Kerja enzim akan semakin meningkat apabila suhu dinaikan. Hal ini terjadi karena
kenaikan suhu meningkatkan benturan antara enzim dan substrat. Kenaikan ini terjadi sampai
pada suhu tertentu, suhu ini disebut dengan suhu optimum.
Apabila suhu lebin tinggi dari suhu optimum, maka enzim akan terdenaturasi dan tidak
akan mampu menghasilkan produk, walaupun benturan antara enzim dan substrat semakin
sering terjadi. Denaturasi enzim dapat terjadi secara irreversible, apabila suhu kerja enzimatik
jauh melampaui suhu optimum.
Pati/amilum akan terhidrolisis menjadi maltosa, apabila diberi enzim amilase. Untuk
mengetahui keberadaan karbohidrat dalam amilum, maka diberikan larutan iodium. Amilum
akan berwarna biru seteah diberi larutan iodium, apabila terdapat karbohidrat di dalamnya.
1.3Alat dan Bahan Alat
1. Spektrofotometer 680 nm2. 8 buah tabung reaksi3. 1 buah rak tabung reaksi4. Pipet mikrometer
Bahan Spektrofotometer1. Amilase air liur, 50x pengenceran2. Larutan pati 0,4 mg/mL3. Pereaksi iodium4. Aquades
1.4Cara Kerja1. Siapkan 8 buah tabung reaksi (4 tabung Abs blanko dan 4 tabung Abs Sampel)2. Isilah setiap tabung reaksi dengan 1 ml pati 0,4 mg/mL3. Inkubasi 2 tabung (1 tabung Abs blanko dan 1 tabung Abs Sampel) pada setiap
suhu 0oC, 25
oC, 37
oC, dan 100
oC selama 5 menit
4. Tambahkan 200 uL liur (50x) pada setiap tabung sampel5. Setelah 1 menit tambahkan semua tabung dengan iodium 1 mL6. Berikan 7 mL akuades pada setiap tabung7. Baca serapan warna yang ditunjukkan oleh spektrofotometer 680 nm
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
7/22
1.5Hasil PercobaanTabel hasil percobaan
Suhu Abs Blanko Abs Sample V (unit/menit)
0oC 0,209 A 0, 152 A 0,057
25oC 0,191 A 0, 095 A 0,096
37oC 0, 304 A 0,202 A 0,102
100oC 0,222 A 0, 165 A 0,057
Diagram hasil percobaan dengan spertrofotometer
1.6 Pembahasan
Aktivitas enzim atau kerja enzim salah satunya
dipengaruhi oleh suhu, pada suhu terlalu rendah enzim tidak
akan bekerja otimal sedangkan pada suhu terlalu tinggi,
enzim akan terdenaturasi yang menyebabkan fungsi
katalisatornya hilang. Semakin tinggi suhu yang diberikan
maka kecepatan reaksi semakin cepat sampai pada titik
0.057
0.096 0.102
0.057
0
0.02
0.04
0.06
0.08
0.1
0.12
0oC 25oC 37oC 100oC
Pengaruh suhu terhadap kerja enzim
0oC
25oC
37oC
100oC
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
8/22
optimum suhu tersebut. Pada percobaan enzim amilase ini, suhu 0 kecepatan reaksinya
adalah 0, 057 unit/ menit, sedangkan pada suhu 25 kecepatan reaksinya semakin tinggi
yaitu 0, 096 unit/ menit, kemudian pada suhu 37 kecepatan reaksi enzim amilase tetap naik,
yaitu menjadi 0, 102 unit/ menit dan pada suhu 100
kecepatan reaksi kembali turunmenjadi 0, 057 unit/ menit. Sehingga dapat diketahui bahwa enzim amilase bekerja optimal
pada suhu 37, dan pada suhu di bawah dan di atas 37 kecepatan reaksinya lebih rendah.
1.7KesimpulanDari hasil percobaan dapat disimpulkan bahwa suhu optimum untuk kerja enzim
amilase dalam merubah amilum menjadi maltosa adalah 37oC. Apabila suhu lebih rendah
atau lebih tinggi dari suhu optimum, maka kecepatan kerja enzim akan berkurang
2. Pengaruh Kadar Enzim terhadap Kecepatan Reaksi Enzim.
2.1Tujuan Praktikum Untuk mengetahui pengaruh kadar enzim terhadap aktivitas enzim amilase. Membuktikan bahwa kecepatan reaksi enzim berbanding lurus dengan konsentrasi
enzim.
2.2Landasan TeoriPengaruh konsentrasi enzim pada laju aktivitas enzim-enzim yang derajat
kemurniannya tinggi, di dalam batas-batas tertentu, terdapat hubungan linear antara jumlah
enzim dan taraf aktivitas. (Pelczar, dkk. 1986). Makin tinggi konsentrasi enzim, makin besar
kecepatan reaksi enzim, sampai kecepatan maksimal. Jika kecepatan enzim sudah maksimal,
penambahan kadar enzim tidak akan menambah kecepatan karena substratnya habis. Pati /
amilum menjadi maltosa oleh enzim amilase. Bentuk pati akan berwarna biru setelah diberi
pelarut iodium.
Semakin tinggi konsentrasi enzim maka kerja waktu yang dibutuhkan untuk suatu
reaksi semakin cepat, sedangkan kecepatan reaksi dalam keadaan konstan.
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
9/22
Semakin tinggi konsentrasi substrat, semakin cepat kerja enzim, tapi jika kerja enzim telah
mencapai titik maksimal, maka kerja enzim berikutnya akan konstans.
2.3Alat dan BahanAlat :
tabung reaksi rak tabung reaksi spektrofotometer inkubator pipet tetes mikropipet
Bahan :
amilase liur aquades larutan pati pereaksi iodium
2.4Cara Kerja menyiapkan 8 tabung reaksi, kemudian labeli tabung reaksi 4buah untuk blanko dan 4
buah untuk sampel
menyiapkan air liur yang akan di encerkan dengan pengenceran 50X menyiapkan pati 0,4 mg/ml menyiapkan aquades membuat pengenceran air liur dengan menambahkan 5ml air liur dan 5 ml aquades
sehingga pengenceran menjadi 100 x , kemudian melakukan hal yang sama sehingga
pengencerannya menjadi 200x, dan 400 x
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
10/22
menambahkan larutan hasil pengenceran ke dalam tabung reaksi masing- masingdengan tabung reaksi berlabel 50x 100x 200x dan 400x
menambahkan 1ml pati dan 7ml aquades kedalam tabung reaksi yang berlabel blanko
memanaskan tabung reaksi dengan suhu 37 selama 1 menit setelah memanaskan,tambahkan iodium 200 mikroliter kemudian, baca pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 680 nm.
2.5Hasil Percobaan
0.065
0.058
0.05
0.025
0
0.01
0.02
0.03
0.04
0.05
0.06
0.07
50 x 100 x 200 x 400 x
V (unit/menit)
50 x
100 x
200 x
400 x
Kadar EnzimAbs
Blanko
Abs
Sampel
V (unit/menit)
50 x 0.069 0.004 0.065
100 x 0.069 0.011 0.058
200 x 0.069 0.019 0.05
400 x 0.069 0.044 0.025
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
11/22
2.6PembahasanBerdasarkan analisis diatas maka dapat diketahui bahwa besarnya konsentrasi enzim
berpengaruh terhadap reaksi pengubahan amilum menjadi maltosa. Hal ini terlihat dimana
konsentrasi enzim 100% mempunyai nilai laju reaksi sebesar 0,10 M/detik. Hal ini
disebabkan karena pada saat reaksi berlangsung (dengan kadar enzim 400 x) maka enzim
akan meningkatkan proporsi molekul yang mempunyai cukup energi untuk bereaksi sehingga
laju reaksi akan berjalan lebih cepat. Enzim akan menurunkan energi yang diperlukan reaksi
dan bukan meningkatkan jumlah energi dalam tiap molekul. Ini terjadi pada waktu substrat
diubah menjadi produk (hasil), penghalang (barrier) energi harus diatasi. Penghalang tersebut
adalah energi aktivasi. Adanya enzim akan menurunkan energi aktivasi suatu reaksi. Jika
energi aktivasi suatu reaksi itu rendah maka akan lebih banyak molekul (substrat) yang dapat
bereaksi sehingga waktu yang diperlukan oleh enzim amilase untuk mengubah amilum
menjadi maltosa pun lebih singkat, oleh karena itu, laju reaksi pun menjadi lebih cepat.
Laju reaksi menurun pada kadar enzim 200x yakni menjadi 0,03M/detik dalam waktu
24 menit, serta laju reaksi juga menurun pada kadari enzim 100 x yang bernilai 0,01 M/detik
dalam waktu 36 menit. Hal ini dikarenakan pada kadar enzim tersebut mempunyai kecepatan
reaksi yang lambat karena pada waktu sebstrat diubah menjadi produk (hasil), penghalang
(barrier) yang disebut energi aktivasi tidak dapat dikurangi (diturunkan) dalam reaksi
tersebut. Karena energi aktivasi tinggi, maka molekul (substrat) lebih sedikit yang bereaksi
sehingga waktu yang diperlukan pun lebih lama dan pada akhirnya laju reaksi pun lebih
lambat.
Pada kadar enzim 50 x juga mengalami penurunan kecepatan. Reaksi yang dihasilkan
lebih lama. Ketidak aktifan enzim disebabkan karena enzim dipanaskan. Akibat pemanasan
tersebut, meka enzim yang merupakan protein mengalami denaturasi yakni peristiwa
perubahan struktur protein dari bentuk tiga dimensi menjadi tidak beraturan sehingga substrat
tidak dapat terikat dengan enzim. Oleh karena itu enzim kehilangan sifat katalisnya.
2.7KesimpulanBerdasarkan percobaan di atas, semakin besar konsentrasi enzim (pengenceran
sedikit), maka semakin besar pula kecepatan reaksinya. Sebaliknya, semakin kecil
konsentrasi enzim (pengenceran banyak), maka semakin kecil pula kecepatan reaksinya. Pati
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
12/22
/ amilum menjadi maltosa oleh enzim amilase. Bentuk pati akan berwarna biru setelah diberi
pelarut iodium.
3. Pengaruh Kadar Substrat terhadap Kecepatan Reaksi Enzim.
3.1Tujuan Praktikum Untuk mengetahui pengaruh kadar substrat terhadap aktivitas enzim amylase. Membuktikan bahwa kecepatan reaksi berbanding lurus dengan kecepatan substrat.
3.2Landasan TeoriEnzim adalah molekul protein yang bertindak sebagai katalis biologi. Mereka
meningkatkan laju reaksi tanpa mengubah proses keseluruhan. Mereka adalah rantai panjang
asam amino terikat bersama oleh ikatan peptida.Mereka terlihat di semua sel hidup dan
mengendalikan proses metabolisme dimana mereka diubah menjadi energi dan nutrisi sel-sel
baru. Enzim juga membantu dalam pemecahan bahan makanan menjadi bentuk yang palingsederhana.Reaktan dari enzim yang direaksikan disebut substrat dan masing-masing enzim
memiliki karakter yang spesifik, bertindak pada substrat tertentu untuk menghasilkan produk-
produk tertentu. Pendekatan utama untuk mempelajari mekanisme reaksi enzim-katalis
adalah untuk menentukan laju reaksi dan perubahan dalam respon dengan perubahan
parameter seperti konsentrasi substrat, konsentrasi enzim, pH, dan temperatur.Ini
dikenalsebagai kinetika enzim .Salah satu parameter penting yang mempengaruhi laju reaksi
dikatalisis oleh enzim adalah konsentrasi substrat.
Pada konsentrasi substrat yang tinggi, acap kali ditemukan laju reaksinya lebih kecil
dari nilai maksimum. Hal ini dapat diterapkan bahwa pada konsentrasi tinggi tersebut,
substrat dapat menghambat laju konversi menjadi produk. Jenis penghambatan ini akan
membentuk komplek (dead end complex) satu sisi manakala molekul substrat terikat pada
enzim, dan molekul substrat lain terikat pada sisi lain (sekunder) enzim. Sebagai contoh,
invertase dihambat oleh sukrosa pada konsentrasi tinggi, penisilin asilase terhambat pada
konsentrasi tinggi bensil penisilin (Suryani dan Mangun widjaja, 2002).
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
13/22
3.3Alat dan Bahan Alat
- Tabung reaksi- Gelas beker- Pipit micrometer- Incubator
Bahan- Enzim amylase dalam air liur- Larutan pati 0.4 mg/mL- Pereaksi iodium- Aquades
3.4Cara kerja
1) Lakukan pengenceran 1 dengan mencampurkan 1 mL larutan pati 0.4 mg/mL dengan 9mL larutan aquades dalam gelas beker sehingga terbentuk larutan pati dengan
konsentrasi 0.04 mg/mL.
2) Lakukan pengenceran 2 dengan mencampurkan 1mL larutan pati 0.04 mg/mL dengan 9 mL larutan
aquades sehingga terbentuk larutan pati
0.004mg/mL.
3) Lakukan pengenceran 3 dengan mencampurkan 1mL larutan pati 0.004 mg/mL dengan 9 mLlarutan aquades sehingga terbentuk larutanpati
0.0004 mg/mL.
4) Siapkan sample berupa1 mL larutan pati 0.4 mg/ mL dalam 2 tabung reaksi beri label ujidan blanko pada masing- masing tabung. Lakukan juga pada pati dengan konsentrasi
0.04mg/mL, 0.004mg/mL, dan konsentrasi 0.0004 mg/mL.
5) Masukkan seluruh tabung dalam incubator selama 5 menit.6) Tambahkan 200 uL air liur pada tabung uji. Diamkan selama 1 menit. Lalu beri larutan
iodium
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
14/22
7) Berseluruh tabung dengan 7 mL aquades8) Baca pada sprektofotometer dengan panjang gelombang 680 nm.
3.5Hasil PercobaanSuhu Abs Blanko Abs Sampel V (unit/menit)
0,0004 mg/mL 0,257 A 0,241 A 0,016 A
0,004 mg/mL 0,130 A 0,151 A 0,021 A
0,04 mg/mL 0,150 A 0,093 A 0,057 A
0,4 mg/mL 0,140 A 0,048 A 0,097 A
3.6KesimpulanSemakin tinggi kadar substrat maka semakin cepat pula waktu yang dibutuhkan enzim
untuk bereaksi. Akan tetapi jika kecepatan sudah maksimum, maka penambahan konsentrasi
substrat tidak akan berpengaruh lagi karena enzim sudah habis berikatan/bereaksi.
0.016
0.021
0.057
0.092
0
0.01
0.02
0.03
0.04
0.05
0.06
0.07
0.08
0.09
0.1
0,0004 M 0,004 M 0,04 M 0,4 M
kecepatan (V)
0,0004 M
0,004 M
0,04 M
0,4 M
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
15/22
4. Pengaruh pH terhadap Kecepatan Reaksi Enzim
4.1Tujuan Praktikum Untuk Mengetahui pengaruh pH terhadap aktivitas enzim amilase.
4.2Landasan TeoriEnzim adalah polimer biologis yang mengatalisis reaksi kimia yang memungkinkan
berlangsungnya kehidupan seperti yang kita kenal. Keberadaan dan pemeliharaan rangkaian
enzim yang lengkap dan seimbang merupakan hal yang esensial untuk menguraingkannutrien menjadi energi dan chemical buildingblock(bahan dasar kimiawi); menyusun bahan-
bahan dasar tersebut menjadi protein, DNA, membran, sel, dan jaringan; serta memanfaatkan
energi untuk melakukan motilitas sel, fungsi saraf, dan kontraksi otot.
Enzim yang mengatalis perubahan satu atau lebih senyawa (substrat) menjadi satu
atau lebih senyawa lain (produk) meningkatkan laju reaksi setidaknya 106dibandingkan jika
tidak dikatalis. Seperti semua katalis lain, enzim tidak berubah secara permanen atau
dikonsumsi sebagai konsekuensi dari keikutsertaannya dalam reaksi yang bersangkutan.
Selain sangat efisien, enzim juga merupakan katalis yang sangat selektif. Tidak seperti
kebanyakan katalis yang digunakan dalam bidang kimia sintetik, enzim bersifat spesifik baik
bagi tipe reaksi yang dikatalisis maupun substrat tau substrat-substrat yang berhubungan erat.
Aktivitas enzim dapat diamati dari sisa substrat, pH, suhu, dan indikator. Aktivitas
enzim dapat diamati dari sisa substrat atau produk yang terbentuk. Faktor yang
mempengaruhi pengukuran aktivitas enzim antara lain konsentrasi enzim dan substrat, suhu,
pH, dan indikator.
Amilase liur akan aktif pada pH sekitar 6. Pati/ amilum dapat terhidrolisis menjadi
maltosa oleh enzim amilase. Bentuk pati bila diberi pelarut iodium akan berwarna biru.
4.3Alat dan Bahan- Sampel : - Larutan pati 1 % pada pH 1
- Larutan pati 1 % pada pH 3
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
16/22
- Larutan pati 1 % pada pH 5
- Larutan pati 1 % pada pH 7
- Larutan pati 1 % pada pH 11
- Amilase liur, pengenceran 100x
- Pereaksi iodium
- Aquades
- Tabung reaksi 5 buah
- Rak tabung reaksi
- Pipet tetes
- Mikropipet
Larutan Pati 1 % pH 1, 3, 5, 7, 11 dan larutan iodium
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
17/22
Pipet tetes
Mikropipet
4.4Cara Kerja
1. Siapkan 5 tabung reaksi dan labeli tabung yaitu pH 1, pH 3, pH 5, pH 7, pH 112. Masukkan 2 ml larutan pati sesuai dengan pH yang tertera di label3. Masukkan 2 ml air liur ke dalam masing-masing tabung reaksi4. Inkubasi campuran larutan pati dan air liur tersebut pada suhu 370 selama 15 menit5. Setelah diinkubasi, teteskan pereaksi iodium kedalam masing-masing tabung reaksi6. Amati perubahan warna yang terjadi7. Tambahkan 3 ml aquades pada masing-masing tabung reaksi
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
18/22
8. Lakukan pengukuran kandungan protein dalam campuran tersebut denganspektrofotometer
4.5Hasil PercobaanSetelah dilakukan percobaan dan pengamatan, berikut hasil yang didapatkan :
pH Abs Sampel Warna
1 1,345 Biru
3 1,234 Biru donker
5 0,432 Ungu muda
7 0,209 Bening
11 0,209 Ungu lebih muda
4.6PembahasanKeberadaan enzim dapat diuji dengan pereaksi biuret. Warna biru/ungu yang
dihasilkan setelah dimasuki indikator protein yaitu biuret menunjukkan adanya kandungan
protein dalam larutan tersebut. Pada percobaan ini, campuran larutan pati dan amilum yang
awalnya tidak berwarna, setelah dimasuki pereaksi iodium rata-rata mengalami perubahan
1.345
1.234
0.432
0.209
0.298
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
1.6
1 2 3 4 5
1
2
3
4
5
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
19/22
warna. Larutan pati yang mengandung pH 1 mengalami perubahan warna menjadi biru, pH 3
menjadi biru donker, pH 5 menjadi ungu muda, ph 11 menjadi ungu namun lebih muda dari
pH 5, sedangkan larutan yang mengandung pH 7 tidak mengalami perubahan warna.
Larutan pati pH 1, 3,5,7,dan 11 dan air liur sebelum ditetesi pereaksi iodium
Setelah ditetesi pereaksi iodium
Perubahan warna tersebut juga menunjukkan adanya aktivitas reaksi enzim yang
memiliki tingkat kecepatan sesuai dengan warna yang dihasilkan. Semakin tua warna biru
menunjukkan adanya kandungan protein yang lebih banyak pada larutan tersebut, ini berarti
protein berupa amilum dalam larutan tersebut tidak terhidrolisis menjadi maltosa karena
enzim tidak bekerja secara maksimal.
Untuk membuktikan teori tersebut, dilakukan pengukuran konsentrasi protein dengan
spektrofotometer. Hasil pembacaan spektrofotometer menunjukkan bahwa larutan yang
mengandung pH 1 memiliki konsentrasi protein 1,345 , pH 3 konsentrasi proteinnya 1,234 ,
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
20/22
pH 5 konsentrasi proteinnya 0,432 , pH 7 konsentrasi proteinnya 0,209 , pH 11 konsentrasi
proteinnya 0,298.
4.7KesimpulanAktivitas enzim bekerja secara maksimum pada pH 7, dan pada pH 7 merupakan pH
optimum pada percobaan ini karena jumlah pati berkurang, sehingga dapat dihidrolisis
menjadi maltosa. Sedangkan pada pH 1 dan 3 enzim tidak bekerja, kemudian pada pH 5 dan
11 enzim bekerja namun tidak maksimal.
7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
21/22
DAFTAR PUSTAKA
W.A. Newman Dorland. Kamus Kedokteran Dorland.-Ed 31-. Jakarta: EGC; 2010.
Devi A, Endah W, Et Al. Buku Panduan Praktikum Modul Celluler & Molecular Basis Of
Inheritance Semester I. Jakarta: PSPD FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. 2012.
K.Robbert Murray.2003.Biokimia Harper. Dublin, Ohio : EGC
Syamsuri,Istamar,dkk.2002.Biologi 3A untuk SMA Kelas XII. Sem.1. Jakarta : Erlangga
Damin S. Pengantar Kimia Buku Panduan Kuliah Mahasiswa Kedokteran dan Program Strata
I Fakultas Bioeksakta. Jakarta: EGC; 2009
Campbell, Nell A dan Jane B.Reece..BiologiEight.Edition Neil A.Campbell & Jane B.Reece.
Jakarta : Erlangga. 2010
I Nyoman Suarsana. Enzim dan Koenzim. (cited 18/11/12). Available from
http://staff.unud.ac.id
Elidar Naiola. Karakteristik ddan Optimasi Media Produksi Amilase dari Aspergilus Niger
Dab Aspergilus Clavatus. Des 2002 (Cited 18/11/12). Available from
http://elib.pdii.lipi.go.id
Annisa Rachma. Kajian Pengaruh Suhu, pH, Waktu dan Konsentrasi Inhibitor Akar Kawao
(Milletia Sericea) pada Degradasi Sukrosa oleh Invertase. 2006 (cited 18/11/12).
Available fromhttp://repository.ipb.ac.id
ENZIM. http://ejurnal.fikk.ung.ac.id/index.php/FSC/article/download/75/28./html .[diunduh
17/11/12].
http://staff.unud.ac.id/http://staff.unud.ac.id/http://elib.pdii.lipi.go.id/http://elib.pdii.lipi.go.id/http://repository.ipb.ac.id/http://repository.ipb.ac.id/http://repository.ipb.ac.id/http://repository.ipb.ac.id/http://elib.pdii.lipi.go.id/http://staff.unud.ac.id/7/30/2019 Laporan Praktikum Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim
22/22